【摘要】  目的：加强微生物实验室的质量控制工作，提高对肠道传染病疫情检测水平。方法：用细菌培养法对质控菌株进行增菌、分纯，依据细菌生长特性、革兰染色形态、生化试验和血清学试验结果综合判断。结果：质控菌株为伤寒沙门菌纯菌种，质控考核成绩优秀。结论：质控菌株考核既重结果，也重过程，能及时发现平时工作中存在的问题。建议多加强对基层微生物实验室的质控考核工作，促进疾病控制机构卫生检测水平的不断提高。

【关键词】  质控；分析；细菌培养

 

　　Analysis of testing qualitycontrolling Strains of huaibei city in 2006

　　Abstract:Objective To improve the quality control work in microorganism laboratories and the level of detecting enteric infectious diseases.Methods Bacterium culture method was applied to enrich and isolate the qualitycontrol strains；comprehensive judgment was made according to the growth character、shape of Cram strain、the results of biochemistry experiments and serologic tests.Results The qualitycontrol strain was proved to be pure agarics of salmonella typhi；the result was excellent.Conclusion The qualitycontrol supervision work is suggested to be given great emphasis in order to improve the hygienic detection work of the disease control institutions.

　　Key words:Qualitycontrol strains；Analysis；Bacterium culture

　　我中心近几年均参加安徽省疾病控制系统实验室间比对和能力验证试验，接受质控菌株的分离鉴定工作，不断提高细菌检验水平。现将2006年11月的微生物实验室间比对考核情况及结果报告如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  质控样品  安徽省CDC下发的半固体质控菌株1份，既可能是混合菌种，也可能是纯菌种。该样品是肠道致病菌培养物，属需氧或兼性厌氧菌。

　　1.2  检测依据  微生物学和微生物学检验。

　　1.3  材料  本次质控所用培养基、试剂购于北京陆桥医学生物技术中心、杭州微生物试剂有限公司。诊断血清：沙门菌属诊断血清由成都生物制品研究所生产，有效期内使用。

　　1.4  检验步骤

　　1.4.1  增菌  无菌操作开启半固体菌种管，取半固体培养物置10 ml营养肉汤管混合均匀，37 ℃培养18 h。

　　1.4.2  菌种分纯及鉴定  取肉汤增菌液各一环，分别接种分离于SS、麦康凯琼脂平板、山梨醇麦康凯琼脂平板、血平板、营养琼脂平板、四号琼脂平板，37 ℃ 24 h培养，观察菌落特征，挑取各种不同可疑菌落接种于三糖铁上做初步生化反应，同时取菌苔涂片做革兰染色镜检，取营养琼脂平板上菌落做氧化酶实验，综合分析生长特性及生化特点，对疑似菌做血清学凝集试验及生化鉴定试验。

2  检验结果

　　肉汤增菌液呈均匀浑浊，分离接种培养后，在SS平板上生长出中等大小、光滑湿润、无色半透明菌落，在麦康凯平板上生长出中等大小、光滑湿润、无色半透明菌落，在山梨醇麦康凯琼脂平板上生长出中等大小、粉红色菌落，在血平板上生长出中等大小、灰白色、边缘整齐、不溶血菌落，在营养平板上生长出中等大小、圆形、光滑湿润菌落，在四号琼脂平板上不生长。涂片染色：此菌为革兰阴性小杆菌。氧化酶实验：阴性。三糖铁结果为：斜面-、底层+、产气+、硫化氢+。肠杆菌科生化编码结果，见表1。

　　表1  肠杆菌科生化编码结果（略）

　　注：鉴定编码62054；查检索表得两种可能结果为：①伤寒沙门氏菌，概率88.90%；②沙门氏菌属某些种，概率9.80%。   

　　沙门菌血清凝集试验结果如下：AF多价血清-；vi因子血清++++；Hd因子血清+；生理盐水对照-。用灭菌生理盐水将普通琼脂斜面上菌苔洗下，制成浓厚菌液，加热100 ℃ 40 min，用处理过的浓厚菌液与沙门氏AF多价凝集，结果：AF多价血清++++；生理盐水对照-；O9因子血清+++。依据细菌在各培养基上生长特性、革兰染色形态、生化和血清试验结果，综合判断为伤寒沙门菌(O9Hd)。上报安徽省疾控中心，结果完全正确。

　　3  讨论与小结

　　由基本生化特性可知，本菌株为发酵型糖代谢，有动力，氧化酶阴性的革兰阴性杆菌，符合肠杆菌科或弧菌科。根据四号琼脂平板上不生长，SS琼脂平板上生长良好，可排除弧菌科，定为肠杆菌科。在做沙门菌血清凝集时，最好用两个不同厂家生产的血清或用不同批号的血清进行核对，以防错漏。在做沙门菌血清凝集时，应注意挑取琼脂干燥处培养物与多价及O因子血清进行凝集试验，其效果较好，而琼脂湿润处培养物与O多价及O因子血清凝集不明显，原因是琼脂干燥处培养物O抗原发育较好［1］。试验时应注意：与多价抗血清不凝集时，可在玻璃试管内用生理盐水将细菌制成浓菌液，放入沸水中15 min～30 min，冷却后再次做凝集试验。因vi抗原能阻断O凝集反应，而煮沸处理能破坏菌体表面的vi抗原［2］。 这次的伤寒沙门菌，我们经加热100 ℃ 40 min破坏Vi抗原才得到AF多价血清明显凝集。对AF多价血清不凝集的菌株，容易漏检，经过详细的生化鉴定及用加热法破坏Vi抗原，再进行血清试验才可检出伤寒沙门菌，所以详细的生化鉴定是必要的。根据细菌在选择性平板上的菌落特点与各种菌落生化特性、血清学试验结果的一致性，可判断此质控菌株为纯菌种。总之，平时做好细菌检验室内质量控制，对所用培养基、生化试剂、诊断血清等进行质量验收，是做好室间质控的重要基础。经常参加室间质量控制考核，有利于督促和提高检验人员的业务水平和检测水平，增加检验结果的正确性和可靠性。

 

 作者：赵冬云《实用医技杂志》

  　［1］ 王秀茹.预防医学微生物学及检验技术［M］.北京：人民卫生出版社，2002：315.

［2］ 余树荣.微生物学和微生物学检验［M］.北京：人民卫生出版社，1997：181.