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《水生微生物实验法》——红螺菌属的富集培养与分离



录入时间:2010-9-10 15:35:12 来源:青岛海博

 

(十六)红螺菌属的富集培养与分离

其中包括红色红螺菌( 或称深红红螺菌)、度光红螺菌、巨大红螺菌、长形红螺菌、纤细红螺菌(或称细小红螺菌)、棕黄色红螺菌(或称黄褐红螺菌),此类细菌均生长于水和淤泥中,属厌氧或微嗜氧菌,在厌氧条件下.于光亮中能合成有机物.细胞螺旋状盘绕,长度不一,有不等数蜷曲.同种细胞的大小变化很大,有端生丛毛,能运动。细胞内含有菌紫素。菌绿素和类胡罗卜素等.故细菌呈红色、褐红色、绛红色或玫瑰色不一。

1 .富集培养

1)培养基成分及配制:

NH4Cl   1.0

K2HPO4    0.5

MgCl2    0.2

NaCl    0.1

酵母膏   0.1

H2O  900毫升

将上面各物溶解于水,在121 蒸汽下灭菌20 分钟。分别制备及过滤除菌下列各液:

5碳酸氢钠加50 毫升蒸馏水溶解。

② 乙醇或4%丙氨酸.

0.1N的磷酸溶液。

在基础培养基中加入碳酸氢钠溶液和1.5-2.0毫升乙醇或50毫升4%丙氨酸.用0.1N的磷酸调pH 7.0

2)富集培养:

① 最适的接种物是暴露在光下的富含有机物的淤泥。接种时,放淤泥于50 毫升的带玻璃塞的磨口瓶中.酌量放一层。

② 加满培养基,塞好塞于, 隔绝空气。

③ 置于30 的照明箱中培养,培养物放在离照明的25 瓦钨丝灯4 英寸处。

④ 观察   通常在3 天内可见到液体培养基里和淤泥曝光的一侧呈现微红色的生长物。

⑤ 从微红色处取1 毫升的富集培养物,接种于第二瓶的富集培养基中,培养2 天.

2 .分离培养

1)培养基成分及配制:从上面的富集培养基中加酵母膏至0.2%,及1.5-2.0琼脂(但碳酸氢钠应改为2 ),制法同上。

另取Na2S·9H2O   1 ,加水10 毫升,于121 蒸汽下灭菌15分钟,在调pH 之前将此液加到分离培养基中,分装,灭菌后制成平板或柱状培养基。

2)接种:取富集培养物于分离平板培养基上划线或涂布接种.或用摇管法于柱状培养基中分离.后者由于硫化钠在培养基深处把氧气迅速消耗,很快就形成厌氧条件。如用前一种分离法,可用焦性没食子酸和碳酸钠造成厌氧条件.或于其他的缺氧条件下培养

挑选具有此类细菌特征的菌落.作穿刺接种,管口塞紧后封蜡,培养,备用。

 

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