1目的
1.1 观察霉菌的菌丝以及菌丝体。
1.2 观察霉菌营养和气生菌丝体的特化形态
1.3 学会用水浸法观察霉菌的技术。
2 原理
霉菌形态比细菌、酵母菌复杂,个体比较大,具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。霉菌营养体的基本形态单位是菌丝,包括有隔菌丝和无隔菌丝。营养菌丝分布在营养基质的内部,气生菌丝伸展到空气中。营养菌丝体除基本结构以外,有的霉菌还有一些特化形态,例如假根、匍匐菌丝、吸器等。霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体,例如分生孢子,孢子囊等,包裹其内或附着其上的有各类无性孢子;还包括有性繁殖结构,例如子囊果,其内形成有性孢子。在观察时要注意细胞的大小,菌丝构造和繁殖方式。
3 材料
3.1器械
接种针、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸管
3.2药品
乳酸一石炭酸液、PDA培养基(配方见附录)
3.3菌种
黑根霉(Rhizopus nigricans)、总状毛霉(Mucor racemosus)、产黄青霉(Penicillum chrysogenum)、木霉(Trichoderma spp.)、黑曲霉(Aspergillus nigricans)、犁头霉(Absidia spp.)等斜面菌种。
4 流程
倒平板→接种→制片→镜检→描述绘图
5 步骤
5.1倒平板
将PDA培养基熔化后,倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内,凝固后使用。
5.2接种与培养
将青霉、木霉、毛霉、曲霉、根霉等接种在不同的平皿中。置于28—30℃的恒温箱中培养3-7天。
5.3制水浸片
取洁净的载玻片,滴加一滴乳酸一石炭酸液,挑取不同菌株的一团菌丝,分别置于不同的载玻片上(用记号笔标记菌株名称),加盖玻片。
5.4观察
5.4.1观察青霉、木霉、毛霉、曲霉形态
选取标记青霉、木霉、毛霉、曲霉的载玻片,观察霉菌的菌丝及其分隔情况。观察菌丝体。观察分生孢子着生情况(要求辨认分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子)。
5.4.2 观察根霉形态
选取标记根霉的载玻片,观察假根、匍匐枝、孢子囊柄、孢子囊以及孢囊孢子。
5.4.3 观察犁头霉形态
选取标记犁头霉的载玻片,观察梨头霉的接合孢子。
6 结果
7.1把观察到的各种霉菌绘图,并注明各部分名称。
7.2列表比较根霉与毛霉;青霉与曲霉在形态结构上的异同。
7 思考
7.1为何要用乳酸一石炭酸溶液作霉菌水浸片?
7.2比较霉菌菌丝与假丝酵母菌丝的区别。
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