组织培养已成为当前农林种苗生产中的一种重要的繁殖手段，与常规的无性繁殖方法相比，它具有繁殖速度快、周年生产、产品一致性好等优点，尤其在繁殖一些种源稀缺的品种时，更能体现它的优势。红叶石楠是近年从国外引进的一个国际新品种，组织培养可以分以下几个步骤进行：外植体的取得→初代培养（无菌系的建立）→继代培养（增殖培养）→生根培养→炼苗及过渡移栽→移植到大田。

 

　　外植体的取得

　　选择红叶石楠的茎尖和茎段作为组培用的外植体。在取得红叶石楠母株后，先置于温室内培养2周左右，期间注意不洒叶面水，每隔3－5天喷施一次杀菌剂，可有效降低初代培养时的污染率。在实际操作中，选取嫩枝先端未木质化和半木质化部分，剪成长10cm左右的单芽，茎段部分去叶留2mm左右叶柄，茎尖部分可保留半张小叶，以饱和洗衣粉溶液浸泡3分钟，用清水冲洗后备用。

 

　　初代培养

　　清洗后的外植体在接种前需进行消毒处理，在超净工作台上用75％酒精浸泡10秒钟，再转入0.15％升汞溶液中灭菌8分钟，倒去灭菌液，用事先准备好的无菌水冲洗4－5次，沥干水后，即可将带腋芽的茎段或茎尖以生态学下端朝下，垂直接种到初代培养基上，以每瓶培养基接种一个外植体为宜。经过多次试验，初代培养基以1/2MS+蔗糖30g＋琼脂7g＋2.0BA+0.2IBA为最佳，pH值5.5－5.8，培养室温度控制在25℃－30℃之间，光照12小时。接种后一周左右腋芽开始萌动，30－40天可伸长到2cm左右，即可切下进入下一阶段的继代（增殖）培养。

 

　　继代培养（增殖培养）

　　一般第一次继代时增殖率较低，经2－3次继代后增殖数可达5倍左右。继代培养基可用MS+1.0BA+0.1IBA，pH值5.5－5.8之间，每日光照12小时。无根的试管苗经30－40天培养达到3cm左右时，即可切割以扩大繁殖。当继代苗达到一定数量后，可以进行生根培养。

 

　　生根培养

　　当红叶石楠无根苗长到高2cm左右时，可转移到生根培养基上培养。生根培养基可用1/2MS+0.2-0.3NAA，一般经一周左右可见红色根生成，30－40天后根长1－3cm，即可进行炼苗反驯化，准备移栽。

 

　　炼苗及过渡移栽

　　红叶石楠组培苗移栽可省略瓶内炼苗过程，如能在温室中拧松瓶盖放置3－5天炼苗则更好，但要注意温度应控制在20℃－30℃之间。过渡移栽是整个组培过程中最为关键的一步，如失败，则前功尽弃。因此移栽前要准备充分，如能在早春和秋冬季移栽在温床上效果最佳。在实际操作中，应根据不同地区的气候特点而有所区别。在江浙一带，过渡苗床可建在普通单体塑料大棚内，床宽1.2m左右，床四周用砖砌高30cm，床底整平，有条件的可加铺地热加温线，上铺15－25cm的移栽基质，基质以蛭石∶珍珠岩∶泥炭＝1∶1∶1为好。

　　组培苗是在无菌条件下繁育的，在移栽过程中对外界环境需要一个渐进的适应过程，因此需要对过渡苗床进行较为严格的消毒处理。实践中我们使用1000倍敌克松溶液浇透整个苗床基质，再用0.15％高锰酸钾溶液喷洒苗床表面及四周，24小时后即可移栽小苗。也可用800倍福尔马林喷洒苗床表面，用塑料薄膜密封24小时以上，再通风12小时，即可使用。

　　幼苗从瓶内取出后，用清水将根部的琼脂等洗净，同时应注意尽量减少根部损伤。种入苗床后，浇灌时尽可能选择清洁的水源，移栽当天喷施1/4－1/2MS营养液，并喷施800－1000倍甲基托布津或1000倍多菌灵药液，以后每隔一周喷施一次，需连续喷施3－4次，移栽初期需特别注意保持苗床和空气湿度，一般需全封闭管理一周左右，再半封闭一周左右，根据天气情况在25天左右可逐步通风，除去覆盖物。在春秋季节移栽时，需遮荫三周左右，冬季遮荫二周左右即可。同时应注意控制苗床温度在15℃－30℃之间才利于成活，如环境温度超过35℃，则不宜移栽。一般过渡移栽50天后，小苗就可上盆移栽，春季就可移入大田。

 

　　大田移栽

　　大田移栽的时机应根据小苗生长情况和天气情况确定。一般小苗长至5cm以上移栽就可以保证95％以上成活率，如在10cm以上移栽则效果更好。大田移栽后期管理与其他方法繁殖的小苗一样操作即可。

 

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