嗜血杆菌属与临床有关的种有9个,而流感嗜血杆菌是一种只侵犯人的兼性厌氧的革兰阴性杆菌,主要寄生在上呼吸道,与许多感染性疾病有关。为了选择检测效果好、成本低的培养基对嗜血杆菌属进行鉴定与分型,本实验利用进口原料配制的培养基(H1)和国产原料配制的培养基(H2)对住院病人呼吸道感染者痰液及咽拭子标本200份,其中成人152份、儿科住院患者48份的嗜血杆菌细菌进行了分离培养及鉴定并做血清学分型。
1 材料与方法
1.1 培养基 (1)用进口原料配制的培养基(H1),Oxid公司的胰蛋白大豆琼脂作基础,加入10%无菌羊血,15μg/NAD及300μg/ml 杆菌肽制成巧克力平板。(2)用国产原料配制的培养基(H2):浙江天和微生物试剂公司的淋病奈瑟氏菌培养基作基础,加1%酵母粉,10%无菌羊血,50mg/L万古霉素制成巧克力平板。(3)血琼脂平板及普通琼脂平板:常规法制备。(4)浙江产心脑琼脂加马血培养基。
1.2 方法 (1)分离培养:将痰液或咽拭子划线接种于H1和H2培养基上,置烛缸中(3%~5%CO2),
2 结果
2.1 H1和H2培养基的比较 (1)嗜血杆菌属细菌在两种培养基上生长良好杂菌被抑制,H2对草绿色链球菌抑制作用明显。(2)嗜血杆菌分离情况见表1。经χ2检验,两种培养基对嗜血杆菌分离率差异无显著性(P>0.05)。
2.2 H1培养基对成人与儿童呼吸道标本中嗜血杆菌属细菌的分离情况 见表2。成人与儿童嗜血杆菌的细菌分别为13株和17株,分离率分别为8.6%和35.4%,其中流感、副流感、副溶血、嗜沫嗜血杆菌的菌株数(分离率)为两种培养基对200份临床样本。表1 嗜血杆菌分离情况表2 成人与儿童临床标本嗜血杆菌属分离情况(略)
2.3 血清分型 临床分离到的9株流感嗜血杆菌,b型1株,非b型8株。
2.4 临床分离的嗜血杆菌属细菌在国产心脑琼脂加马血培养基上均生长。
3 讨论
(1)虽然H2培养检测结果好,但需要进口,成本高,H2培养基利用国产做基础,降低了成本。该培养基中的万古霉素有效地抑制杂菌生长,增加了培养基的选择性且具有嗜血杆菌菌落易识别的特点。表1显示H1和H2两种培养基对嗜血杆菌的分离率差异无显著性,H1和H2及国产心脑琼脂加马血培养基的分离效果相似。
(2)儿童嗜血杆菌属流感嗜血杆菌分离率(35.4%,12.5%)高于成人(8.6%,0.52%),呼吸道标本中副流感嗜血杆菌分离率高于流感嗜血杆菌。
作者:唐丽英
作者单位: 161005 黑龙江齐齐哈尔,齐齐哈尔市第一机床厂职工医院