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XGAL-MUG法:饮用水中大肠菌群检测的新方法



录入时间:2010-11-8 13:31:49 来源:安科生物

 

大肠菌群是影响饮用水安全的主要因素之一,其检测方法的使用非常重要。为了方便用户对检测方法的选用本文将传统的LB-BGLB培养基法(简称LB)、MMO-MUG(简称MMO)、XGAL-MUG(简称XGAL)进行了比较。LB法和MMO法都是已被官方采用的方法;XGAL法是采用安科生物制品 (上海)有限公司开发的一种显色培养基进行检测的方法。这三种检测方法均适用于桶装饮用水中大肠菌群的检测。

XGAL法、MMO法与LB法原理

MMO法检测原理   培养基ONPG被大肠菌群中的β-半乳糖苷酶分解产生邻硝基苯酚后会呈现黄色,所以,若呈现黄色.则表明含有大肠菌群;另外,MUG可被大肠杆菌里的特殊酶-β-葡萄糖醛酸酶分解若用366nm的紫外线灯照射显荧光则表明含有大肠杆菌。

LB法检测原理   根据上水试验法. LB培养基、LB-BGLB培养基、EMB培养基、标准琼脂培养基做推定试验、确定试验完全试验。

XGAL法检测原理   根据培养基中增殖底物及酶底物X-GALβ-半乳糖苷酶分解产生游离吲哚后呈现蓝色,判断是否含有大肠菌群:而MUG也可被β-半乳糖苷酶分解经紫外线照射若出现青紫色荧光,则含有大肠杆菌。

XGAL法、MMO法与LB法灵敏度比较试验   

试验菌株:E.coli一株,Klebsiella pneumoniae株,Enterobacter cloacae 两株.Citrobacter freundii 一株;培养时间:LB法按照上水试验方法,XGAL法和MMO法为24小时;判断基准:遵循上水试验方法或按照使用说明书操作。试验结果见表1。

1 灵敏度比较实验(S推定试验阳性,K确定试验阳性)

菌种

稀释倍数与方法

10-8

10-9

10-10

10-11

LB

XGAL

MMO

LB

XGAL

MMO

LB

XGAL

MMO

LB

XGAL

MMO

E.coli

+

+

+

+

+

+

-

+

-

-

-

-

K. pneumoniae

+

+

+

+

+

+

-

-

-

-

-

-

E. cloacae

K

+

+

K

+

+

K

+

-

-

-

-

E. cloacae

K

+

+

K

+

+

-

+

+

-

-

-

C. freundii

S

+

+

S

+

+

S

-

-

-

-

-

 

由表1可以看出E.coliKpneumoniaeLB法、XGAL法、MMO法上结果非常一致;E.cloacaeCfreundiiLB法里显示的是确定阳性或推定阳性,MMO法里显示,在10-810-9范围内都是阳性。 

XGAL法、MMO法与LB法两两比较试验

LBMMO法的比较

阳性一致数为76个阴性一致数为195个,合计一致率为88.9%.不一致数为34个,不一致率为11.1%。MMO法呈阳性.而LB法呈阴性的为25个;LB法推定试验呈阴性的为3个,确定试验阶段呈阴性的为7个,完全试验阶段呈阴性的有15个;MMO法呈阴性,LB法呈阳性的有9个.

LB法和XGAL法的比较  阳性一致数为79个阴性一致数为193个.合计一致率为89.2%不一致数是33个.不一致率为10.8%。XGAL法呈阳性,LB法呈阴性为27个;LB法的推定试验呈阴性的为7个,确定试验阶段呈阴性的为5个,完全试验阶段呈阴性的为15个;XGAL法呈阴性,LB法呈显阳性的有6个。

MMO法和XGAL法的比较  MMO法和XGAL法的阳性一致数为96个阴性一致数为194个合计一致率为95.1%。与LB法相比,一致率较高。

通过试验发现MMO法和XGAL法检测结果非常接近XGAL法可以在应急情况下使用或作为MMO法的辅助方法,并且两者灵敏度都比LB法高。由于XGAL培养基中的十二烷基硫酸钠具有阻止革兰氏阳性菌发育的作用.所以XGAL法对微生物的选择性比MMO法更强;XGAL法相对稳定.几乎没限阳性反应;XGAL法的培养基经灭菌、注入简易容器操作简单.可大大减少实验人员准备灭菌试管的步骤。

 

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