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平酸菌及其检验



录入时间:2010-11-3 9:48:10 来源:中国食品商务网

 

一、平酸菌简介
   
引起罐头食品酸败变质而又不胖听(即产酸不产气)的微生物在罐头工业上称为平酸菌。它是需氧芽胞杆菌科中的一群高温型,具有嗜热、耐热的特点,其适宜生长温度为4560℃,最适生长温度为5055℃,在37℃生长缓慢,多数菌种在pH6.8-7.2生长良好,少数菌种能在pH5.0生长,广泛分布于土壤,灰尘和各种变质食品中。造成罐头食品平盖酸败的细菌,从微生物学分类来分,主要有二种:通常是嗜热脂肪芽胞杆菌,凝结芽胞杆菌。
   
嗜热脂肪牙胞杆菌:(Bacillus stearothermo philus)
   
革兰氏阳性菌,能运动,周生鞭毛。芽胞椭圆形,亚端生或端生,通常使孢囊膨大,最高生长温度6575℃。能够葡萄糖产酸,水解淀粉。
   
凝结芽胞杆菌:(Bacillus Coagulans)
   
革兰氏阳性,能运动,周生鞭毛。芽胞椰圆形或柱状,一次端生或端生,偶尔中生,有些菌株孢囊膨大不明显,有些菌株的孢囊大。最高生长温度5560℃,最低生长温度1525℃。接触酶阳性,葡萄糖产酸。
   
二、罐头食品中平酸菌的检验方法
    1
.试样制备:
   
罐头样品预先经55℃保温一周,然后按正常方法进行开罐,吸取内容物液体1毫升,如为固体内容物则取1,以无菌手续接种于3#培养基中,每罐接种2支。
    2
.增菌培养
   
接种试样的3#培养基试管,于55℃培养48小时,如发现指示剂由紫变黄即判断为阳性,同时进行涂片镜检为芽胞杆菌(有时不易检到芽胞),如阳性需继续培养48小时。
    3
.纯分离培养
   
将阳性培养基试管划线接种于3#培养基琼脂平板55℃培养48小时,检查有无可疑菌落(菌落黄色,周围有黄色环,中心色深不透明),如有可疑菌落则接种于普通琼脂斜面和芽胞培养基斜面,55℃培养24小时,涂片镜检观察有无芽胞,以及芽胞的形状及位置,并同时以普通琼脂斜面培养物进行生化学试验。
    4
.鉴别:
   
菌体形态:为革兰氏阳性芽胞杆菌。
   
生化反应:取上项斜面培养物按下列项目进行鉴别。
   
平酸菌生化反应鉴别表

项目

菌别

60

培养

酸盐

葡萄

基质

VP

反应

7NaCL

肉汤

柠檬

酸盐

酸性

胰胨

嗜热脂肪芽胞杆菌

生长

d +

+

不生长

凝结芽胞杆菌

不定

d-

+

b

生长


   
注:+为产酸或阳性,-为阴性
    d
+:5085%的阳性
    d
-:15--49%的阳性
    b
:2549%阳性
    45
55℃培养三天后无反应报告为阴性。
    5
.培养基的配方
    ①3
#葡萄糖肉汤培养:
   
蛋白胨 5 葡萄糖 5
   
酵母浸膏 1 牛肉膏 5
   
可溶性淀粉 1 黄豆浸出液 50mL
   
1000mL 0.4%溴甲酚紫 4mL
    pH 7.0-7.2
    115℃
高压灭菌15min
    ②3
#培养基琼脂:
    3
#葡萄糖肉汤 1000mL
   
琼脂 1820
    pH 7.2
7.4   121℃高压灭菌15min
    ③
酸性胰胨琼脂
   
胰蛋白胨 5 酵母膏 5
   
葡萄糖 5 K2HPO4 4
   
1000mL 琼脂 18221520g)
   
琼脂粉 12
    pH5.0  121℃
高压灭菌15 min
    ④7%NaCL
肉汤
   
蛋白胨 5 牛肉膏 3
    NaCL 70
1000mL
    pH7.0 121℃
高压灭菌15min
    ⑤
芽胞培养基
   
牛肉膏 10 蛋白胨 10
    NaCL 5 K2HPO4 3
    (K2HPO4 3H2O 3.9
    MnSO4 0.03
琼脂 25
    pH 7.2 121℃
高压灭菌15min
    ⑥V
P培养基
   
蛋白胨 5 葡萄糖 5
    K2HPO4 5
蒸馏水 1000mL
    pH7.2 121℃
高压灭菌15min
    ⑦
西蒙氏枸橼酸盐琼脂(柠檬酸盐)
    NaCL 5
硫酸镁 0.2
   
磷酸铵(NH4H2PO41 磷酸氢二钾K2HPO41
   
枸橼酸钠 5
   
琼脂 20 蒸馏水 1000mL
    0.2
%溴麝香草酚兰酒精溶液 40mL
    pH 6.8 121℃
高压灭菌15min
    ⑧
童汉氏蛋白胨水
   
蛋白胨 10 NaCL 5
   
蒸馏水 1000mL pH 7.4
    121℃
高压灭菌15min
    ⑨
硝酸盐肉汤
   
牛肉膏 3 蛋白胨 5
   
硝酸钾 1 蒸馏水 1000mL
    pH 7.0 121℃
高压灭菌20min(15min)

 

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