【摘要】 目的 分析ESBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的阳性率及对抗生素的敏感性。方法利用双纸片协同试验及纸片法确证实验检测ESBLs阳性菌，并用纸片扩散试验和微量稀释法测定细菌对抗生素的敏感性。结果 ESˉBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌对青霉素、三代头胞菌素、复方新诺明、环丙沙星及庆大霉素均高度耐药，对亚胺培南敏感，对阿米卡星、添加酶抑制剂的头孢类药物比较敏感。结论产生超广谱β内酰胺酶是大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的主要耐药机制之一，可使用酶抑制剂改善药敏情况，但还要进一步的研究其全部的耐药机制及耐药机制间的相互作用。

　　关键词 抗生素 耐药性 超广谱β内酰胺酶

     

　　细菌耐药性已成为21世纪人类面临的重大难题，大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌又是引起尿路感染、呼吸道感染、伤口感染甚至全身感染的常见致病菌。而质粒介导的ESˉBLs（超广谱β内酰胺酶）是导致大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌耐药的主要原因之一，能使三代头胞菌素等β内酰胺类抗生素失活。本文对住院病人标本中分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌进行ESBLs检测，并对其进行药敏试验，现报告如下。

　　1 材料与方法

   

　　1.1 菌株来源 2003年全年住院患者送检标本中检测出ESBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌菌株128例。　

　　1.2 药敏纸片 普通药敏纸片购自天坛生物制品公司;ESBLs确证试验纸片购自天津金章公司。

   

　　1.3 MIC半定量药敏板购自天津金章公司。

　　1.4 培养基 购自天津金章公司。

   

　　1.5 鉴定设备 法国梅里埃公司的API系列鉴定板和德灵公司的Microscan4细菌鉴定仪。

　　1.6 质控菌株 用ATCC25922大肠埃希菌做药敏质控。

　　1.7 药物敏感性试验 采用纸片扩散法，测量纸片周围抑菌圈直径，与NCCLS规定的判断标准比较，判定其为敏感、中介或耐药。用MIC板进行药敏半定量试验。

   

　　1.8 ESBLs确证试验在涂布待测菌的MH平皿上分别贴上头胞噻肟、头胞他啶、头胞噻肟/克拉维酸、头胞他啶/克拉维酸纸片，35℃温箱孵育过夜，若加酶抑制剂纸片周围的抑菌圈与不加酶抑制剂纸片的抑菌圈直径相差5mm以上，即为ESBLs确证试验阳性 ［1］  。

2 结果

　　大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌耐药比较，见表1。

　　表1 ESBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性比较（略）

　　3 讨论

　　ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，大多为质粒介导的超广谱β内酰胺酶，往往是由普通的β内酰胺酶基因（TEM-1、TEM-2、SHV-1）［2］  突变而来。ESBLs的出现给临床抗感染治疗增添了很严重的问题。这些酶能够水解青霉素、头胞菌素、氨曲南等β内酰胺类抗生素。从此次试验看，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌除对亚安培南为100%敏感外，对其他的抗生素的耐药率都达到了60%甚至更高。产ESBLs菌可同时带有其他的耐药基因从而形成多重耐药的耐药表型 ［3］  。而且，在这次试验中ESBLs阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌占全部大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的38%，与孔海深等报道结果 ［4］  近似。

   

　　头胞类药物具有抗菌谱广，杀菌作用强的特点，但对β内酰胺的稳定性较差。舒巴坦对质粒介导产生的超广谱β内酰胺酶有强烈的不可逆的抑制作用。两者联合使用后成功的解决了头胞类药物稳定性差的缺陷，使其更好的发挥其抗菌活性，同时降低高效广谱抗菌药物（如亚安培南）的使用，减少菌群失调的发生率。

   

综上所述，对于ESBLs阳性的耐药性菌株，使用添加了酶抑制剂的抗生素可以使治疗效果有比较明显的改善。

 

作者：任鹏 常志遂

　　参考文献    

　　1 Zone diameter interpretivge standards and equivalent minimum inhibitory concentrarion（MIC）breakpoints for Enterpbacteriaceae.National Comˉmittee for Clinical Laboratory Standards.Performance standards for anˉtimicrobial susceptibility testing.Ninth informational supplement.Vilˉlanova，Pa.Nitional Committee for Clinical laboratory standards，1999，32-36.   

　　2 倪雨星.质粒介导的超广谱β内酰胺酶的耐药性问题及检测.中华医学检验杂志，1999，22（5）:316-317.   

　　3 周兵.大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌超广谱β内酰胺酶的产生及药敏分析.中华医院感染学杂志，2000，10（4）:311-312.   

4 孔海深.超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌的耐药性.中华医学检验杂志，2000，23