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一种新型肠杆菌科试验卡的实验室应用评价



录入时间:2011-3-4 14:10:56 来源:中华检验医学网

 Laboratory evalsuation of test cards for detection of bacteria.
  HAN Xiao-sheng,ZHANG Shu-fang,WU Duo-rong,et al.
  (laboratory Department of Haikou Municipal People's Hospital,Haikou570208,Hainan,P.R.China)     
      
  摘要:目的 了解天地人微生物肠杆菌科试验卡的性能质量。方法 分别运用天地人微生物肠杆菌科试验卡与VITEK32仪和K-B法对临床分离出的206株肠杆菌科细菌的鉴定和药敏进行平行比较。 结果 VITEK32仪鉴定符合率在99%以上,天地人鉴定符合有198株,符合率96.1%,两种方法鉴定率差异无显著性(χ 2 =0.44,P>0.05);对药敏用天地人试验卡与K-B法对13种抗生素敏感度进行逐一比较,其中敏感度存在58次差异,差异性为2.17%,经统计学处理差异无显著性(χ 2 =4.82,P>0.05)。 结论 天地人试验卡具有很好的准确性、可靠性,适合实验室的常规检验。
   
  关键词:试验卡;肠杆菌科;评价
   
  肠杆菌科细菌临床感染日益严重,已逐渐成为医院感染的重要病原菌,占临床感染病原菌的70%以上 [1] 。所以,临床实验室准确、快速地鉴定这类细菌,对临床诊断和治疗有重要意义。近年来,各种微生物自动(半自动)鉴定系统不断出现,在目前众多的肠杆菌科鉴定系统中,VITEK全自动仪鉴定准确、快速、性能好,公认为目前鉴定的金标准。天地人分析系统是湖南天地人生物科技有限公司产品,所有试验卡同时包括生化和药敏实验。为了了解天地人系统性能,本文使用天地人微生物肠杆菌科试验卡与VITEK32系统和K-B法对临床分离的206株肠杆菌科细菌进行鉴定和药敏比较,取得满意的结果,现报告如下。
 
  1 材料与方法
   
  1.1 菌株来源 收集海口市人民医院自2004年2月~2005年2月一年中住院和门诊病人送检标本分离出的206株肠杆菌科细菌;另外标准菌株2株:大肠埃希菌ATCC25922,肺炎克雷伯菌ATCCl0031(实验室保存)。
   
  1.2 试剂和仪器来源 天地人微生物肠杆菌科试验卡,为湖南天地人生物科技有限公司产品;VITEK32鉴定仪GNI卡(法国梅早埃公司产品);M—H培养基,购买M—H干粉琼脂按照说明配制(英国Oxoid公司产品);13种药敏纸片均购于英国OXoid公司,并在有效期内使用。
   
  1.3 实验方法 严格按照梅里埃VITEK32和天地人试验卡操作说明进行,对206株肠杆菌科细菌进行同步鉴定,K—B法实验按照《全国临床检验操作规程》 操作,结果判断解释严格按照2003NCCLS标准进行。
 
  2 结果
   
  2.1 鉴定结果 结果显示,VITEK32对206株肠杆菌科细菌和2株标准菌株鉴定吻合率皆都在99%以上。天地人系统鉴定符合有198株,符合率96.1%,不符合有8株,不符合率占3.9%,经卡方检验显示两者差异无显著性(χ 2 =0.44,P>0.05),见表1。其他8株不符合中,其中2株阴沟肠杆菌鉴定为产气肠杆菌;1株肺炎克雷伯菌鉴定为土生克雷伯菌,还有3株鉴定为鼻臭克雷伯菌;1株奇异变形菌鉴定为普通变形杆菌;1株普通变形菌鉴定为奇异变形菌。
    
  表1 两种方法对206株肠杆菌科细菌的鉴定差异(略)
   
  2.2 药敏结果 本文使用天地人试验卡与K—B法两种方法的每一菌株每种药物的敏感度进行逐一比较,共进行206×13=2678次敏感度比较,其中有58次敏感度存在差异(都是K-B法“敏感”,天地人“中介”),占2.17%,经统计学处理显示两者差异无显著性(χ 2 =4.82,P>0.05)。
   
  3 讨论
   
  天地人微生物分析系统是目前国内生产的第一套较完整的微生物分析专利产品 [2] ,包括微球菌科、链球菌科、肠杆菌科等多个菌科的试验卡,本文就肠杆菌科试验卡与梅里埃VITEK32和K—B法分别进行鉴定和药敏比较。天地人试验卡对206株肠杆菌鉴定符合有198株,符合率96.1%,经卡方检验显示两种方法鉴定率无显著性差异;药敏实验存在58次敏感度差异,占2.17%,经统计学检验显示亦无显著性差异。并且经实验室保存2株标准菌株不同时间段(每1个月)进行重复监测,其鉴定和药敏结果都在允许范围并重复性好。显示出该卡很好的准确性和可靠性,表明该卡能很好地满足临床微生物室工作需要。
   
  该试验卡鉴定范围覆盖肠杆菌科24个菌属,本实验包含8个菌属,其中鉴定大肠埃希菌有很高准确率,对克雷伯菌属、肠杆菌属和变形菌属鉴定稍微有差异,主要由于发酵试验的MEL(密二糖)、SOR(山梨醇)、SUC(蔗糖)试验和靛基质试验结果不易判读,导致鉴定错误,欧阳育琪等[2] 对发酵试验问题提议对所有发酵试验滴加无菌矿物油,经笔者多次重复试验确证效果良好,值得推广采用。另偶有产品质量问题如有些试验孔壁、口都沾有未反应试剂,个别试验孔还有无试剂现象,这也会对鉴定结果造成影响,从而造成以上鉴定差异。药敏卡测定包括19种抗尘素,本文只对其中13种抗生素进行评比,结果与K—B法无明显差异,说明药敏试验结果准确可靠,对临床医师指导用药起着重要作用。除了系统问题之外,人为因素也会直接影响结果准确性。如延长培养时间会使各生化试验颜色改变,导致鉴定错误;菌悬液浓度配制过高会使药敏产生假耐药,过低则产生假敏感;试验卡从冰箱取出立即做实验,也会影响结果。其它因素如细菌纯化和老化程度、检验者操作水平、培养温度都会影响其结果准确性。只要严格按照试验要求操作并注意一些影响因素,该试验卡就能表现出它的良好性能。通过对比,显示该卡操作简便,成本低廉,鉴定符合率高,药敏结果准确可靠,它既能满足临床需要,又可减少成本费用,不失为一种好的方法,尤其可在基层医院推广使用。
作者:韩小胜,张淑芳,吴多荣,张冬霞,冯瑞琼
  参考文献:
    
  [1]陈学民,马筱玲.肠杆菌科细菌编码技术的研究和临床应用[J].安徽医科大学学报,1999,3,34(1):71~72.   
  [2]欧阳育琪,蒋晶星,陈亚光.“天地人”微生物分析系统的使用效果评价[J].衡阳医学院学报,1999,10,27(4):414~416.

 

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