(1)基本培养基
柠檬酸·2H2O(Na3C6H5O7·2H2O) |
3.0g |
KH2PO4 |
5.0g |
NH4NO3 |
2.0g |
MgSO4·7H2O |
0.2g |
CaCl2·2H2O |
0.1g |
微量元素溶液(见(3)) |
1.0ml |
生物素溶液(10mg/ml) |
1.0ml |
蔗糖 |
20.0g |
琼脂 |
15.0g |
加蒸馏水至1000ml |
|
(2) 杂交培养基
KNO3 |
1.0g |
KH2PO4 |
1.0g |
MgSO4·7H2O |
0.5g |
NaCl |
0.1g |
CaCl2·2H2O |
0.1g |
微量元素溶液(见(3)) |
1.0ml |
生物素溶液(10mg/ml) |
1.0ml |
蔗糖 |
20.0g |
琼脂 |
15.0g |
加蒸馏水至1000ml |
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(3)微量元素溶液(基本培养基和杂交培养基用)
柠檬酸·H2O |
500mg |
ZnSO4·7H2O |
500mg |
Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O |
100mg |
CuSO4·5H2O |
25mg |
MnSO4·4H2O |
5mg |
H3BO3 |
5mg |
Na2MoO4·2H2O |
5mg |
加蒸馏水至100ml |
|
(4)补充培养基
在基本培养基上补一种或多种生长物质,如氨基酸、核酸碱基、维生素等。氨基酸用量一般是100ml基本培养基中加5~10mg。
本实验所用补充培养基只要在基本培养基中适量的赖氨酸,赖氨酸缺陷型菌株就能生长。
(5)完全培养基
基本培养基 |
1000ml |
酵母膏 |
5g |
麦芽汁(亦可省) |
5g |
酶解酪素 |
1g |
硫胺素 |
100mg |
核黄素 |
5mg |
吡哆醇 |
5mg |
泛酸钙 |
50mg |
对-氨基苯甲酸 |
5mg |
菸酰胺 |
5mg |
胆碱 |
100mg |
肌醇 |
100mg |
叶酸 |
1mg |
蒸馏水 |
1000ml |
蔗糖 |
20g |
加2%琼脂,即为固体完全培养基。
(6)马铃薯培养基
将马铃薯洗净去皮,切碎,取200g,加水1000ml,煮热,然后纱布过滤,弃去残渣,滤下的汁加2%琼脂,20g蔗糖,煮融,分装到试管中。亦可将马铃薯切成黄豆大小碎块,每支试管放4~5块,再加入融入化好的琼脂,蔗糖。
上述培养基分装试管后,55.2kPa(8磅)灭菌30分钟,取出摆成斜面,可代替完全培养基使用。
(7)玉米杂交培养基
将玉米浸泡软化,破碎,每管3~4粒,加入少量琼脂(0.1g左右),加棉塞消毒,即成,不需碎面。
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