【摘要】 目的 了解临床酵母样真菌的感染类型、分布及其对常用抗真菌药物的敏感性，为临床诊断治疗提供正确的用药依据。方法 采用常规方法分离培养真菌，用法国生物梅里埃公司生产的ATB Expression微生物自动鉴定/药敏分析仪进行真菌鉴定和药敏分析。结果 396株酵母样真菌中，白色假丝酵母菌检出率最高(72．3%)，其次为热带假丝酵母菌(15．91%)，光滑假丝酵母菌(6．82%)。酵母样真菌对5氟胞嘧啶、两性菌素B、氟康唑、依曲康唑的敏感性分别为98．02%，98．43%，77．38%，77．76%。结论 临床酵母样真菌感染以白色假丝酵母菌为主，对5氟胞嘧啶、两性菌素B敏感性较高，对氟康唑、依曲康唑有不同程度的耐药，因此，药敏监测是非常必要的，临床医生应根据药敏结果合理使用抗真菌药物。
【关键词】 酵母样真菌：感染；抗真菌药物；敏感性
近年来，随着广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛应用，导管插管、器官移植和其他介入性治疗的普遍开展，以及艾滋病患者的不断增加，由真菌引起的条件致病菌感染日益增多[1]。患者多数为自身感染，尤以酵母样真菌引起的深部真菌感染最为常见，并且常常成为终期感染。同时抗真菌药物的使用又使真菌出现了耐药现象，给临床治疗带来了困难。由于抗真菌药物品种有限，研究真菌的耐药性并控制其耐药性发生，显得尤为重要。为了解酵母样真菌感染的菌群分布及药敏状况，现对我院2005年1月—2006年12月临床标本中分离出的396株酵母样真菌进行鉴定和药敏分析，从而指导临床合理使用抗真菌药物，有效预防真菌感染和耐药性发生。
1 材料与方法
1．1 标本来源
396株酵母样真菌均分离自我院临床送检的痰液、尿液、粪便、咽拭子、分泌物等。
1．2 培养鉴定
标本接种于沙保罗培养基30 ℃ 24 h 培养，涂片染色确认为酵母菌后，严格按操作说明书接种法国生物梅里埃公司生产的ATB ID32C鉴定条，并用ATB Expression鉴定仪进行鉴定。
1．3 药敏试验
将分纯的菌种严格按操作说明书接种法国生物梅里埃公司生产的ATB Fungus 2真菌药敏板条。该板条包括4种抗真菌药物：5氟胞嘧啶(5FC)、两性霉素B(AMB)、氟康唑(FCZ)和依曲康唑(ICZ)。该法为微量稀释法，用ATB Expression鉴定仪读取最小抑菌浓度(MIC)。
2 结果
2．1 检出率
396株酵母样真菌中，以痰液标本真菌检出率最高(288株)占72．73%，尿液(30株)7．58%，粪便(24株)6．05%，分泌物(21株)5．30%，咽拭子(18株)4．55%，其他标本(15株)3．79%。
2．2 分类
396株酵母样真菌分为8种，其中假丝酵母菌387株分为7种：白色假丝酵母菌270株，占68．18%；热带假丝酵母菌60株，占15．15%；光滑假丝酵母菌27株，占6．82%；近平滑假丝酵母菌12株，占3．03%；克柔假丝酵母菌9株，占2．27%；土生假丝酵母菌6株，占1．51%；无名假丝酵母菌3株，占0．76%。另一种是曲霉菌(均来自痰液)9株，占2．27%。
2．3 各病区真菌检出率
各类标本中，检出率最高的为呼吸消化内科(153株)38．64%，其次为肿瘤科(72株)18．17%，内分泌肾内科(42株)10．61%，传染科(24株)6．06%，其他病区共检出105株，占26．52%。
2．4 药敏结果 387株假丝酵母菌对5FC，AMB，FCZ，ICZ敏感性结果见表1。表1 387株假丝酵母菌对4种抗真菌药物的敏感率（略）
3 讨论
3．1 分离的396株酵母样真菌中，假丝酵母菌有387株，占97．33%，其中以白色假丝酵母菌为主(68．18%)，这可能与其毒素黏附力较强有关，其次是热带假丝酵母菌(15．15%)、光滑假丝酵母菌(6．82%)、近平滑假丝酵母菌(3．03%)、克柔假丝酵母菌(2．27%)、土生假丝酵母菌(1．5 1%)和无名假丝酵母菌(0．76%)，非白色假丝酵母菌感染比例有所上升[2]，这可能与氟康唑的选择压力有关。另外，还分离出了较少见的曲霉菌。引起人类感染的真菌主要是假丝酵母菌，而白色假丝酵母菌是最常见的条件致病菌，当人体抵抗力下降时，容易引起假丝酵母菌病。
3．2 从396株酵母样真菌中的分布可以发现，酵母样真菌感染主要侵袭呼吸道(72．33%)，其次是泌尿生殖道(7．58%)和消化道(6．05%)，这与近年来肺部假丝酵母菌感染明显增多的报道一致[3]，应引起临床医生的重视，在对患者治疗效果不佳时，应考虑到真菌感染的可能。肠道内酵母菌群的增加与广谱抗菌药物的应用有关，广谱抗菌药物的大量应用导致肠道菌群失调，据报道，真菌引起的抗生素相关腹泻占26．1%[4]，因此微生物实验室要加强真菌检测，做好粪便的菌群分析，及时发现菌群失调，减少抗生素相关腹泻的发生。
3．3 从396株酵母样真菌在科室的分布可以看出，以危重患者多、有慢性消耗性疾病的呼吸消化科、肿瘤科、内分泌肾内科多见，其原因是：(1)这些科室由于老年患者人多，老年人免疫功能低下，抵抗力差，往往病程长，感染频繁，常常出现多重耐药的耐甲氧西林葡萄球菌、不动杆菌等难治性细菌感染，发生真菌感染的机会增多，并且随着年龄增大，咳嗽反射减弱，支气管腺体增生，分泌物增多，黏膜纤毛清除功能降低，痰不易咳出，使上呼吸道疾病向下呼吸道蔓延，易造成真菌感染[5]。(2)肿瘤晚期反复化疗的患者免疫力下降，易继发真菌感染。(3)长期反复使用广谱抗生素或激素，引起菌群失调或机体免疫力下降，也易引起真菌感染。
3．4 本组资料显示，387株假丝酵母菌对5FC、AMB敏感率高达98%以上，而对氟康唑、依曲康唑敏感性较低(77%)，其原因可能与药物的用药机会有关。AMB可致寒战、发热，并且有严重的心肾毒性，临床应用受到一定限制，这可能是敏感性较高的原因，但由于其抗菌谱广，仍然是目前治疗深部真菌感染较好的药物。5FC敏感性高的原因可能是其抗菌范围较窄，用量大，疗程长，单独使用容易产生耐药，临床较少使用；该药一般应与AMB联合使用。FCZ，ICZ敏感性较低，可能因其抗菌谱广、毒性低、半衰期长，在临床上广泛应用的原因。应注意的是，光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌对FCZ几乎天然耐药[6]，这与我们的实验结果相符。
3．5 药敏试验中发现，培养时间对ATB Fungus 2真菌微量稀释法影响结果较大，孵育时间应由48 h 改为24 h ，因为唑类药物48 h 判读结果时容易出现“拖尾“现象，可使MIC值增加128倍，造成假阳性的耐药株的产生。因此，临床微生物工作者应加强对真菌的培养、鉴定以及耐药机制的研究，为临床提供可靠的用药依据，减少耐药菌株的产生，在安全、经济的条件下获得最佳疗效。
作者：于建华，刁幼林，朱世《临床军医杂志》
【参考文献】
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