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耐热大肠菌的检测方法



录入时间:2010-3-30 13:21:27 来源:青岛海博

国际目前耐热大肠菌群的检验方法主要有四种,NMKL有两个,分别针对不同产品,ISO有两个,仅适用于水的检验。下面以出口水产品中耐热大肠菌群的检验方法(根据NMKL、N96、1994方法整理)为例进行介绍。
   1.适用范围:新鲜和冷冻水产品,包括鱼、鱼制品、贻贝、贻贝制品、贝类及贝类制品。
    2.培养基和试剂:
    1)生理盐水
    氯化钠 8.5克
    蒸馏水 1000mL
    分装10mL管后,121℃灭菌15min。
    2)月桂基硫酸盐肉汤
    胰多胨 20克
    乳糖 5克
    氯化钠 5克
    磷酸氢二钾 2.75克
    磷酸二氢钾 2.75克
    月桂基硫酸盐 0.1克
    蒸馏水 1000mL
    分装每管10mL,内加童汉氏管,121℃灭菌15min,灭菌后pH为6.8±0.2。
    3)EC肉汤
    胰多胨 20克
    乳糖 5克
    氯化钠 5克
    磷酸氢二钾 4克
    磷酸二氢钾 1.5克
    蒸馏水 1000mL
    分装每管10mL,内加童汉氏管,121℃灭菌15min,灭菌后pH为6.8±0.2。
    3.操作步骤:
 3.1样品处理:取不同部位渔产品剪碎,称取25克于225mL灭菌生理盐水中,充分摇匀。取上清夜1mL用灭菌生理盐水做梯度稀释。其它样品依此方法稀释。
    3.2推测实验:取3个连续浓度的稀释液1mL接种内盛10mL灭菌月桂基硫酸盐肉汤的试管,于37±1℃培养两天,观察童汉氏管内是否有气泡产生。
    3.3确证实验:将4.2中产气的试管接种至EC肉汤中,于44.5±0.2℃培养,24h天内产气的判为阳性。
    3.4结果:根据4.3中的阳性管数,查MPN表(参见SN0169-92附录)确定每克原始样品中的耐热大肠菌群数。
 

 

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