[用途]

测定细菌水解马尿酸钠能力。该培养基常用方法有2 种

(1)三氯化铁法

[配法]

马尿酸钠1g ，肉汤100 ml。

三氯化铁试剂：三氯化铁12g溶于2 ％盐酸100ml中。

将马尿酸钠和肉汤（pH 7.8 ）加热溶解后分装于试管中，每管4ml，121 ℃ 灭菌15 min 。冷却后用玻璃蜡笔记录培养基液面，置冰箱中备用。

[用法]

取纯菌接种培养基，35 ℃ 培养48h ，观察培养基液面。如液面下降时以蒸馏水补充之。离心沉淀，取上清液0.8ml加入三氯化铁试剂0.2ml，立即混匀。经10-30 min观察结果，出现稳定沉淀物为阳性。反之为阴性。

2 茚三酮法：

甘氨酸在茚三酮的作用下，经氧化脱氨基反应，生成氨、二氧化碳和相应的醛。而茚三酮则生成还原型茚三酮。反应过程中形成的氨和还原型茚三酮，与残留的茚三酮起反应，形成紫色化合物。

8.触酶试验培养基

[用途]

用于链球菌及革兰阳性球菌初步分群。

[用法]

（1）玻片法：取18-24h 培养物，置于清洁玻片上，加1 滴3 ％过氧化氢溶液，如产生大量气泡为阳性。

(2)试管法：取琼脂斜面（不含血液的）18-24h 培养物，接种于试管内，加入3 ％过氧化氢溶液1ml，如产生大量气泡为阳性。

[质量控制]

金黄色葡萄球菌ATCC 25923 阳性；无乳链球菌ATCC 13813 阴性。

9. β-半乳糖普（ONPG ）试验培养基

［用途］

用于乳糖迟缓发酵菌和不发酵菌的鉴别。

[配法]

试剂甲为0.01mol / L pH7.0

磷酸氢二钠缓冲液100ml；

试剂乙为蛋白胨3g ，氯化钠1.5g，蒸馏水300ml，pH 7.0。

将试剂甲、乙分别置121 ℃ 灭菌15min ，冷至40-50 ℃ 左右，试剂乙加入ONPG 0.6g ，置56 ℃ 水浴中加热溶解，无菌过滤，将过滤液与试剂甲液合并分装试管，每管2ml，做无菌试验后备用。

[用法]

将标本接种培养基，35 ℃ 培养4-18h 。培养基呈黄色者为阳性，不变黄色为阴性。

[质量控制]

大肠埃希菌ATCC 25922 阳性；普通变形杆菌ATCC 13315 阴性。

注：ONPG 溶液不稳定，若培养基呈黄色即不可使用。

10 苯丙氨酸试验培养基

[用途］

苯丙氨酸脱氨酶是变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属所特有，可与肠杆菌科及其它细菌区别。也有助于种的鉴别，如苯丙酮酸莫拉菌呈阳性，其它莫拉菌属的菌种呈阴性、

[配法]

DL-苯丙氨酸2g ，氯化钠5g，酵母浸膏3g ，磷酸氢二钠1g ，琼脂12g ,蒸馏水1L 。

除琼脂外其它的成分加热溶解，调pH 至7.3，再加入琼脂溶解后分装每管约4ml高压灭菌121 ℃ 15min置成斜面，凝固后4 ℃ 冰箱保存，备用。

［用法］

取18-24h 培养物，大量接种于培养基，35 ℃ 孵育18-24h 后在培养试管中加入100g / L 三氯化铁试剂4-5 滴，转动使试剂布满斜面，阳性者呈绿色，阴性者呈黄色。

[质量控制]

普通变形杆菌ATCC 13315 阳性；大肠埃希菌ATCC 25922 阴性

[保存]

置4 ℃ 冰箱保存，2 周内用完。试剂可保存3 月。

注：

（1）苯丙氨酸试验须在加入三氯化铁试剂后立即观察，因绿色易很快褪去，无论阳性或阴性结果都必须在5min内作出判断

( 2 ）将斜面试管转动，让三氯化铁试剂流动，可使反应较决颜色亦较明显。

11 淀粉培养基

［用途］

用于链球菌和白喉棒状杆菌的分型鉴定

[配法]

蛋白胨5g，牛肉浸膏3g，琼脂（肉场培养基中不加）20g ，氯化钠5g，蒸馏水1L ，可溶性淀粉20g ，小牛血清50ml。

准确称量前4 种成分加入500ml蒸馏水，缓漫加热溶解制成基础培养基。再将20g淀粉溶于250ml蒸馏水中。天然淀粉微溶于水，并不耐热，切勿煮沸过度，防止淀粉水解。将上述两种溶液合并混匀，补足水至1L 调pH 至7.2 , 121 ℃ 灭菌15min ，倾注平板备用。

附：Lugol碘液配制

（1）贮存液：将碘化钾10g 溶于100ml蒸馏水中，缓漫加入5g结晶碘不断研磨振荡直至溶解，装入棕色瓶中。

（2）应用液：用蒸馏水将贮存液1 : 5 稀释，分装于棕色瓶中，每隔1 月需新配制1 次，溶液呈深黄色

[用法]

取18-24h 纯培养物接种琼脂平板，一般可接种几个培养物。置35 ℃ 孵育。18-24h 或者直至出现足够的生长物。将Lugol碘液直接加到孵育过的平板上，培养基呈深蓝色，菌落周围有透明圈为阳性，菌落周围无透明圈为阴性。 [质量控制]

无乳链球菌阳性；产气肠杆菌阴性

［保存］

置4 ℃ 冰箱保存，2 周内用完。碘液易于褪色，使用前应进行质量控制。

注：

（1）倾注好的淀粉琼脂平板不直放冰箱中保存，培养基会变为不透明，可影响结果判断。建议将培养基置螺旋帽的试管中保存，临用时加热溶解倾注平板，冷却后使用

（2）淀粉酶在pH 低于4.5 时不稳定

（3）配制时，避免过热，否则淀粉颗粒自动分解导致假阳性结果

（4）培养时间应不少于36h

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