采用培养平板计数法要求操作熟练、准确,否则难以得到正确的结果:
1)样品充分混匀;
2)每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液;
3)同一稀释度三个以上重复,取平均值;
4)每个平板上的菌落数目合适,便于准确计数;
一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示,而不是直接表示为细胞数。
The most probable number method(液体稀释法)
1)未知样品进行十倍稀释;
2)取三个连续的稀释度平行接种多支试管并培养;
3)长菌的为阳性,未长菌的为阴性;
4)查表推算出样品中的微生物数目(统计学原理) ;
迟缓期的特点:
1)细胞形态变大或增长,例如巨大芽孢杆菌,在迟缓期末,细胞的平均长度比刚接种时长 6倍。一般来说处于迟缓期的细菌细胞体积最大;
2)细胞内 RNA,尤其是 rRNA含量增高,合成代谢活跃,核糖体、酶类和 ATP的合成加快,易产生诱导酶。
3) 对外界不良条件反应敏感。
以上特征说明细胞处于活跃生长中,只是分裂迟缓。在此阶段后期,少数细胞开始分裂,曲线略有上升。
对数期到稳定期的转变是细胞重要的分化调节阶段:
1)开始储存糖原等内含物;
2)形成芽孢或建立自然感受态(芽孢杆菌);
3)发酵过程积累代谢产物的重要阶段;某些放线菌抗生素的大量形成也在此时期
衰亡期特点:
1)细菌代谢活性降低;
2)细菌衰老并出现自溶;
3)产生或释放出一些产物;如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。
4)菌体细胞呈现多种形态,有时产生畸形,细胞大小悬殊;有些革兰氏染色反应阳性菌此时会变成阴性反应
恒浊连续发酵与单批发酵相比的优点:
1) 缩短发酵周期,提高设备利用率;
2) 便于自动控制;
3) 降低动力消耗及体力劳动强度;
4) 产品质量较稳定;
磺胺是叶酸组成部分对氨基苯甲酸的结构类似物,磺胺的抑菌作用是因为很多细菌需要自己合成叶酸而生长。磺胺对人体细胞无毒性,因为人缺乏从对氨基苯甲酸合成叶酸的相关酶二氢叶酸合成酶,不能用外界提供的对氨基苯甲酸自行合成叶酸,而必须直接利用叶酸为生长因子进行生长。
青霉素 β内酰胺环结构与 D丙氨酸末端结构相似,从而能占据 D丙氨酸的位置与转肽酶结合,并将酶灭活,肽链之间无法彼此连接,抑制了细胞壁的合成。
湿热比干热灭菌更好:
1)更易于传递热量;
2)更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构;
湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件:
1) 多数细菌和真菌的营养细胞:在 60℃左右处理 510分钟;
2)酵母菌和真菌的孢子:用 80℃以上温度处理;
3)细菌的芽孢:121℃处理 15分钟以上
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