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    细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法



    录入时间:2010-10-28 10:19:44 来源:生命经纬

        麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。


         
    麦氏比浊管的配比如下:

      (McFarland)

    0.5

    1

    2

    3

    4

    5

    0.25%BaCl2ml

    0.2

    0.4

    0.8

    1.2

    1.6

    2.0

    1%H2SO4(ml)

    9.8

    9.6

    9.2

    8.8

    8.4

    8.0

    细菌的近似浓度(×108/ml)

    1

    3

    6

    9

    12

    15

    操作方法:

    1、轻摇标准试管。

    2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

    3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

    使用技巧:

    1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

    2、找张白纸,打上平行直线,然后看(利用光在不同浓度液体折射不同)。

    注意事项:

    1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

    2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

    注:

    1、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

    2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内,适合于普通实验。

    3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计。

     

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