光线与辐射对细菌的影响，随其性质、强度、波长、作用的距离而不同，但必须被细菌吸收，才能影响细菌的代谢，导致刺激生长，引起变异、抑制生长或使其死亡等不同的结果。
1 ．可见光线
肉眼可见的光线在红光与紫光之间，波长约为4000-8000Å 。可见光线对细菌一般无多大影响。红外线的灭菌作用，是由于高热的结果，与光线辐射作用无关。将某些染料如美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等加入培养基中，则可见光线的杀菌作用增强，即对原生动物、毒素、酶、病毒和噬菌体等都有灭活作用，这称为光感作用。革兰氏阳性细菌的光感作用较阴性细菌的敏感。伊红、汞溴红和美蓝仅作用于革兰氏阳性细菌；而沙黄则仅作用于革兰氏阴性细菌。光感作用在有氧的情况下才呈现，而在真空、氮中或加入还原剂如半胱氨酸等溶液中，则不呈现光感作用。
2.日光
日光是天然的有效杀菌因素。在日光的直接照射下许多细菌容易死亡，但其效力可因地因时而异。烟尘笼草的空气、玻璃、有机物等都能减弱日光的杀菌力。日光杀菌作用的主要因素是紫外线。日光杀菌的快慢，随光线的强弱、空气中水分的多少、温度的高低、细菌的环境及其抵抗力而各有不同。日光的杀菌作用只在有空气时才有效：即氧是日光杀菌的必要因素。
3 ．紫外线
紫外线中波长为2000-3000埃者具有杀菌作用，2650-2660埃 者杀菌力最强。
各种细菌对不同波长的紫外线敏感度可有所差异。杀死所需的紫外线照射量也各不相同。革兰氏阴性无芽孢杆菌最易被紫外线杀死。杀死葡萄球菌和链球菌则需加大5-10 倍照射量；病毒的抵抗力更强。芽孢比繁殖体的抵抗力可强数倍。小剂量的紫外线有促进细菌生长的作用，所以在紫外线照射部位的外围细菌有时反而生长旺盛。
紫外线照射过的培养基，不适于细菌的生长，这可能是由于产生过氧化氢所致。紫外线照射糖液或含糖培养基后，能改变其pH ，使偏于酸性。紫外线还可使补体灭活，细菌毒素失去毒性，并可引起细菌变异。
直射的紫外线对组织有刺激作用。照射30 秒钟即可出现眼睛的刺激症状，在距离无遮盖的，强度为30瓦的杀菌灯
紫外线的杀菌原理比较复杂．还不十分清楚，一般多认为是由于引起菌体内核酸和蛋白质变性所致。
紫外线一般常用于空气消毒。由于其穿透力不强，即使薄玻璃也能吸收大部分紫外线，阻碍其通过，所以只能用于物品表面及空气的消毒。此外也可用于一些不能用热力或化学灭菌剂消毒的器械或物品。
4.X 射线 X 线的照射可以引起细菌的死亡或变异。在10
5 ．放射性同位素 放射性同位素放出的射线通常有三种，即α、β、γ射线。α射线是带正电荷的氦原子核具有很强的电离作用，但穿透力很弱，薄玻璃、铝片甚至纸片都能将其阻挡。β射线就是由电子组成的带负电荷的射线，电离作用不太强，穿透力比α射线大。γ射线是一种电磁波，性质接近X 射线，波长稍短，电离作用弱，穿透力比前二者大。由于前二者电离放射作用较强，故具有抑菌或杀菌作用。而γ射线的电离放射作用较弱，仅有抑菌作用或很弱的杀菌作用。
各种细菌对放射线的敏感性均有显著的差异。
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