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    细菌生化试验——硝酸盐还原试验



    录入时间:2008-9-12 9:34:32 来源:青岛海博

       
       原理:有的细菌能把硝酸盐还原为亚硝酸盐,而亚硝酸盐能和对氨基苯磺酸作用生成对重氮基苯磺酸,且对重氮基苯磺酸与α-萘胺作用能生成红色的化合物N-α-萘胺偶氮苯磺酸。
    (一)适用于需氧菌的方法
    培养基:
    硝酸钾(不含NO2-)         0.2g
    蛋白胨                      5g
    蒸馏水                      1000ml
    溶解,调节pH至7.4,分装试管。每管约5毫升,15磅高压灭菌15分钟。
    试剂:
    甲液    对位氨基苯磺酸         0.8g
    5N醋酸溶液            100ml

    乙液    α—萘胺               0.5g
    5N醋酸溶液            100ml
    方法:接种细菌后37℃培养4天,沿管壁加入甲液二滴与乙液二滴,当时观察。阳性者立刻呈红色。
    (二)厌氧菌硝酸盐培养基法
    培养基:
    硝酸钾(不含NO2-,化学纯)    1g
    磷酸氢二钠                     2g       
    葡萄糖                         1g 
    琼脂                           1g
    蛋白胨                         20g
    蒸馏水                         1000ml
    加热溶解,调整pH至7.2,过滤,分装试管,15磅高压灭菌15分钟。
    方法:接种后作厌氧培养,试验方法和结果观察同上法,但培养1~2日即可。

     

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