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家用微波炉用于培养基灭菌的探讨



录入时间:2010-9-6 14:08:07 来源:中国民康医学

目前, 我室对培养基的灭菌均采用高压蒸气灭菌法,此方法最为有效,但灭菌时间较长,不适合一些实验室应急品的快速消毒灭菌,同时若操作不当也易造成灭菌不彻底。近年来, 微波灭菌由于其具有灭菌效率高,速度快,处理后无污染等优点而日益受到重视。为了尝试用微波灭菌来替代传统的高压灭菌,我们选用家用微波炉用于我室常用培养基的灭菌, 效果较为满意,现将实验过程总结如下。 
 
1 方法
1.1实验材料 ①菌种 : 大肠杆菌 ATCC  25922, 金黄色葡萄球菌ATCC  25923 ( 由太和医院检验科细菌室提供) ,枯草芽孢杆菌( 由我院病原学实验室提供,进行了菌种鉴定) 。②培养基制备: 按处方配制液体培养基 ,营养琼脂( 北京奥博星生物技术有限责任公司) 培养基各5瓶, 每瓶2 0 0 m l , 盛于 3 0 0ml 锥形瓶中, 然后逐瓶放入微波炉托盘中央 ,照射至预定时间取出适量 。 
1.2 培养 液基倾注试管,固基倾注平板,37℃培养 1—7天逐日观察结果。 
1.3  接种  将微波灭菌后的培养基分别接种大肠杆菌ATCC   25922 ,金黄色葡萄球菌 ATCC   25923和枯草芽孢杆菌 , 培养 l 8—2 4 h观察其菌落特征。 
1.4 实验仪器 微波炉( WD 9 0 0 B型格兰仕微波炉, 9 0 0 W,2450 MH Z, 顺德市格兰仕微波炉电器有限公司) ; 电热恒温培养箱( H H W2 1 —6 0 0型,湖北黄石医疗器械厂) 。 
2 结 果
2.1 对经微波灭菌的培养基经 3 7℃恒温培养箱培养数 日后观察, 见表 1 。 
 
 
 
表1  微波灭菌的两种培养基经37℃恒温培养1-7天观察
培养基种类
微波时间(min)
37℃恒温培养箱培养时间
1天
2天
3天
4天
5天
6天
7天
营养琼脂培养基
1
1个菌落生长
 
 
菌落增多
 
 
 
2
 
 
1个菌落生长
 
 
 
3
 
 
1个菌落生长
 
 
 
4
 
 
 
 
5
 
 
 
 
液体培养基
1
有菌生长
 
 
 
 
 
 
2
 
 
 
 
 
3
 
 
 
 
 
4
 
 
 
 
 
5
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2.2 质量检测  分别接种不同菌株在两种培养基上的形态观察,见表2 。 
表 2 接种在两种培养基上的不同菌株的形态观察
菌株
营养琼脂培养基
液体培养基
大肠杆菌ATCC 25922
菌落圆形,直径2-3mm,边缘整齐,灰白色
均匀浑浊生长
葡萄球菌ATCC 29523
菌落圆形,直径2mm,边缘整齐,金黄色
均匀浑浊生长
枯草芽孢杆菌
扁平,灰色,不透明,干燥,皱纹,边缘不整齐的大菌落
在液体表面形成灰白色膜状生长
 
3 讨论
①营养琼脂培养基在微波作用下 5 m i n可达到灭菌效果 。  ②液体培养基在微波作用下2   mi n即可达到灭菌效果。③在一定条件下 , 干燥状态对杀菌速度影响大;同等条件下 , 含水量多易灭菌。 
④实验结果表明: 用微波炉消毒灭菌可以缩短灭菌时间, 而不影响培养基的营养成分, 此种方法安全可靠,灭菌好。 
⑤有报道 :微波可以杀灭各种微生物,不仅可以杀灭细菌繁殖体,也可以杀灭真菌、病毒和细菌芽孢。由于一般病原微生物的细胞液吸收微波的能力强于周围其它物质,因此微波能在 1 — 2 m i n内有效杀死致病细菌。在微波炉中温度达7 0℃以上就能杀死一般细菌。 
 
4 微波灭菌原理
微波炉产生的微波频率为 2450 MHZ,是消毒常用的微波之一。具有升温快,杀菌力强, 消毒时间短的特点,但其穿透能力较弱,适宜于小件或厚度不大的物品的消毒灭菌 。有试验证明其杀菌机理除有热效应外,还具有某些非热效应,是热效应和非热效应综合作用的结果 。有人认为,非热效应是因电磁场改变了细胞膜附近的离子分布和细胞膜的通透性, 从而改变细胞的代谢之故。有人认为,当微波照射时,高分散相的蛋白质特别是酶分子以及氨基酸、肽等可选择性的吸收微波能量,从而改变其分子结构或个别部分的结构,致使生化反应发生改变等。关于微波的生物学作用机制至今尚无明确的一致解释, 有待进一步探讨。
大量的研究报道显示 : 微波是实现安全,可靠,高效灭菌的一种方法; 但微波对不同菌种的灭菌, 还需通过实验具体的灭菌条件。应用微波炉时,要尽量创造有利条件, 以达到家庭, 实验室快速灭菌的要求。 
 

 

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