【 摘 要】 ：目的：用抗生素微生物检定法测定药品含量，检测效价结果在合格与不合格边缘的抗生素药品 ( 片剂、颗粒剂等) ，用不同厂家的培养基进行多次试验，根据检测结果进行比较，得到比较准确的测定数据。方法：采用抗生素微生物检定法项下的管碟法进行试验。结果：不同培养基对抗生素药品效价的测定有较大影响。结论：对检测效价处于合格与不合格边缘的抗生素药品，用不同厂家或者不同批号的培养基进行再次试验，可得到更为准确的测定数据。
【 关键词】 ：抗生素；效价测定；培养基
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517（2010）02-0068-01
1 标准品 、实验用 菌液的制备
标准品：庆大霉素，批号 130326—200314 ，规格638u／m g ，中国药品生物制品检定所。
实验用菌液的制备：实验菌，短小芽孢杆菌 ( Bacillus pumilus，63202号)芽孢悬液。取短小芽孢杆菌 ( 63202 ) 工作用菌种普通琼脂斜面培养物，加灭菌生理盐水 3—4毫升将菌苔洗下，制成悬液，用吸管将此悬液接种至盛有培养基I号 ( pH7．8—8．0 )大试管斜面内，在37℃培养7天。 取菌苔涂片，革兰氏染色镜检，应有芽孢85％以上，用灭菌水将芽孢洗下，制成芽孢悬液，合并至灭菌大试管内，在70℃水浴加热30分钟，将芽孢悬液移至灭菌离心管内，rmpl500，离心 2 0分钟。同法离心沉淀，共操作3次。将菌悬液移至灭菌试管内，再置 7 O ℃水浴加热 3 0分钟。4—8℃保存，可使用6—1 2个月。
2 培养基、供试样品
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培养基 |
供试样品 |
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名称 |
批号 |
生产厂家 |
样品名称 |
规格 |
批号 |
生产厂家 |
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抗生素检定培养基1（PH7.8-8.0） |
080414 |
北极三药科技开发公司 |
硫酸庆大霉素片 |
4万单位/片 |
20080103 |
广东台城制药有限公司 |
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硫酸庆大霉素片 |
4万单位/片 |
20080601 |
大同云岗制药有限公司 |
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|
抗生素检定培养基1（PH7.8-8.0） |
070824 |
中国进出口商品检验技术研究所 |
硫酸庆大霉素颗粒 |
10mg/袋 |
080302 |
河北华威得菲尔药业有限公司 |
|
硫酸庆大霉素颗粒 |
10mg/袋 |
0801001 |
华北制药集团制剂有限公司 |
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3 实验结果
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培养基测定结果样品名称 |
硫酸庆大霉素片（广东台城制药有限公司） |
硫酸庆大霉素片（大同云岗制药有限公司） |
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试品间 |
回归 |
偏离平行 |
测定效价 |
平均可信限率 |
试品间 |
回归 |
偏离平行 |
测定效价 |
平均可信限率 |
|
|
北京三药科技开发公司 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
108.7% |
5.2% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
98.7% |
3.8% |
|
中国进出口商品检验技术研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
102.2% |
5.0% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
91.4% |
4.5% |
|
北京三药科技开发公司 |
P<0.01 |
P<0.01 |
p>0.05 |
91.1% |
4.3% |
P<0.01 P>0.05 P>0.05 |
P<0.01 P<0.01 P<0.01 |
P>0.05 P>0.05 P>0.05 |
86.8%85.7%83.0% |
4.2% 5.6% 4.6% |
|
中国进出口商品检验技术研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
99.2% |
4.7% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
101.7% |
5.1% |
4 讨论
从以上四个样品的检测结果可以看出，使用相同培养基对同一个样品进行多次测定时，测得结果之差大约为 1 — 5 ％，而使用不同厂家的培养基，测得结果之差 >5 ％。培 养基的性质不同对抑菌圈清晰度及实验结果的精确度影响较大。在抗生素微生物检定法的整个试验中，从标准品、供试品的取样到培养基、缓冲液配制及实验菌种的制备各个环节均不容忽视。在日常工作中我们常常会碰到抑菌圈破裂、呈卵圆形、椭圆形甚至无圈等不正常情况。通过从多方面分析原因，有时重新选择另一个批号或者厂家的培养基就能得到满意的实验结果。另外，配制培养基及缓冲液的纯化水也很重要，因为各地水质酸度不一，按照药典规定配制的培养基及缓冲液的 p H值也不相同，这就需要我们对配制好的培养基及缓冲液的 p H值进行校对。在氨基糖苷类抗生素的检测中，培养基及缓冲液的 p H值对抑菌圈的形成影响很大，酸度越高得到的抑菌圈就越小。所以对检测效价在合格与不合格边缘的抗生素药品，应再换另一个厂家或批号的培养基进行再次试验，根据两次结果进行 比较 ，从而得到比较准确的测定数据。
参考文献
[ 1 ]周家药典委员会．抗生素微生物检定法 《 中国药典》2 0 0 5年版二部
附录Ⅺ A：79—84
[ 2 ]张治锬．抗生素药品效价的微生物检定一管碟法 《 抗生素药品检验》
1987，12—21，59—65．
[ 3 ]桑国卫，等．抗生素微生物检定法 《中国药品检验标准操作规范》
2000，376—377．
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