银河澳门官网入口,银河集团网址登录



银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->农药兽药残留检测方法和标准->农药残留——丁嘧脲检测方法

农药残留——丁嘧脲检测方法



录入时间:2010-4-19 14:00:37 来源:青岛海博

1.分析目标化合物

    丁嘧脲, 丁嘧脲尿素体, 丁嘧脲甲烷亚氨基酰胺体

2.仪器设备

    带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的气相色谱仪、带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪、气相色谱-质谱仪和液相色谱-质谱仪。

3.试剂
 
    L-半胱氨酸盐酸盐溶液
   碳酸钾溶液
   乙腈
   2%二甘醇丙酮溶液
   乙醚
   正己烷

    0.1mol/L 乙酸缓冲溶液(pH5.0):在0.1mol/L乙酸钠溶液中加入0.1mol/L乙酸溶液,调整pH5.0。
    丁嘧脲标准溶液:在10.0mg丁嘧脲中加入乙腈至200mL,吸取其10mL,加入乙腈:水(9:1)混合溶液至100mL。

4.标准品

    丁嘧脲标准品:含丁嘧脲99%以上,熔点为145℃~148℃。
    1-特丁基-3-(2,6-二异丙基-4-苯氧基苯基)尿素(以下称“尿素体”。)标准品:含尿素体97%以上,熔点为180℃~181℃。
    1-特丁基-3-(2,6-二异丙基-4-苯氧基苯基)甲烷亚氨基酰胺(以下称“甲烷亚氨基酰胺体”。)标准品 :含甲烷亚氨基酰胺体97%以上,熔点为126℃~127℃。

5.试验溶液的制备

a 丁嘧脲试验溶液
① 提取方法
(I)种子类
    将样品粉碎通过420μm的标准网筛后,称取其8.00g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入15mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和15mL 1mol/L碳酸钾溶液,放置2小时。
    加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至200mL棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(II)水果和蔬菜
    将样品搅碎后,称取其20.0g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液、10mL 1mol/L碳酸钾溶液和80mL乙腈,搅拌1分钟后,振荡30分钟,用玻璃纤维滤纸抽滤至200mL棕色三角瓶中。滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(III)茶
    样品粉碎后,称取其5.00g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和10mL 1mol/L碳酸钾溶液, 放置2小时。
加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至200mL棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其80mL,加入30mL水。
② 净化方法
(I)种子类、水果和蔬菜
    在用铝箔包裹避光的环已基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。注入10mL乙腈:水(2:3)混合溶液,弃去流出液。注入4mL乙腈,收集流出液于具刻度的棕色玻璃试管中,加入乙腈,准确至4mL,此为试验溶液。
(II)茶
    在用铝箔包裹避光的环已基甲硅烷基化硅胶小柱(2,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。注入10mL乙腈:水(2:3)混合溶液,弃去流出液。再注入15mL乙腈:水(4:1)混合溶液,收集流出液。加入15mL水。
    氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)下面连接环已基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)。注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。注入上述溶液后,弃去流出液。再注入10mL乙腈:水 (2:3) 混合溶液,弃去流出液。取下弃去氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱。环已基甲硅烷基化硅胶小柱中注入10mL乙腈:水(1:1)混合溶液,弃去流出液。注入4mL乙腈,收集流出液于具刻度的棕色玻璃试管中,加入乙腈,准确至4mL,此为试验溶液。
b 尿素体试验溶液
① 提取方法
(I)种子类
    将样品粉碎通过420μm的标准网筛后,称取其8.00g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入15mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和15mL 1mol/L碳酸钾溶液,放置2小时。
    加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(II)水果和蔬菜
    将样品搅碎后,称取其20.0g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液、10mL 1mol/L碳酸钾溶液和80 mL乙腈,搅拌1分钟后,振荡30分钟,用玻璃纤维滤纸抽滤至200mL棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角烧瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(III)茶
    样品粉碎后,称取其5.00g于300mL具塞的棕色三角烧瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和10mL 1mol/L碳酸钾溶液, 放置2小时。
加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其80mL,加入30mL水。
② 净化方法
(I)种子类
    在用铝箔包裹避光的环已基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。注入10mL乙腈:水(2:3)混合溶液,弃去流出液。注入4mL乙腈,收集流出液于具刻度的棕色玻璃试管中,加入乙腈至4mL。移取3mL溶液于棕色磨口减压浓缩器中,加入0.5mL 2%二甘醇丙酮溶液,40℃以下除去乙腈。残留物中加入2mL乙醚:正己烷(3:17)混合溶液溶解。
    硅胶小柱(避光,690mg)中注入5mL正己烷,弃去流出液。柱中注入上述溶液,弃去流出液。注入8mL乙醚:正己烷(3:17)混合溶液,弃去流出液。在此柱的下部先注入5mL正己烷,弃去流出液,连接氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg)。硅胶小柱中再注入20mL乙醚:正己烷(2:3)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去乙醚和正己烷,残留物中加入乙腈溶解,准确至2mL,做为试验溶液。试验溶液制备后必须立即测定。
(II)水果和蔬菜
    环已基甲硅烷基化硅胶小柱(遮光、1,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。再注入10mL乙腈:水(2:3)混合溶液,弃去流出液。注入4mL乙腈,收集流出液于具刻度的棕色玻璃试管中,加入乙腈至4mL。移取2mL溶液于棕色磨口减压浓缩器中,加入0.5mL2%二甘醇丙酮溶液,40℃以下除去乙腈。残留物中加入2mL乙醚:正己烷(3:17)混合溶液溶解。
    硅胶小柱(避光690mg)中注入5mL正己烷,弃去流出液。在柱中注入上述溶液,弃去流出液,注入8mL乙醚:正己烷(3:17)混合液,弃去流出液。此柱的下部连接预先注入5mL正己烷,弃去流出液的氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg)。硅胶小柱中再注入20mL乙醚:正己烷(2:3)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去乙醚和正己烷。残留物中加入乙腈溶解,准确至2mL,此为试验溶液。试验溶液制备后必须立即测定。
(III)茶
     环已基甲硅烷基化硅胶小柱(遮光、2,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入10mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。注入10mL乙腈:水(2:3)混合液,弃去流出液。再注入15mL乙腈:水(4:1)混合液,收集流出液,加入15mL水。
     氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(遮光,1,000mg)下面连接环已基甲硅烷基化硅胶小柱(遮光1,000mg)。注入乙腈10mL,弃去流出液。再注入水10mL,弃去流出液。柱中注入上述溶液后,弃去流出液。注入10mL乙腈:水(2:3) 混合溶液,弃去流出液后,取下弃去氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱。环已基甲硅烷基化硅胶小柱中注入10mL乙腈:水(1:1)混合溶液,弃去流出液。再注入4mL乙腈,收集流出液于具刻度的棕色玻璃试管中,加入乙腈,准确至4mL。移取2mL溶液于棕色磨口减压浓缩器中,加入0.5mL 2%二甘醇丙酮溶液,40℃以下除去乙腈。残留物中加入2mL乙醚:正己烷(3:17)混合溶液溶解。
    硅胶小柱(遮光、690mg)中注入5mL正己烷,弃去流出液。柱中注入上述溶液,弃去流出液。注入8mL乙醚:正己烷(3:17)混合溶液,弃去流出液。此柱的下部连接预先注入5mL正己烷,弃去流出液的氨基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(360mg)。硅胶小柱中再注入20mL乙醚:正己烷(2:3)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去乙醚和正己烷。残留物中加入乙腈溶解,准确至2mL,此为试验溶液。试验溶液制备后必须立即测定。
c 甲烷亚氨基酰胺体试验溶液
① 提取方法
(I)种子类
    将样品粉碎通过420μm的标准网筛后,称取其8.00g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入15mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和15mL 1mol/L碳酸钾溶液,放置2小时。
    加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(II)水果和蔬菜
    将样品搅碎后,称取其20.0g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液、10mL 1mol/L碳酸钾溶液和80mL乙腈,搅拌1分钟后,振荡30分钟,用玻璃纤维滤纸抽滤至棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其100mL,加入40mL水。
(III)茶
    样品粉碎后,称取其5.00g于300mL具塞的棕色三角瓶中,加入10mL 30%L-半胱氨酸盐酸盐溶液和10mL 1mol/L碳酸钾溶液, 放置2小时。
加入80mL乙腈,振摇30分钟后,用玻璃纤维滤纸抽滤至棕色三角瓶中,滤纸上的残留物中加入30mL乙腈洗涤,合并洗液于棕色三角瓶中,移入200mL具塞棕色容量瓶中,加水至200mL。吸取其80mL,加入30mL水。
② 净化方法
    在十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(避光1,000mg)中注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入30mL水,弃去流出液。柱中注入① 提取方法所得的溶液后,弃去流出液。注入30mL水,弃去流出液。注入10mL乙腈,弃去流出液。再注入20mL乙腈:0.1mol/L乙酸缓冲溶液(pH5.0) (4:1)的混合溶液,收集流出液于100mL三角瓶中。 
    流出液中加入100mL 5%氯化钠溶液,再用50mL乙酸乙酯:正己烷(1:1)混合溶液移入200mL分液漏斗中, 用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙酸乙酯和正己烷层移入200mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯:正己烷(1:1)混合溶液,按上述同样方法操作,合并乙酸乙酯和正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯:正己烷(1:1)混合溶液洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并二洗涤液于减压浓缩器中,加入0.5mL2%二甘醇丙酮溶液,40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。残留物中加入丙酮溶解,准确至3mL,此为试验溶液。

6.操作方法

a 定性试验
① 丁嘧脲试验
    用带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪,按下列操作条件进行试验。试验结果必须与丁嘧脲标准溶液的一致。
操作条件
柱填充剂:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒度5μm,细孔径30nm)。
柱:内径6mm,长150mm不锈钢管。
柱温: 40℃
检测器:波长256nm。
流动相:乙腈:水:甲醇(2:2:1)混合溶液。调整流速使丁嘧脲约32分钟流出。
② 尿素体试验
    用带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪,按下列操作条件进行试验。试验结果必须与标准品的一致。
操作条件
柱填充剂:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒度5μm)。
柱:内径6mm,长150mm不锈钢管。
柱温: 40℃
检测器:波长235nm。
流动相:乙腈:水:甲醇(2:2:1)混合溶液。调整流速使尿素体约20分钟流出。
③甲烷亚氨基酰胺体试验 
    用带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的气相色谱仪,按下列操作条件进行试验。试验结果必须与标准品的一致。
操作条件
柱:内径0.25mm、长30m的石英毛细管,涂布0.25μm厚气相色谱用50%苯基--甲基硅酮,老化。
柱温:在100℃保持1分钟,此后每分钟升温30℃。达到280℃后保持4分钟。
进样器温度:250℃ 
检测器温度:280℃ 
气体流量:以氦气为载气。调整流速使甲烷亚氨基酰胺体约10分钟流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件所得试验结果,用峰高法或峰面积法对丁嘧脲、尿素体和甲烷亚氨基酰胺体进行定量,求出各含量,按下式求出包括尿素体和甲烷亚氨基酰胺体的的丁嘧脲含量。
丁嘧脲的含量(包适尿素体和甲烷亚氨基酰胺体)=A+B×1.04+C×1.09
A:丁嘧脲的含量(mg/kg)
B:尿素体的含量(mg/kg)
C:甲烷亚氨基酰胺体的含量(mg/kg)
c 确证试验
    对于丁嘧脲和尿素体的试验溶液,按照与a 定性试验相同的操作条件,用液相色谱--质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外,必要时用峰高法和峰面积法进行定量。
    对于甲烷亚氨基酰胺体的试验溶液,按照与a 定性试验相同的操作条件,用气相色谱--质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外,必要时用峰高法和峰面积法进行定量。

7.定量限   
 
    水果和蔬菜:0.02 mg/kg,种子:0.04 mg/kg,茶:0.2 mg/kg

8.注意事项

1)分析值
    对丁嘧脲、尿素体和甲烷亚氨基酰胺体分别进行定量,将尿素体和甲烷亚氨基酰胺体含量乘以系数换算成丁嘧脲的含量。它们的和为丁嘧脲分析值。
2)丁嘧脲在光和水中非常不稳定,试验必须始终在避光条件下进行,严禁使用旋转蒸发仪。此外,不需磨碎、切细的冷冻保存样品解冻后,不能作为再度试验的样品。因磨碎样品中经常加重丁嘧脲的分解,提取前直接进行均质。尿素体和甲烷亚氨基酰胺体的试验溶液稳定。对于丁嘧脲的试验溶液不稳定的作物,配制后保存在冷冻库中,最好迅速测定。

附:丁嘧脲尿素体〔1-特丁基-3-(2,6-二异丙基-4-苯氧基苯基)尿素〕
丁嘧脲甲烷亚氨基酰胺体〔1-特丁基-3-(2,6-二异丙基-4-苯氧基苯基)甲烷亚氨基酰胺〕

 

上一篇:调环酸钙盐检测方法

下一篇:啶斑肟检测方法

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294