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细菌生化试验——糖类发酵(分解)试验



录入时间:2008-9-12 8:14:15 来源:青岛海博

   原理:细菌含有分解不同糖(醇、苷)类的酶,因而分解各种糖(醇、苷)类的能力也不一样。有些细菌分解某些糖(醇、苷)产酸(符号:+)、产气(符号:○),培养基由兰变黄(指示剂溴麝香草酚兰由兰遇酸变黄的结果),并有气泡;有些产酸,仅培养基变黄;有些不分解糖类(符号:-),培养基仍为兰色。
  (一)适用于需氧菌的方法
培养基  用邓亨氏(Dunham)蛋白胨水溶液(蛋白胨1g,氯化钠0.5g,水100ml,pH7.6按0.5~1%的比例分别加入各种糖),每100ml加入1.2ml的0.2%溴麝香草酚蓝(或用1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1ml)作指示剂。分装于试管(每一个试管事先都加有一枚倒立的小发酵管),10磅高压灭菌10分钟。
如在培养基中加入琼脂达0.5~0.7%,则成半固体,可省去倒立的小发酵管。
   0.2%溴麝香草酚蓝溶液配法:
   溴麝香草酚蓝            0.2g    
   0.1N NaOH              5ml
  蒸馏水                  95ml
方法:从琼脂斜面的纯培养物上,用接种环取少量被检细菌接种于糖发酵管培养基中(如为半固体,应穿刺),在37℃培养,一般观察2~3天,观察时用上述符号标记之。

(二)适用于厌氧菌的方法
培养基:
蛋白胨                  20g          
氯化钠                  5g
琼脂                    1g 
1.6%溴甲酚紫酒精溶液   1ml 
糖                      10g
硫乙醇酸钠              1g
蒸馏水                  1000ml
将胨、盐、硫乙醇酸钠、琼脂和水放于烧瓶内,加热使融化,再加入所需的糖,调整pH到7.0,加入指示剂,分装试管,在10磅高压灭菌15分钟后,做成高层。
       方法  将厌氧菌的培养物用穿刺接种法接种于上述培养基的深部,于37℃培养。结果观察同需氧菌。

 

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