【摘要】 目的 监测临床常见非发酵病原菌的分布及耐药性的现状，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法临床标本按常规分离培养，用法国梅里埃ATB分析系统鉴定菌种，药敏试验数据采用KB纸片法，按NCCLS规定的标准进行。结果从2006年10月至2008年6月共获得140株非发酵革兰阴性杆菌，其中列前3位的非发酵革兰阴性杆菌114株(占81.4%)，分别是铜绿假单胞菌75株(53.6%)，不动杆菌属22株(15.7%)，嗜麦芽寡养单胞菌17株(12.1％)，主要来源于痰、分泌物及中段尿。铜绿假单胞菌、不动杆菌属对亚胺培南、美罗培南、替卡西林／棒酸的耐药率均<20％，对阿米卡星、哌拉西林的耐药率在33%～43%；对三代头孢耐药率分别在37%～59%；嗜麦芽寡养单胞菌是非发酵革兰阴性杆菌中耐药率最高的菌株，其对亚胺培南天然耐药，对替卡西林／棒酸、哌拉西林/他唑巴坦、左氧氟沙星耐药率较低，均≤21％。结论 非发酵革兰阴性杆菌是临床感染的主要病原菌之一，特别是铜绿假单胞菌、不动杆菌属、嗜麦芽寡养单胞菌，其耐药性差异有统计学意义。
【关键词】 非发酵革兰阴性杆菌; 耐药性; 抗菌药物; 分析
【Abstract】 Objective To investigate the isolation and antimicrobial resistance of nonfermentative Gramnegative bacmi(NFGNB) to provide laboratory evidence for clinically selecting antibiotics．Methods All samples were identified by routine procedure and bioMérieux ATB autosystem，and KB paper disk diffusionin accordance with NCCLS standards was employed for drug sensitivity tests．Results There were 140 strains of NFGNB isolated from Octomber 2006 to June 2008，mainly from sputum ，middle urine and secretion．The main NFGNB were Pseudomonas aeruginosa，Acinetobacter spp and Stenotrophomonas maltophilia．The dominant strains were Pseudomonas aeruginosa(53.6％)，Acinetobacter spp (15.7％)，Stenotrophomonas maltophilia (12.1％ ). The resistance rates of P．aeruginosa and Acinetobacter to cefoperaxone／sulbactam，amikacin，cefepime and meropenem were all less than 20%． The resistance rate of S．maltophilia was the highest among the NFGNB．Its resistance rates to imipenem／cilastatin were 100%. The resistant rates of S．maltophilia to ticarcillin／Clavulanic acid，piperacillintazobactam and levofloxacin were less than 21% ．Conclusions The NFGNB are the important pathogens causing clinical infection，especially P．aeruginosa，A．baumannii and S．maltophilia．There are significant differences in antimicrobial resistance among different NFGNB．
【Key words】 nonfermentsative Gramnegative baci11i(NFGNB); drug resistance；analysis；antibiotics
非发酵菌是指一群不发酵糖类的革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界中，是造成医院感染的重要病原菌之一。近年来随着介入性治疗技术的开展和新型抗菌药物的广泛应用，非发酵菌感染的发生率和耐药性都有增加的趋势，且非发酵菌普遍存在多药耐药现象，给临床治疗带来困难。为指导临床合理使用抗菌药物，作者对常见非发酵菌的临床分布特点及耐药性进行分析，现报道如下。
1 材料与方法
1．1 菌株来源
2006年10月至2008年6月作者所在医院住院患者送检的痰液或气管抽吸液、尿液、脓液、咽拭子、创口分泌物等各类临床标本，按法国梅里埃ATB分析系统鉴定菌种分离、培养获得的临床菌株。同一患者只统计初次分离株。
1．2 菌种鉴定
采用法国生物梅里埃公司ATP鉴定卡进行菌种鉴定。
向秀梅,等.临床常见非发酵菌分布特征及耐药性分析
成都医学院学报2008年12月，3(4)
1．3 药敏试验
采用KB纸片琼脂扩散法进行药敏试验，结果判读按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定(2006年版)的标准进行。培养基购自法国生物梅里埃公司，药敏纸片购自英国Oxoid公司产品。
1.4 质控菌株
药敏用质控菌株铜绿假单胞菌(ATCC 27853)、大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)均购自临床检验中心。
2 结果
2．1 常见非发酵菌的分离率及构成比
2006年10月至2008年6月从各种临床标本中共分离出病原菌1020株，革兰阴性杆菌519株，其中非发酵菌140株，占总病原菌13.7%，占革兰阴性杆菌27%.其中列前3位的非发酵革兰阴性杆菌114株(占81.4%)，分别是铜绿假单胞菌75株(53.6% )，不动杆菌属22株(15.7%)，嗜麦芽寡养单胞菌17株(12.1％).
2．2 非发酵菌感染病房的分布
非发酵菌的临床分布在检出的140株非发酵菌中以呼吸科病房最多，检出53例，占37.9%；心脑血管病房检出38例，占27.1%；外科检出32例，占22.9%；其他科室检出17例，占12.1%.
2．3 非发酵菌感染部位的分布
在检出的140株非发酵菌中，痰液及气管抽吸液中检出94株，占67.1%；其次为脓液18株，占12.9 % ；咽拭子10株，占7.1% ；尿液8株，占5.7%；创口分泌物7株，占5%；其他标本3株，占2.1%.
2．4 非发酵菌的耐药率
3种常见非发酵菌对14种抗菌药物的耐药率（见表1）。表1 非发酵革兰阴性杆菌对14种抗菌药物的耐药率
3 讨论
非发酵菌是一群需氧无芽胞的G杆菌，不能利用葡萄糖作为能量来源，或者通过发酵以外的代谢途径分解利用葡萄糖。该群细菌属于条件致病菌，近年来由其所致的医院感染有增多趋势。本组140株非发酵革兰阴性杆菌所致感染中列前3位的非发酵革兰阴性杆菌114株占81.4%，比国内有关文献报道73.78%稍高［1］，其中铜绿假单胞菌占53.6%，不动杆菌属占15.7%，嗜麦芽寡养单胞菌占12.1%.临床感染的病原菌主要来自痰、分泌物及中段尿等标本，其中痰的分离率最高，而且来自呼吸科的标本占37.9%，提示本院临床感染主要是以呼吸道感染为主。分析这些临床资料发现，大部分患者年老体衰、呼吸道分泌功能减退，纤毛运动减弱，不能及时排痰；并长期使用广谱抗菌药物后破坏了正常菌群维持的生态平衡，使得耐药性高的非发酵菌定植生长，这可能是非发酵菌在呼吸道标本中分离率高于其他标本的主要原因。不合理的使用抗菌药物、各种侵袭性检查和治疗、住院时间过长，以及机体免疫力低下是致病主要因素。
从监测结果来看，3种非发酵革兰阴性杆菌除表现为较高程度的单药耐药性和多重耐药性外，对不同抗菌药物的耐药性差异也存在统计学意义，同一种抗菌药物对不同3种非发酵革兰阴性杆菌耐药性也不一致。本次研究资料表明，非发酵菌占革兰阴性杆菌的27%，明显高于Sahm 等［2］报道的20.13%，说明在医院感染的病原菌中非发酵菌占重要地位。非发酵革兰阴性杆菌所致的医院感染中以铜绿假单胞菌为多，其对三代头孢耐药率分别在37%～59%；高于国内相关报道［2］的15.30%，说明其耐药率有逐年增加趋势。对铜绿假单胞菌一般感染可经验用药含酶抑制剂复合抗菌药物哌拉西林／他唑巴坦和替卡西林/棒酸；对重症感染首选亚胺培南及美罗培南。不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率为9%和5%，因此，亚胺培南和美罗培南可作为临床不动杆菌属感染的首选经验药物［3］。但不动杆菌属对三代头孢和四代头孢的耐药率分别在41%～59%.嗜麦芽寡养单胞菌虽然分离率较铜绿假单胞菌和不动杆菌属低，但其耐药性较高；嗜麦芽寡养单胞菌由于天然产金属酶，面对碳青酶烯类和许多β内酰胺类耐药，治疗这种菌除了用哌拉西林／他唑巴坦和替卡西林/棒酸，还可以选用左氧氟沙星；对于嗜麦芽寡养单胞菌感染控制的关键在于预防。临床高度怀疑嗜麦芽寡养单胞菌感染，不宜使用碳青酶烯类，可选用加酶抑制剂的抗菌药物或氟喹诺酮类，待细菌药敏试验结果报告后再结合临床治疗反应调整治疗方案。由于非发酵菌感染呈逐年上升趋势，增加了临床抗感染治疗的难度［4］，因此临床在治疗非发酵菌感染时应根据实验室的药敏结果合理用药，避免滥用抗菌药物，这对控制医院感染具有重要意义。加强医院环境和人员消毒，控制非发酵病原菌在医院内的定值与播散就更为重要了。
作者：向秀梅, 曾云芳《成都医学院学报》
【参考文献】
［1］ 吴安华， 任 南， 文细毛，等. 医院内感染非发酵革兰阴性杆菌的病原学与耐药性监测研究［J］. 中华检验医学杂志，2004，27（11）：764766.
［2］ 李家奉， 李 耘， 齐慧敏，等. 20022003年中国革兰阴性杆细菌耐药性监测［J］.中华检验医学杂志，2005，28（1）：1927.
［3］ 常 东， 蒋 伟， 魏 华，等. 多重耐药铜绿假单胞菌产超广谱β内酰胺酶基因研究［J］ .中华医院感染学杂志，2006，16（9）：961964.
［4］ 王继东， 金 辉， 廉祖煌，等. 医院感染铜绿假单胞菌株新缘性分析［J］ .中华医院感染学杂志，2006，16（12）：1 3371 339.
