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    铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药水平调查及药敏分析



    录入时间:2011-2-10 10:40:18 来源:中国论文下载中心

     

    【摘要】  [目的]调查我院20069月~20078月住院患者送检标本分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药水平,并分析亚胺培南耐药株对其他常用抗菌药物的耐药性。[方法]临床标本分离的铜绿假单胞菌用常规K-B方法进行药物敏感性试验,若结果判定为耐药和中介,则进一步采用琼脂倍比稀释法检测铜绿假单胞菌对亚胺培南及其他10种抗菌药物的MIC。[结果]铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为13.7%,22株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对10常用种抗菌药物的耐药率也普遍较高,有3株铜绿假单胞菌对受试的11种抗菌药物全部耐药。[结论]铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率较高,并对多种抗菌药物耐药,应引起高度重视。

    【关键词】  铜绿假单胞菌;亚胺培南;MIC;耐药率

      Surveillance of Resistant Level of Pseudomonas Aeruginosa to Imipenem and the Analysis of Antimicrobial Susceptibility

      Abstract:[ObjectiveTo survey the imipenemIMPresistance of Pseudomonas aeruginosa isolated from hospitalized patient,and analysis of antimicrobial susceptibility of imipenem-resistant strains.MethodsThe MIC values of resistance of Pseudomonas aeruginosa to IMP and other 10 antimicrobial agents were tested by agar-plating diluted technique.ResultsThe resistant rate to IMP resistance of Pseudomonas aeruginosa was the percent of 13.7. 22 strains of Pseudomonas aeruginosa resistant to IMP also have a higher resistance to other 10 antimicrobial agents.3 strains isolated were resistant to the total 11 antimicrobial agents.ConclusionWe’ll pay more attention to the fact that pseudomonas aeruginosa not only has a high resistance to IMP but also resistant to many strains of antimicrobial agents.

      Key words:pseudomonas aeruginosa;imipenem:minimal inhibitory concentration;resistance

        铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA),是一种常见的院内获得性感染条件致病菌,在医院感染病原菌的检测中检出率最高,对多种抗菌药物表现为天然或获得性耐药。碳青霉烯类抗生素如亚胺培南曾是临床上使用的抗PA较为有效的药物,但近年来随着亚胺培南在临床的广泛应用,PA对其耐药率呈上升趋势,上海地区铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率高达20%[1]。我们对分离的PA对亚胺培南的耐药情况进行了调查,同时就耐药株对其他常用抗菌药物的敏感性进行分析,为临床治疗提供依据。

      材料与方法

      1.1  菌株来源 

      全部40株铜绿假单胞菌均分离自我院20069月至20078月临床各科送检的住院患者标本。临床分离株的鉴定按照常规K-B方法进行,按照美国临床和实验室标准委员会(CLSI)标准进行操作和判断,并判定为耐药和中介菌株,除去重复菌株,用15%甘油LB肉汤保存于-80。质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922ATCC35218(用于含酶抑制剂的抗生素),以及铜绿假单胞菌ATCC27853购自卫生部临床检验中心。

      1.2  培养液和药敏抗生素 

      Mueller-HintonMH)琼脂购自法国生物梅里埃公司,批号:811813401。亚胺培南(IPM)购自杭州默沙东制药有限公司,批号:06121;美罗培南(MEM)购自日本住友制药株式会社,批号:10080;哌拉西林(PRL)购自华西制药集团,批号:20070401;哌拉西林/他唑巴坦(TZP)购自美国惠氏-百宫制药有限公司,批号:B770308;头孢他啶(CAZ)购自海南海灵制药有限公司,批号:060801;头孢吡肟(FEP)购自中美上海施贵宝制药有限公司,批号:0604791;头孢哌酮(CP)购自辉瑞制药有限公司,批号:75835017;头孢哌酮/舒巴坦(SCF)购自辉瑞制药有限公司,批号:65839296;环丙沙星(CIP)购自拜耳医药保健有限公司,批号:BXBWE67;氨曲南(ATM)购自江西制药有限公司,批号:0512071;丁胺卡那(AK)购自旭东海普药业有限公司,批号:060213。

      1.3  抗菌药物最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)测定

      采用琼脂倍比释法测定各种抗菌药物的MIC。根据2006年美国临床实验室标准化协会(CLSI/NCCLS)标准,亚胺培南的MIC≤4μg/ml为敏感,MIC≥16μg/ml为耐药,MIC值在416μg/ml之间的菌株归入耐药组进行比较。

      结果

      2.1  共分离培养获得铜绿假单胞菌161株,通过K-B纸片扩散法检出亚胺培南耐药或中介的菌株共40株。

    2.2  铜绿假单胞菌对亚胺培南的MIC测定  

      本组40PAMIC≤4μg/ml的菌株18株,MIC≥16μg/ml的菌株10株,MIC介于416μg/ml之间的菌株12株,故20069月~20078月我院共检出耐亚胺培南的铜绿假单胞菌22株,占同期全部检出的铜绿假单胞菌161株的13.7%,其耐药率为13.7%22/161株)。

      2.3  铜绿假单胞菌的标本分布

      22株铜绿假单胞菌分别来自呼吸道标本14份,脓液3份,中段尿2份,血液1份,创面分泌物1份,腹水1份。

      2.4  耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对其他抗生素的敏感率  22PA对其他10种被认为对铜绿假单胞菌疗效较好的受试抗菌药物的敏感性,以哌拉西林/他唑巴坦最为敏感,敏感率为72.7%,其次为哌拉西林和头孢哌酮,敏感率分别为68.2%63.7%。对环丙沙星耐药率最高,为68.2%。另外,发现3株对所有抗生素全部耐药的多重耐药株。

      讨论

        随着其临床应用的增加,铜绿假单胞菌对其耐药率呈上升趋势。我院20069月~20078月从住院患者送检的各类标本中共分离出铜绿假单胞菌161株,经K-B纸片扩散法检出耐亚胺培南的菌株共40株。本试验采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS,2002年)所推荐的琼脂倍比稀释法,PA对常用抗菌药物的MICs琼脂倍比稀释法测定MIC后,发现40PA中耐亚胺培南的菌株仅为22株,较K-B法低,分析可能的原因:K-B纸片扩散法为初步筛查,琼脂倍比稀释法则更精准地测定出抗菌药物的MIC,且所有操作步骤均有标准菌株作质控保证。传统的纸片法虽简便易行,但要求严格的质控和操作才能获得可信的结果,如药敏纸片厚度或纸片受潮等因素,都可能导致结果出现偏差。琼脂稀释法可精确测定细菌的MIC,但操作烦琐,工作量大,故临床测定亚胺培南的耐药率仍依赖于K-B法,但需严格执行质控,并结合临床,以确保检验结果。

        耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其他抗菌药物也存在一定的耐药性,根据本组试验结果,22株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌总体上对哌拉西林/他唑巴坦、哌拉西林、头孢哌酮和头孢他定有一定敏感性,可作为临床用药选择时的参考。由于PA对常用抗生素的敏感性不断下降以及耐药性不断变化,而不恰当的治疗会筛选出多种多样的耐药菌株,这对抗菌药物的应用提出了严峻的挑战。本组22株耐亚胺培南的PA中就发现3株对所有抗生素全部耐药的多重耐药株,对于由这类多重耐药菌株引起的呼吸道感染,可采用多粘菌素或妥布霉素雾化吸入治疗。

       

    本组22株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对美罗培南的敏感率为50%,提示亚胺培南与美罗培南耐药机制不尽相同。美罗培南是不经过特殊通道扩散的,细菌外膜的低通透性合并主动外排系统起作用是它对PA形成低水平耐药性的主要机制。国外有研究表明[7],对美罗培南耐药的铜绿假单胞菌94.7%对亚胺培南耐药,而对亚胺培南耐药的菌株只有47%对美罗培南耐药,且美罗培南体外活性是亚胺培南的2倍,对部分耐亚胺培南菌株有效,故临床上可美罗培南治疗亚胺培南耐药的菌株,但仍需密切监测药敏结果。

    作者:李群 丁星 张杏怡 周新 《浙江中医药大学学报》

    【参考文献】

        [1Wang F,Zhu DM,Hu FP.Surveillance of bacterial resistance in Shanghai in 1999J.National Medical Journal of China,2001,7(2) :117.

      [2]朱德妹,汪复,胡付品,等.2002年上海地区细菌耐药性监测[J.中华传染病杂志,2004,223):154-159.

      [3]蒋伟,常东,黄志红,等.临床检出细菌的耐药现状分析[J].中华医院感染学杂志,2002,129):646-648.

      [4]徐盈斌,利天增,祁少海,等.1993-1999年烧伤科细菌学调查及耐药性分析[J.中华烧伤杂志,2002,183):159-162.

      [5Gladstone P,Rajendran P,Brahmadathan K.Incidence of carbapenem resistant nonfermenting gram negative bacilli from patient with respiratory infection in the intensive care unitsJ.Indiian Journal of Medical Microbiology,2005,233):189.

      [6]胡佩村,李婉霞,廖一平.呼吸内科下呼吸道感染的感染的细菌分布及药物敏感分析[J.中华医院感染学杂志,2006,16(6)708-710.

    7Troillet N,Samore MH,Carmeil M,et al.Imipenem resistant Pseudomonas aeruginosa respiratory infections due to contaminated nebulizersJ.J Hosp Infect,1996,33:63.

     

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