1. 糖、醇发酵培养基
(1)成分
基础液
蛋白胨
氯化钠
0.5%酸性品红指示液 10ml (或0.4%溴麝香草酚蓝指示液)( 6 ml )
水 1000ml
糖、醇类 每100ml 基础液内各加
(2)制法
取蛋白胨和氯化钠加入水中,微温使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3±0.1,加入指示液混匀。每100ml 分别加人l 种糖、醇或糖苷,混匀后分装于小管中(若需观察产气反应,在小管内另放置杜汉小倒管)。于
常用的糖、醇或糖苷:阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、蕈糖、纤维二糖、蜜二搪、棉子糖、松三糖、菊糖、糊精、淀粉、甘露醇、卫矛醇、山梨醇、肌醇、甘油、水杨素、七叶苷等。
(3)用途
鉴别各种细菌对糖类的发酵生化反应,发酵者产酸,培养基变色(加酸性品红者由无色至红色或再至黄色;加溴麝香草酚蓝者由蓝色至黄色);产气时,小倒管内有小气泡。
2 .七叶苷培养基
(1)成分
蛋白胨
七叶苷
磷酸氢二钾
水 1000ml
枸橼酸铁
除七叶苷外,取上述成分混合,微温使溶解,加入七叶苷混匀,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1,分装于试管中,
( 3 )用途 用于鉴别细菌对七叶苷的水解试验,产生棕黑色沉淀为阳性反应。
3 .磷酸盐葡萄糖胨水培养基
( 1 )成分
蛋白胨
葡萄糖
磷酸氢二钾
水 1000ml
( 2 )制法 取上述成分混合,微温使溶解,调pH值使灭菌后为7.3 士0.1 ,分装于小试管中,
( 3 )用途 用于鉴别细菌的甲基红试验(M-R 反应)和乙酰甲基甲醇试验(V-P 反应)。
1甲基红试验(M-R 反应)取可疑菌落或斜面培养物,接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中,置
2乙酰甲基甲醇生成试验(V-P 反应) 取可疑菌落或斜面培养物,接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中,置
4 .蛋白胨水培养基
( l )成分
蛋白胨
水 l000ml
氯化钠
( 2 )制法 取上述成分混合,微温使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,分装于小试管,
( 3 )用途 用于鉴别细菌能否分解色氨酸而产生靛基质的生化反应。
① 靛基质试验取可疑菌落或斜面培养物,接种于蛋白胨水培养基中,置
② 靛基质试液 称取对二甲氨基苯甲醛
5 .三糖铁琼脂培养基
( l )成分
蛋白胨
硫酸亚铁
牛肉浸出粉
硫代硫酸钠
乳糖
002%酚磺酞指示液 12.5ml
蔗糖
琼脂 12~15g
葡萄糖
水 1000ml
氯化钠
( 2 )制法 除乳糖、蔗糖、葡萄糖、指示液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀后,再加入其余成分,摇匀,分装,
( 3 )用途 用于初步鉴别肠杆菌科细菌对糖类的发酵反应和产生硫化氢试验。
方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,做高层穿刺和斜面划线接种,置
6.克氏双糖铁琼脂培养基
( l )成分
蛋白胨
枸橼酸铁
牛肉浸粉
硫代硫酸钠
酵母浸粉
002 %酚磺酞指示液 12 .5ml
乳糖
琼脂 12~15g
葡萄糖
水 1000ml
氯化钠
( 3 )用途 用于初步鉴别肠杆菌科细菌对糖类的发酵反应和产生硫化氢试验。
方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,做高层穿刺和斜面划线接种,置
7.脲(尿素)培养基
( 1 )成分
蛋白胨
0.2 %酚红溶液 6ml
葡萄糖
20%无菌脲溶液 l00ml
氯化钠
水 1000ml
磷酸氢二钾
( 3 )用途 用于鉴别细菌的尿素酶反应。
方法和结果观察:取可疑菌落或少量斜面培养物接种于培养基内,置
8 .苯丙氨酸琼脂培养基
( 1 )成分
磷酸氢二钠
氯化钠
酵母浸膏
琼脂 12 ~
DL-苯丙氨酸(DL - phenylalanine )
水 1000ml
( 2 )制法 除琼脂外,取各成分溶于水,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,再加入琼脂,加热溶胀,分装试管,
( 3 )用途用于鉴别细菌的苯丙氨酸脱氨酶试验(也称苯丙酮酸试验)。
方法和结果观察:取斜面培养物,大量接种于苯丙氨酸琼脂斜面,置
9.氨基酸脱羧酶试验培养基
( 1 )成分
① 基础液
蛋白胨
1.6 %溴甲酚紫指示液 lml
酵母浸出粉
水 1000ml
葡萄糖
② 氨基酸
L-赖氨酸
L-鸟氨酸
L-精氨酸
( 2 )制法 先配制基础液备用;将溶解后的3 种氨基酸,各分别加至100ml 基础液(使氨基酸的终浓度为0.5 % ) ,混匀,调pH 值使灭菌后为6.8 。分装于小试管中,每管2.5ml 并滴加1 层液体石蜡;同时分装一部分基础液于小试管,作为对照培养基,均置
( 3 )用途 用于鉴别细菌的脱羧酶、双水解酶试验。
方法和结果观察:取疑似菌斜面培养物分别接种于上述3 种培养基及基础液对照培养基,置
10.明胶培养基
( l )成分
蛋白胨
明胶
牛肉浸出粉
水 1000ml
( 2 )制法 取上述成分加人水中,浸泡约20 分钟,加热溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,分装于小试管中,
( 3 )用途 用于细菌的明胶液化试验。
方法和结果观察:取少量待检菌斜面培养物穿刺接种于明胶培养基内,置
11 .丙二酸钠培养基
( 1 )成分
酵母浸出粉
磷酸二氢钾
氯化钠
丙二酸钠
葡萄糖
0.4 %溴麝香草酚蓝指示液 6ml
硫酸铵
水 l000ml
磷酸氢二钾
( 3 )用途 用于鉴别细菌能否利用丙二酸钠作为碳源而生长繁殖。
方法和结果观察:取斜面或肉汤培养物接种于丙二酸钠培养基内,置
12 .枸橼酸盐培养基
( 1 )成分
氯化钠
枸橼酸钠(无水)
硫酸镁
1.0 %溴麝香草酚蓝指示液 10ml
磷酸氢二钾
琼脂
磷酸二氢铵
水 l000ml
( 2 )制法 除指示液和琼脂外,取上述成分,混合,微温使溶解,调pH 值使灭菌后为6.9 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀,然后加入指示液,混匀,分装于小试管中,
(3 )用途 用于鉴别细菌能否利用枸橼酸盐作为碳源和氮源而生长繁殖。
方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,接种于枸橼酸盐培养基的斜面上,一般培养48 ~ 72 小时,凡能在培养基斜面生长出菌落,培养基即由绿色变成蓝色者为阳性反应;无菌落生长,培养基仍绿色者为阴性反应,阴性反应者应继续培养观察至7 天。
13.硝酸盐胨水培养基
(1)成分
蛋白胨
硝酸钾
酵母浸出粉
水 1000ml
( 2 )制法 取上述成分,加热溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,分装于小试管中,
( 3 )用途 用于鉴别细菌能否还原硝酸盐成亚硝酸盐。
方法和结果观察:取待检菌培养物接种于硝酸盐胨水培养基中,置
甲液:称取α-萘胺
乙液:称取磺胺酸(对氨基苯磺酸)
14 .石蕊牛奶培养基
( l )成分
脱脂奶粉
水 100ml
10 %石蕊溶液 0.65ml
( 2 )制法 取上述成分混匀后,分装于小试管中.
( 3 )用途 用于检查细菌对牛奶的凝固和发酵作用。
15.半固体营养琼脂培养基
( l )成分
蛋白胨
琼脂
牛肉浸出粉
水 l000ml
氯化钠
( 3 )用途 用于观察细菌的动力,也可用于一般菌种的保存。
细菌动力检查:取疑似菌斜面培养物穿刺接种于半固体营养琼脂培养基中,置
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