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《水生微生物实验法》——水中葡萄球菌的分离与观察



录入时间:2010-9-13 13:49:50 来源:青岛海博

 

这类细菌在自然界广泛分布,从水、空气、用具、食物及人体等均可找到,除柠檬色葡萄球菌一般不致病外,其余两种是致病力较强者,尤其是金黄色葡萄球菌能引起化脓性感染,故又称为化脓性球菌,严重感染会导致败血症。某些溶血菌株能产生急性胃肠炎的肠毒素。肠毒素耐热,100  30分钟不被破坏,是食物中毒常见病原之一。所以葡萄球菌也作为水质、水产品污染的检验项目。通常检验方法是.先分离,后鉴定。

1 .增菌培养

① 将检样接种于7.5%氯化钠肉汤培养基中。

② 置于37下培养16-18 小时。

2 .分离培养

1)培养基成分及其制备:

① 蛋黄-叠氮化钠琼脂:

蛋白胨10

牛肉膏5.5

NaCl  3

叠氮化钠0.15

Na2HPO4 0.2

琼脂15

蒸馏水850毫升

将上述成分加入150毫升的蛋黄溶液(蛋黄:生理盐水=l : 1 )混匀,分装灭菌,制成平板,用于培养或分离金黄色葡萄球菌。

② 查普曼心培养基;

牛肉膏l

膘蛋白胨10

甘露醇10

NaCl  75

琼脂15

蒸馏水1000毫升

0.4%酚红溶液6 毫升

将上面各成分除酚红外混合加热溶解,校正pH 7.4 , 分装于烧瓶,115 蒸汽下灭菌10分钟、用时临时倾注成平板.

③ 血琼脂:

营养琼脂250毫升

无菌脱纤维的兔或马血12.5 毫升

将营养琼脂于112 溶化、自然冷却,当冷至50-55时,分装于培养皿,分别按比例加入血液,转动混匀,凝固,备用。

( 2 )接种与观察:

① 将增菌的培养物蛋黄-叠氮化的琼脂或琼脂平板或查普曼培养基上划线或涂布接种。

② 将平板置37下培养18-24小时.

③ 观察   金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上形成的菌落呈金黄色(色素不易辨认时.可挑在滤纸上观察)、大而突起、圆形、不透明、表面光滑、周围有溶血圈,在查普曼培养基上的菌落较细小,菌落周围呈黄色(分解甘露醇)必要时可做生化鉴定和动物试验。

 

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