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塞克硝唑对口腔厌氧病原菌体外抗菌活性的测定



录入时间:2011-1-6 10:36:11 来源:中国论文下载中心

 

【摘要】  目的 测定实验药物塞克硝唑对口腔厌氧病原菌的体外抗菌作用。方法 本试验采用美国国立临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)推荐的厌氧菌药物敏感试验-琼脂稀释法,检测塞克硝唑对6株模式株和参考株及35株口腔临床分离株的体外抗菌活性,并与同类药物甲硝唑进行比较。结果塞克硝唑和甲硝唑对6株模式株和参考株的MIC值分别是0.0620.5μg/ml、0.1250.5μg/ml;对35株临床分离株的MIC值分别是0.0310.5μg/ml、0.0311.0μg/ml。结论 塞克硝唑与甲硝唑相比体外抗厌氧菌活性相似或略强。

【关键词】  塞克硝唑; 抑菌实验; 厌氧菌; MIC

 

    口腔临床常见的感染性疾病如牙周炎、冠周炎均为厌氧菌感染为主的疾病,厌氧菌检出率在95%左右。5-硝基咪唑类药物[如甲硝唑(MTZ)等]被认为是抗无芽孢厌氧菌感染效果较好的药物。塞克硝唑(secnidazole,SNZ)是近年来国外临床广泛使用的安全、有效的抗脆弱拟杆菌、幽门螺杆菌、阴道滴虫及肠道阿米巴的5-硝基咪唑类药物[1,2]。与其它5-硝基咪唑类药物相比,具有有效血药浓度维持时间长(1729h)3]、不良反应少等优点[4,5]。目前国内塞克硝唑仅应用于妇科感染性疾病的治疗,还未见用于口腔感染性疾病的治疗,为进一步了解塞克硝唑对口腔厌氧菌株的敏感性,本文对塞克硝唑进行体外抑菌实验,为本品在口腔临床抗厌氧菌感染中的应用提供有意义的实验数据。

    1  材料与方法

    1.1  材料

    (1)实验药和对照药

    实验药  塞克硝唑原药粉,白色粉剂,批号20041216,由浙江南洋药业股份有限公司提供。

    对照药  甲硝唑原药粉,白色粉剂、批号HEC-ME-040634,由浙江南洋药业股份有限公司提供。

    (2)实验菌株  选择口腔临床常见的厌氧病原菌菌株作为本实验的实验菌株,其中模式株和参考菌株6株,临床分离株35株,均从口腔临床牙周炎患者的病灶位点分离。质控株脆弱拟杆菌ATCC25285;实验菌株(模式株和参考菌株)6株:牙龈卟啉单胞菌(Porphynomonas gingivalis)ATCC33277,牙龈卟啉单胞菌381,牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodentalis)ATCC34506,中间普雷沃菌(Prevotella intermedia)ATCC25611,产黑素普雷沃菌(Prevotella melaninogenica)ATCC13040,具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)ATCC10953。

    (3)培养基  Brain-heart infusion-S(BHI-S),Bio-Merieux产品,批号51009。

    (4)厌氧孵育箱  DYII型,浙江义乌。

    1.2  方法

    采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)推荐的厌氧菌药物敏感试验(Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobes) 琼脂稀释法(Agar Dilution Method)测定实验药物和对照药物的抗菌活性,用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)表示。

(1)药物实验液和含药琼脂平皿的配制

    药物实验贮存液的配制  实验药和对照药均用无菌蒸馏水配制成药物浓度为5120μg/ml的贮存液(-4保存一周)。

    含药琼脂平皿的配制  采用对倍稀释法,用BHI液体培养基分别将实验药和对照药的贮存液(5120 μg/ml)配制成系列浓度的实验药液: 2560、1280、640、320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.620.31μg/ml。分别取上述不同浓度的药物实验液2ml18ml浓度为4850BHI-S琼脂混合均匀后倾注平皿,配制系列对倍递减浓度的含药琼脂平皿(256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0620.031μg/ml)。

    (2)实验细菌液的准备  BHI-S琼脂表面接种实验菌株,置厌氧培养箱内(80% N2+10% CO2+10% H2)培养48h,取48h纯培养物接种BHI-S肉汤后放置厌氧培养箱内(80% N2+10% CO2+10% H2)培养48h,校正实验菌液的浓度为0.5McFarland(108CFU/ml)备用。

    (3)MIC测定  在系列含药平皿表面用微量加样器分别点种细菌浊度为108CFU/ml(0.5 McFarland标准)的实验菌液,点种量为7μl。将点种细菌的实验平皿放置在厌氧箱内(80% N2+10% CO2+10% H2)培养48h。实验菌对照:将实验菌液点种在不含药液的BHI-S琼脂表面。厌氧培养(80% N2+10% CO2+10% H2)48h后观察MIC结果。

    2  结果

    由表1可见塞克硝唑和甲硝唑对质控菌株脆弱拟杆菌ATCC25285MIC的测定值与CLSI/NCCLS公布的参考值接近。对6株模式株和参考株的MIC值分别为0.0620.5μg/ml、0.1250.5μg/ml,对35株临床分离株的MIC分别为0.0310.5μg/ml、0.0311.0μg/ml。结果提示,与甲硝唑相比较,塞克硝唑对这几种厌氧菌的体外抗菌活性相似或略强。表1    塞克硝唑(SNZ)和甲硝唑(MTZ)对实验细菌的

    3  讨论

    塞克硝唑与甲硝唑同属5-硝基咪唑类药物,其抗菌谱与硝基咪唑类其它抗菌药物没有明显差异。与甲硝唑相比,塞克硝唑的药动学特性如生物利用度、存在活性代谢物和终末消除半衰期(塞克硝唑t1/2β1729h,甲硝唑为78h)主要表现量的差异,出现差异的原因是由于氮环上结合于硝基邻近的取代基决定的。国外塞克硝唑主要用于治疗阿米巴、贾第鞭毛虫、滴虫和细菌性阴道炎,绝大多数都是使用单剂方案[5,6],单剂治疗是塞克硝唑的最大特点,有报道塞克硝唑在牙龈组织内药物浓度与血药浓度大体平行[7],说明该药对牙龈组织有较好的穿透作用,同时该药在牙龈组织的半衰期长达28.8h。该药口服吸收好,口服和静脉给药差异无显著性[8]口腔临床常见的牙周炎和冠周炎均以厌氧菌感染为主,本实验通过塞克硝唑和甲硝唑对6株模式株和参考株及35株临床分离株的测定表明,塞克硝唑的体外抗厌养菌活性相似或略强于甲硝唑。鉴于塞克硝唑的血液维持浓度较长,胃肠道不良反应小,耐受性良好,单剂口服方便等特点,塞克硝唑在治疗口腔厌氧菌感染方面有较大的应用前景。

 作者:于佳辉 李淼 肖丽英  丁一 肖晓蓉 朱珠 龚其美《中国抗生素杂志》

【参考文献】

  1 Nunez J T, Gomez G. Low-dose secnidazole in the treatment of bacterial vaginosis J. Int J Gynecol Obstet,2005,(3):281

2 Bhatio S, Karnad D R, Oak J l. Randomized double-blind trial of metronidazole versus secnidazole in amebic liver abscess J. India J Gastroenterol,1998,17(2):53

3 Gillis J C, Wiseman L R. Secnidazole: a review of its antimicrobial activity, pharmacokinetic properties and therapeutic use in the management of protozoal infections and bacterial viginosis J. Drugs,1996,51(4):621

4 Acar J, Petitjean O, Dubreuil L. Secnidazole, a new 5-nitro-imidazole J. Antibiotiques,2005,7(3):177

5 Sodein K, Syukran O, Fadillah A, et al. Comparison between the efficacy of a single dose of secnidazole with a five day course of tetracycline and clioquinol in the treatment of acute intestinal amebiasis J. Pharmaceutica,1985,4(4):251

6 Di Prisco M C, Jmenez J C, Rodrguez N, et al. Clinical trial with secnidazole in a single dose in Venezuelan children infected by Giardia intestinalis J. Invest Clin,2000,41(3):179

7 Tenenbaum H, Cuisinier F J G, Le Liboux, et al. Secindazole concentrations in plasma and crevicular fluid after a single oral dose J. J Clin Periodontol,1993,20(7):505

8 Lamp K C, Freeman C D, Klutman N E, et al. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of the nitroinidazole antimicrobials J. Clin Pharmaco Kinet,1999,36(5):353

 

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