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基因重组——真核微生物基因重组



录入时间:2010-9-1 9:20:18 来源:青岛海博

 在真核微生物中,基因重组主要有有性杂交、准性杂交、原生质体融合和转化等形式。
(一)有性杂交
    杂交是在细胞水平上发生的一种遗传重组方式。有性杂交指性细胞间的接合和随之生的染色体重组,并产生新的遗传型后代的一种育种技术。凡能产生有性孢子的酵母菌或霉菌,原则都可应用与高等动植物杂交相似的有性杂交方法进行育种。
(二)准性杂交( parasexual hybridization )
    有一类不产生有性孢子的丝状真菌,不经过减数裂就能导致基因重组的生殖过程称为准性生殖。 1953 年 Pontecorvo 等在研究构巢曲霉时首先发现了准性生殖现象。
(一)准性生殖的 3 个阶段
1 .异核体 (heterocaryon) 形成
    用 2 个不同营养缺陷型突变株的混合孢子,大量接种到基本培养基表面,可得到少量原养型菌落,在这些菌落中的某一条菌丝或一个细胞内若同时具有两种或两种以上基因型的细胞核,则称为异核体。这种现象称为异核现象。异核体在遗传上可应用于霉菌的杂交育种、测定菌株的突变为等位基因或非等位基因突变。
2 .核融合 (nuclear fusion) 和杂合二倍体的形成
    核融合是指异核体内 2 个不同基因型的单倍体细胞核在繁殖过程中融合成 1 个二倍体细胞核的过程。这个机会是极少的。( 10 -5 --10 -7 的概率)。杂合二倍体是指细胞核中含有 2 个不同来源染色体组的菌体细胞。
3 .体细胞交换 (somatic crossing-over) 与单倍体化
    杂合二倍体极不稳定,在其进行有丝分裂过程中,有极少数细胞,其同源染色体的两条染色单体之间发生互换,在体细胞分裂时,产生 1 个或 1 个以上标记的纯合现象,从而形成具有新性状的单倍体杂合子。所谓单倍体化是指在一系列有丝分裂过程中一再发生的个别染色体减半,直至最后形成单倍体的过程。其单倍体化不是一次有丝分裂的结果,而是经过若干次有丝分裂过程,每次分裂都有可能从二倍体核中失去部分染色体,最后才回复成单倍体核。分裂次数取决于染色体数目,数目越多则其单倍体化所需要的分裂次数也越多。
(二)准性生殖的应用
(三)准性生殖与有性生殖的较
项目
准性生殖
有性生殖
参与接合的亲本细胞
形态相同的体细胞
形态或生理上有分化的性细胞
独立生活的异核阶段
接合后双倍体的细胞形态
与单倍体基本相同
与单倍体明显不同
双倍体变为单倍体的途径
通过有丝分裂
通过减数分裂
接合发生的概率
偶然发生,概率低
正常出现,概率高

 

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