水中放线菌无论在数量上或在种类上都比其他的细菌少得多。但在水、沉积物及浮游生物中都能分离到放线菌,如Kpucc 从海泥及浮游生物中分离到灰色放线菌、球孢放线菌及直线白色放线菌等三种。在淡水中也有多种放线菌,如游动放线菌属等。
1 .培养基成分及其制法
① 葡萄糖酵母膏牛肉膏蛋白胨琼脂 即埃默森氏培养基.葡萄糖、酵母膏可减至每升l 克,也可省去氯化钠。此培养基适用于放线菌的分离、其成分如下:
葡萄糖
酵母膏
牛肉膏
蛋白胨
NaCl (用子淡水种)
琼脂
陈海水(用于咸水样品)
或蒸馏水(用于淡水样品)1000毫升
调pH 至7.2-7.4 ,
② 高氏(Gause )1号斜面培养基,此种培养基适于放线菌的纯化培养。其成分如下;
淀粉(可溶性)
KNO3
MgO2·7H2O
FeSO4·7H2O
K2HPO4
NaCl
琼脂
陈海水或蒸馏水1000毫升
pH 7.2-7.4
用少量水将淀粉调成糊状.取500 毫升煮沸水注入糊状淀粉中,边加边搅拌,使其溶解,除琼脂外,加入其他成分.溶解后加水至1000 毫升.加入琼脂,并使其溶化,调pH ,分装于试管,
2 .分离步骤
① 按上法取
② 以10倍稀释法将泥样冲稀至10-2和10-3的悬液.
③ 各取0.1毫升悬液放于淀粉铵平板培养基上.以弯曲玻棒涂匀,每个稀释度制2 个平板.
④ 倒放培养皿于25
⑤ 观察菌落特征,挑取所需菌落,接种于高氏1 号斜面培养基作纯化培养。