1.微生物学检验 采取病兔或死兔的空肠、回肠、盲肠内容物、肠黏膜或粪便等作被检病料。
涂片镜检：将被检材料直接涂片，作革兰氏染色镜检，可见有革兰氏阳性大杆菌，一般很少见到芽孢。
分离培养：将病料接种于熟肉培养基，置37℃温箱培养，或接种于DS培养基，亦可置37℃温箱培养。5~6小时后培养基变得很混浊，并产生大量气体。在有气体出现时(一般在4～6小时)进行传代(2~3次)可获纯培养物。或者将检验材料直接接种于鲜血琼脂平皿培养基，或葡萄糖鲜血琼脂平皿培养基，或乳糖牛奶卵黄琼脂平皿培养基，置于厌氧罐中于37℃温箱培养24小时。魏氏梭菌在鲜血琼脂或葡萄糖鲜血琼脂平皿上，形成圆形、凸起的单个菌落，大小2~4毫米，呈半透明、表面光滑、边缘整齐；有些菌株，菌落中心凹陷，表面呈放射性条纹状，边缘呈锯齿状。菌落周围出现双溶血圈。在乳糖—牛奶—卵黄琼脂平皿上，菌落周围和下面出现乳浊带。由于发酵乳糖，菌落周围呈红色晕环，但表面不形成虹彩层。最后根据典型菌落特征，挑取菌落，接种于鲜血斜面培养基，供以下各种特性检验之用。
镜检：涂片后进行革兰氏染色，镜检为革兰氏阳性、粗大杆菌，很少见有芽孢。
生化反应：将纯培养物接种于糖、醇类等生化反应培养基。魏氏梭菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等，靛基质阴性，硫化氢阳性。
牛奶培养基：能迅速发酵牛奶中的乳糖，呈一种特有的强烈的凝固产气反应。
2.动物接种试验 小白鼠毒力试验：将18~24小时液体纯培养物接种18~22克体重的小白鼠，每只鼠腹腔注射0.5毫升，观察3日。如小白鼠死亡，即进行细菌分离培养及涂片镜检，予以证实。
家兔试验：将18～24小时液体纯培养物接种家兔，或固体纯培养物用灭菌生理盐水洗下接种家兔，每只兔耳静脉注射0.5毫升，10分钟后扑杀家兔，置37℃温箱5～8小时后体内充满气体，腹部膨胀。剖检：各脏器内有许多气泡，尤以肝脏为甚，俗称“海绵肝”或“泡沫肝”，然后以肝脏作细菌培养及染色镜检。
3.毒素检验 小白鼠致死试验如下：
肠内毒素试验：将病兔或死兔的空肠、回肠、盲肠内容物用灭菌生理盐水作成倍稀释(如肠道内容物很稀可不必稀释)，经8000转/分、15分钟，或3000转/分、1小时离心沉淀，取上清液或经过滤器除菌的液体接种小白鼠，每只鼠尾静脉注射0.2～0.5毫升，达一个致死量以上时，30分钟内即死亡；发病后30分钟而不死亡者，将很快恢复正常。小白鼠体重小的，敏感度高，毒素量大，致死时间将缩短。
培养物毒素测定：将待检菌株接种于DS培养基或熟肉培养基，置37℃下培养12～18小时，培养物再经8000转/分、15分钟，或3000转/分、1小时离心沉淀，取上清液接种小白鼠。每只鼠尾静脉注射0.2毫升，或腹腔注射0.5毫升，一般在30分钟内死亡，需观察3日。
豚鼠皮肤试验：离心待检菌株培养物，取其上清液(方法同小白鼠)，并用生理盐水作适当稀释，注射豚鼠背部(皮内)0.05毫升，阳性者在注射后10~15分钟内即出现红肿反应。
肿胀反应可持续到次日，测量的红肿直径为0.8～1.5厘米。检样注射后30分钟内，给豚鼠静脉注射2.5％伊文斯蓝l毫升，1小时后阳性反应部位出现蓝色环状。严格控制注射检样与注射伊文斯蓝间隔时间，因间隔时间不同对蓝色反应的大小有影响。
家兔皮肤坏死试验：离心待检菌株液体培养物，取其上清液，注射于家兔腹部皮内，每个注射点注射0.05~0.2毫升，观察注射部位，阳性者先发生水肿后出现坏死现象，需观察3日。
溶血试验：离心待检菌株的液体培养物，取其上清液0.5毫升，加入小试管内，再加0.5％绵羊红细胞悬液0.5毫升，混匀，置37℃水浴箱内，经30分钟、60分钟和120分钟和24小时观察溶血情况，阳性者于60分钟内发生溶血。
4.中和试验 离心待检菌株液体培养物，取其上清液，或离心肠内容物上清液0.5毫升(应含有2～5个最小致死量)，加入标准各型混合血清或分型血清0.5毫升，混合。另设待检上清液加等量生理盐水混合，置37℃温箱内作用(中和)30～40分钟，将上述各种混合物分别接种小白鼠，每只鼠腹腔注射0.5毫升或尾静脉注射0.2毫升，观察小白鼠有无死亡。根据注射后对小白鼠的保护作用确定毒素型。
5.对流免疫电泳 琼脂凝胶板以pH8.6、0.05~0.1摩/升的巴比妥缓冲液配制的1％琼脂浇成。在6厘米× 9厘米的玻板上，加上述琼脂10毫升，冷凝后打孔，孔径3毫米，孔距4~5毫米。离心待检菌株液体培养物，取其上清液，或离心肠内容物，取其上清液，作被检抗原，分别加入琼脂板一排孔内。另一排孔内加诊断血清。加样后，置电泳槽上，以6～7伏/厘米的稳定电压电泳45~60分钟。在相应的抗原、抗体孔之间出现白色月牙形沉淀带，为阳性反应。如沉淀带不清晰时，可在密闭容器内于37℃置数小时，以增加清晰度。
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