（十五）选择性抑菌剂

在一些培养基中，常需加入某种特殊抑制剂，以抑制某些细菌的生长，利于检出菌的生长和鉴别。一般称为选择性抑菌剂。

常用的选择性抑菌剂有胆盐、蔷薇酸、亚硫酸铋、煌绿、孔雀绿、亚硒酸钠、四硫磺酸钠、叠氮化钠、结晶紫等。胆盐、蔷薇酸、亚硫酸铋和煌绿都有抑制革兰氏阳性菌的作用，叠氮化钠还可抑制变形杆菌的生长。

各种不同革兰氏阴性菌对同一染料或药品的敏感度也不相同，利用该特性，可以有目的地抑制不需要的细菌，使病原菌更易被分离出来。

煌绿和孔雀绿能抑制大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌的生长、而适于分离其它沙门氏菌属，亚硒酸钠能抑制大肠杆菌、可用于分禽伤寒杆菌和其它沙门氏菌属。四硫磺酸钠可抑制大肠杆菌，而伤寒杆菌和副伤寒杆菌仍可生长。

兹摘要介绍如下：

1.胆盐

胆盐是一种胆酸的钠盐，是胆酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸的氨基，通过酰胺键结合而成。脱氧胆酸钠是在3 和12 碳上带有羟基的二羟基化合物，它比三羟酸，即胆酸或牛磺胆酸活性更大，缺少羟基的胆酸没有活牲。脱氧胆酸钠在水溶液中呈弱碱性，为无色。

胆盐可降低培养基与菌膜界面上的表面张力、并使胞膜紊乱、加速天然的自溶过程。因脱氧胆酸钠或牛磺胆酸钠溶解活力最大、故常用于胆汁溶解试验中。胆盐遇酸生成沉淀、使菌落的色素不致外散、更有利于鉴别。

市售胆盐是中性，脱水胆盐效果与新鲜胆汁相同、可代替鲜胆汁，避免引起培养基混浊，且可灭菌、浓度易控制。常用培养基中浓度为1.5g／L 。

商售混合胆盐中不同胆酸的相对百分数如表2-5所示。

Downie氏等把胆酸分成两类：( 1 ）非结合酸，其不同类型只是它们的化学结构不同，( 2 ）络胆酸，它是脱氧胆酸的加成化合物，根据增加物的类型不同而有差异。

牛磺酸是由氨基酸、半胱氨酸衍生而来，它与胆酸形成的结合物称为牛磺胆酸。胆酸与甘氨酸结合称为甘胆酸。脱氧胆酸是二羟酸，胆酸和牛磺胆酸是三羟酸，所有的胆汁酸都有一个共同的基本核，即环戊烷多烃菲。牛磺胆酸、甘胆酸、脱氧胆酸等对革兰氏阳性菌有强大的抑制作用，对革兰氏阴性菌仅有轻度的抑制作用。脂肪酸也有抑菌作用。

胆汁的固形成分约占总量的13%，其中胆酸约为5-6%，粘蛋白4%，类脂2%，胆固醇0.04%，无机物0.8%，胆汁色素0.2%。

胆汁具有降低表面张力的作用，使细菌的细胞膜损坏，原生质中一部分内容漏出，或促使菌体的崩解，但肠系细菌因在肠道内长期与胆汁接触．由于适应作用，所以对它有一定的抗力。牛胆汁透析物中、含有3.25μg ／ml的色氨酸、可能有增菌作用。胆汁中的粘蛋白可作为细菌营养物、并对胆酸和脂肪酸的抑菌力起一定的中和作用。常用量为10-20g/L，1g干燥粉约等于10-12g鲜胆汁。

2 ．涤波

为商品名称、系石油副产品。其主要成分为十二烷基硫酸钠。具有抑制革兰氏阳性细菌发育的作用，与胆酸盐作用相似。由于其对革兰氏阴性细菌的作用比胆酸盐弱，且价格较便宜、因而近年来多用于培养基中。应注意，其不同批号产品所含成分常有差异，故在使用前应先进行予试。

3 ．苯乙醇

对革兰氏阴性细菌有抑制作用。常在琼脂培养基中加入0.25%量，以制备革兰氏阳性球菌类的选择性培养基。

4．叠氮化钠

能抑制革兰氏阴性细菌的生长发育，特别对变形杆菌抑制效能显著，对革兰氏阳性细菌则无作用。常用于奈氏粪链球菌的选择性分离培养，用量一般为0.05%；用于葡萄球菌则为0.02%。

5.碲酸盐或亚碲酸盐

亦为革兰氏阳性细菌分离培养的一种选择性抑菌剂，常常用于葡萄球菌（凝固酶阳性）和白喉杆菌分离培养基。在革兰氏阴性细菌中，由于弧菌对其抵抗力较强，故也用于霍乱弧菌，副溶血性弧菌的分离培养基。

8 ．水化氯醛

能抑制变形杆菌的蔓延生长而不影响其他革兰氏阴性杆菌的生长，并且在含血培养基中不发生溶血作用，所以不影响细菌溶血性能的鉴定。

7.煌绿和孔雀绿

能抑制益兰氏阳性菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌的生长，故常用于分离其它沙门氏菌的培养基。应注意，商售品各批的色素含量常有差异，故在使用前必须要用标准菌株进行测试实际使用量，不可拘守配方规定。

8.亚硒酸盐

能抑制大肠杆菌、可用于分离伤寒杆菌和其它沙门氏菌培养基。

9.四硫磺酸盐

由硫代硫酸钠和碘经氧化生成的四硫碳酸钠，有抑制大肠杆菌作用、而对包括伤寒杆菌在内的沙门氏菌均无抑制作用。因沙门氏菌具有四硫磺酸酶能分解四硫磺酸钠，而大肠杆菌等没有这种酶所以生长被抑制。

四硫磺酸盐对热颇为敏感、极易分解为硫酸，亚琉酸和硫。故培养基加碘后不能加热。

10．各种抗生素和抗菌药物

近年来国外一些新的选择性培养基，多采用抗生素为选择性抑菌剂以提高培养基的选择效能，常见的有青霉素G、链霉素、多粘菌素B、头孢霉素、放线菌酮、万古霉素、两性霉素、卡那霉素、杆菌肽、新霉素，新生霉素，短杆菌素，粘杆菌素 ,制霉菌素 ，甲氧苄氨嘧啶、磺胺嘧啶等。

11.吐温

为耐热的水溶性长链脂肪酸的酯类，系山梨醇的聚氧乙烯衍生物，即：

吐温20   聚氧乙烯月桂酸山梨醇脂

吐温40   聚氧乙烯棕榈酸山梨醇脂

吐温60   聚氧乙烯硬脂酸山梨醇脂

吐温80   聚氧乙烯油酸山梨醇脂

为一种表面活性剂，加于培养基中可降低细菌体周围与培养基接触面之间的表面张力。使外围营养物质更快地进入菌细胞内，因而促进细菌较快的生长和其它的活动。并可用为分枝杆菌属各菌种鉴定的试剂，即吐温水解试验。

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