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血液增菌肉汤、双相血培养瓶与全自动血培养系统应用对比



录入时间:2011-3-29 10:27:21 来源:医源世界

1 材料和方法
  1.1 材料
   
  1.1.1 标本来源
  本院2000年1月~2002年12月门诊及住院患者的血液及骨髓标本    
  1.1.2 培养基
  法国生物梅里埃公司的miniVITAL专用需氧血培养瓶、上海奥普生物技术公司的双相需氧血培养瓶、浙江军区后勤部卫生防疫检验所的血液增菌肉汤。   
  1.1.3 仪器
  法国生物梅里埃公司的miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统。   
  1.2 方法
   成人采血5~10ml,婴幼儿采血1~3ml,骨髓采1~2ml,2000年1~12月标本449份注入血液增菌肉汤、2001年1~12月标本1001份注入双相需氧血培养瓶、2002年1~12月标本1028份注入miniVITAL专用需氧血培养瓶,分别按操作规程 [2]  、miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统操作说明培养、分离、鉴定。
  2 结果   
  2.1 分离菌株 类
  增菌肉汤449份标本,阳性48份,阳性率10.69%,检出5属7种菌;双相瓶1001份标本,阳性245份,阳性率24.48%,检出9属12种菌(含苛养菌2种);miniVITAL培养系统1028份标本,阳性228份,阳性率22.18%,检出11属16种菌(含苛养菌4种)。  见表1。
  表1 增菌肉汤、双相瓶及miniVITAL培养系统检出菌株种类 (略)
      
  2.2 阳性检出时间及污染率
  增菌肉汤阳性检出时间最快24h,最慢168h;24h检出率2.08%(1/48),48h检出率27.08%(13/48);污染率1.11%(5/449)。双相瓶阳性检出时间最快16h,最慢168h;24h检出率9.39%(23/245),48h检出率58.78%(144/245);污染率0.60%(6/1001)。miniVIˉTAL培养系统检出时间最快2.5h,最慢168h;24h检出率60.53%(138/228),48h检出率89.04%(203/228);污染率0.39%(4/1028)。
  3 讨论
  3.1 增菌肉汤、双相瓶、miniVITAL 培养系统的血培养阳性率分别 10.69%、24.48%、22.18%,分别检出5属7种菌、9属12种菌(含苛养菌2种)、11属16种菌(含苛养菌4种),说明双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤 适于细    菌,特别是苛养菌生长。
3.2 由于双相瓶加入琼脂斜面,减少了转种环节,有利于细菌特别是苛养菌生长,因此血培养阳性检出时间较增菌肉汤有所加快,而miniVITAL培养系统采用同源荧光技术,以CO 2 生成、pH值改变、氧化还原电位变化所致荧光下降的程度反映微生物的生长,它可以15min判读1次,因而使血培养阳性检出时间 大提高,实验表明miniVITAL培养系统的24h、48h阳性检出率均远高于双相瓶及增菌肉汤。3.3 实验显示,由于采用了塑盖和胶塞结合的瓶盖工艺,使双相瓶、miniVITAL培养系统血培养污染率仅分别为0.60%、0.39%,而无此工艺的增菌肉汤血培养污染率则高达1.11%。总之,由于富含细菌,尤其是苛养菌生长所需的氨基酸、维生素及生长因子等营养素,含有可抗凝、抗补体、抗吞噬、拮抗某些抗菌药物的聚茴香脑磺酸钠,使双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤更有利于各类病原菌快速生长;而采用塑、胶结合瓶盖可减少双相瓶、miniVITAL培养系统污染可能性;由于使用了同源荧光技术,自动侦测技术,miniVITAL培养系统阳性检出时间大大快于双相瓶及增菌肉汤。本次实验表明miniVITAL培养系统能高速、准确地检出包括苛养菌在内的 种病原菌,但成本较高,适于在省、市级的大、中型医院及条件较好的县级医院使用,双相瓶能较快、较准地检出病原菌,适于在 般县级医院使用,而传统增菌肉汤因其检出率低,检出速度慢而应逐步淘汰。
 
作者:郭 民 孟 伟
  参考文献    
  1 周贵民.努力提高血液细菌培养阳性率.中华医学检验杂志,1999,22:69-70.
  2 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程,第2版.南京:东南大学出版社,1997:475-548.   

 

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