【摘要】 目的: 调查血液培养中病原菌的菌群分布及耐药趋势. 方法: 1995/2004血液培养标本用荧光全自动血液培养仪（Bactec9120）进行培养，阳性标本用全自动微生物鉴定仪（Vitek32）进行鉴定，药敏采用KB法. 结果: 在6207份血液培养标本中分离出病原菌662株，阳性检出率为10.7%. 病原菌以革兰阳性（G+）需氧球菌居首位（50.3%），革兰阴性（G-）需氧杆菌次之（44.7%），真菌3.0%，厌氧菌1.1%. 血液培养中的G+球菌对万古霉素和亚胺培南较为敏感，G-杆菌对亚胺培南、舒普深、丁胺卡那较为敏感. 结论: 血液培养病原菌以G+球菌为主，G-杆菌次之；儿童血液培养病原菌以葡萄球菌属为主；亚胺培南对G+球菌和G-杆菌均具有较高的敏感率.

　　【关键词】 血液培养；病原菌；抗药性，多药；分离鉴定

　　0引言

　　血液培养阳性是确诊败血症的重要依据. 大部分患者血液中的细菌数量很低，特别是在感染早期或抗生素治疗后，通常小于1×103 cfu/L，所以提高血液培养阳性率，快速、准确地作出病原学诊断，一直是临床微生物实验室的重要课题. 为此我们回顾性分析了我院10年间血液培养结果,并对病原菌分布特点及药物敏感进行分析.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　1995/2004住院疑似败血症静脉血6207份(13~15 mL),分别注入需氧和厌氧培养瓶中；儿童取静脉血1~3 mL注入小儿培养瓶内，骨髓取适量注入小儿培养瓶内. 轻摇振荡混匀，立即转送入荧光全自动血液培养仪（Bacte 9120）内进行培养. Bacte 9120由美国BD公司出品，并采用该公司配套荧光血液培养瓶，分厌氧、需氧、小儿培养瓶3种. 全自动微生物分析系统(Vitek32)系美国生物梅里埃Vitek公司生产，鉴定卡亦由该公司提供.

　　1.2方法

　　将送检的血液培养瓶立即放入Bactec9120内培养，待其报警时取出转种血平板、麦康凯平板、沙保弱平板. 如果厌氧培养瓶报警则取出转种厌氧培养基，置厌氧环境培养，置35℃温箱18~24 h后，观察生长情况. 根据菌落形态，革兰染色结果，然后上全自动微生物分析系统(Vitek32)进行鉴定. 所用血液培养瓶及鉴定试卡均采取ATCC标准菌株，并进行质量控制. 药物敏感性试验采用ＫＢ纸片扩散法,药敏纸片为北京天坛中国生物制品药品检定所和英国Oxoid公司的产品. 结果判定按1997年美国临床实验室标准化委员会(ＮＣＣＬＳ)推荐的标准进行. 用标准菌株金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923,大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922,铜绿假单胞菌ＡＴＣＣ27853定期做药敏检测,以确保药敏结果的可靠性.

　　从6207份血液培养中分离出病原菌622株,阳性检出率为10.7%,其中革兰阳性菌（G+） 55.3%,革兰阴性菌（G-） 44.7%,其中G+需氧球菌50.3%, G-需氧杆菌44.1%,真菌3.0%,厌氧菌1.1%(Tab 1). 主要病原菌的耐药率见Tab 2.表1662株病原菌的分布（略）表2血液培养分离出的主要病原菌的耐药率（略）

　　3讨论

　　我们研究表明，前10位菌属分别是葡萄球菌属、埃希菌属、链球菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、肠球菌属、不动杆菌属、假单胞菌属、假丝酵母菌，它们占分离病原菌总数的88.7%. 前10位菌是金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、中间型葡萄球菌、粪肠球菌、醋酸钙不动杆菌，占分离病原菌总数的66.9%. 表明肠杆菌科细菌和葡萄球菌属是引起败血症发生的主要病原菌，与国内外资料的报道相似［1］. 根据10 a间病原菌的分布，在疑为败血症无条件做血液培养时，首先考虑选用针对这10个菌属或10种细菌的抗生素的应用以减少盲目性.

　　我们对6种主要的病原菌药敏进行统计分析，金黄色葡萄球菌β内酰酶(+)为85.7%，MRSA为52.1%，提示金黄色葡萄球菌耐药性已相当严重. 对甲氧西林耐药（MRS）的葡萄球菌耐药严重，是由于细菌中产生的一种青霉素结合蛋白（PBP）发生突变，产生新的靶位蛋白（PBP2a），导致β内酰酶类抗生素的亲和力极度低下而产生耐药性［2］. 大肠埃希菌耐药性也相当严重. 总之，随着医疗技术的不断进步，各种诊疗手段不断增加，这有利败血症的发生，在这种情况下，对于患有严重基础疾病、长期大量应用免疫抑制剂、免疫功能低下或不全、以及营养不良的患者很容易交叉感染引起败血症，快速检出病原菌，根据抗生素的敏感性，指导临床合理使用抗生素，对于减轻患者的痛苦及经济负担都具有重要的意义［3-5］.

 

　　 作者：魏军，贾伟，周哓燕 《第四军医大学学报》

　　【参考文献】

　　［1］ 王帮，李庆兴，苏刚，等. 成人败血症与院内感染［J］. 中国微生态学杂志，2001;13(2):95-96.

　　Wang B, Li QX, Su G, et al. Adult septicemia and hospital onset of infection［J］. Chin J Microecol, 2001;13(2):95-96.

　　［2］ 张秀珍. 当代细菌检验与临床［M］. 北京：人民卫生出版社，2000:89-131.

　　［3］ 郭振林，崔颖鹏，陈冬梅，等. 血液培养中病原菌的分布及其耐药状况分析［J］. 中国微生态学杂志，2004;16(3):162-164.

　　Guo ZL, Cui YP, Chen DM, et al. The distribution and drug resistanc analysis of pathogenic bacteria isolated from blood samples［J］. Chin J Microecol,   2004;16(3):162-164.

　　［4］ 薄兰君,钱雅芬. 血液系统肿瘤化疗后院内感染522例分析［J］. 第四军医大学学报，2004;25(6):573-574.

　　Buo LJ, Qian YF. Analysis of hospital acquired infections after chemotherapy in patients with hematological malignance: 522 cases report［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2004;25(6):573-574.

［5］ 孙怡群,徐修礼,彭道荣,等. 血液及体液2675份细菌培养的临床分析与评价［J］. 第四军医大学学报，2003;24(16): 1535-1536.