银河澳门官网入口,银河集团网址登录



银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物基本知识->TTC嗜盐培养基的实验观察

TTC嗜盐培养基的实验观察



录入时间:2010-11-8 13:27:01 来源:浙江预防医学

      嗜盐性试验是弧菌科等细菌鉴定的一项重要鉴别试验,在实际应用中.尤其是市售嗜盐微量生化反应管的使用.常常遇到难以判断的结果即细菌真正繁殖的混浊与因接种菌量过量 的浑浊之区别,根据细菌在繁殖过程中能将 2、3、5-氯化三苯四氮唑 (TTC)还原成红色的甲的原理,我们将TTC加于嗜盐培养基中作为指示剂观察培养基的颜色变化同时对TTC的浓度、培养基高压灭菌保存条件作了一些实验研究现。将结果报告如下。 

材料与方法

1   培养基  嗜盐性培养基配制按文献进行,根据实验设计选择含NaCl0%、3%、6%及10  4种浓度。配制(0NaCl)的TTC溶液.按不同量加于上述4种浓度的嗜盐培养 基中,使TTC终浓度分别为0.10/万、0.25/万、0.50/万、1.00/万、2.00万、3.00/万和 4.00/万。即成TTC嗜盐培养基,分装小口径试管,灭菌后备用

2 实验菌株  本参加WHO质控鉴定菌株及本站分离保存菌株。

3 实验方法  将实验各菌种分别接种于含不同浓度TTC嗜盐培养基,37培养1824h.观察结果。

4 培养基高压灭菌 将含TTC的培养基分别置15 p  15 min、12 p 15min、10 p  12 min三种条件下蒸汽高压灭菌,观察灭菌后颜色变化。 

5 培养基保存条件的实验 将灭菌后培养基置冰箱室内避光,室内不避光三种环境中,观察保存变化。

结果与讨论

1   弧菌科各菌属  24株菌和9株化脓性球菌经不同浓度TTC嗜盐培养基培养18h后的结果,见表1 2 。 

1   弧菌科细菌在不同含量TTC培养基培养18小时的显色情况表

NaCl浓度(%

TTC浓度(/万)

菌名

霍乱弧菌

副溶血性弧菌

类志贺邻单胞菌

气单胞菌

创伤弧菌

拟态弧菌

溶藻弧菌

0

0.10

+

-

-

+

-

+

-

0.25

+ + +

-

-

+ +

-

+ + +

-

0.50

+ + +

-

-

+ +

-

+ + +

-

1.00

+ + +

-

-

+ +

-

+ + +

-

3

0.10

+

+ +

+ +

+

+ +

+ +

- +

0.25

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

0.50

+ + +

+ + + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + + +

+ + +

1.00

+ + + +

+ + + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + + +

+ + +

6

0.10

-

+ +

-

-

+ +

-

- -

0.25

-

+ + +

-

-

+ + +

-

+ + +

0.50

-

+ + + +

-

-

+ + +

-

+ + +

1.00

-

+ + + +

-

-

+ + +

-

+ + +

10

0.10

-

-

-

 

-

-

+ +

0.25

-

-

-

 

-

-

+ + +

0.50

-

-

-

 

-

-

+ + +

1.00

-

-

-

 

-

-

+ + +

注:“+”表示显色程度;“-”表示不显色 

2 部分化脓性球菌在不同含量 TTC培养基培养 18小时的显色情况

NaCl%

TTC浓度(/万)

菌名

链球菌

肠球菌

葡萄球菌

6.5

0.10

-

-

 

0.25

+

+

 

0.50

+ +

+ + +

 

1.00

+ +

+ + +

 

7.5

0.10

 

 

+

0.25

 

 

+ +

0.50

 

 

+ + +

1.00

 

 

+ + +

注:“+”表示显色程度;“-”表示不显色

      表中显示经18 h培养即出现明显红色, 以往常需培养48h才能肉眼判断生长是否混浊.因此作为指示剂.方便了结果观察且缩短了报告时间

2 TTC浓度选择 :TTC抑制试验.于上述培养基中分别接种定量(每毫升约含10万个细菌)的弧菌及部分耐盐球菌连续实验5次,结果在0.103.00/万 范围内.弧菌科细菌生 长未受抑制:超过2.00/万时.嗜盐球菌生长受抑制,从表1、表2分析显色情况.弧菌科细菌在TTC终浓度0.10/万时显色最弱,呈微红色,其余浓度显色基本一致: 部分化脓性 球菌在终浓度0.10/万、0.25/万时显色最弱。根据抑制试验和显色情况综合分析.我们从 为弧菌以终浓度0.25/万为宜.部分化脓性球菌选择TTC终浓度0.50/万为宜 。

3.TTC嗜盐培养基高压灭菌条件选择:将含TTC培养基分别置15p 15min、12p  15min,10p 12min  3种条件下经电热手提式高压蒸汽灭菌器灭菌,各试验5次。结果经15  15min 后培养基显示肉眼可见的微红色.表示TTC已被部分破坏而另外 2种条件下肉眼觉 察不到红色。因此.我们认为TTC可溶入培养基中一起高压灭菌.只需控制相应的压力和时间.故可省去对TTC溶液过滤除菌和临用时加入之烦

 4 TTC嗜盐培养基在保存条件的观察:将已灭菌的培养基置室内避光或冰箱保存1 月,无颜色变化,甚至置室内不避光保存也无颜色变化,因此该培养基在保存过程中不受光线对TTC分解的影响。

 

上一篇:卵黄高盐培养基的改进

下一篇:XGAL-MUG法:饮用水中大肠菌群检测的新方法

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294