1.分析目标化合物
呋草黄
2.仪器设备
带火焰光度检测器(硫黄干渉光,波长394nm)的气相色谱仪和气相色谱-质谱仪。
3.试剂
丙酮,氯化钠溶液,乙腈,正己烷,乙醚
4.标准品
呋草黄:含呋草黄99%以上,熔点为30℃。
5.试验溶液的制备
a 提取方法
将样品粉碎,通过420μm标准网筛后,称取其10.0g,加入20mL水,放置2小时。
加入100 mL丙酮,搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸,抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样操作,合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约30mL。
将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中,用100 mL正已烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,合并洗液于上述分液漏斗中,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正已烷层移入300mL三角烧瓶中。水层中加入50mL正已烷,按上述同样操作,合并正已烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振摇、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正已烷洗涤三角瓶,以此洗液洗涤滤纸上的残留物,重复操作两次。合并两洗液于减压浓缩器中,40℃以下除去正已烷。
残留物中加入30mL正已烷,移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈,激烈振荡5分钟后,静置,乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈,按上述同样操作,重复2次,合并乙腈层入减压浓缩器中, 40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL乙醚:正己烷(5:95)混合溶液溶解。
b 净化方法
在内径15mm、长300mm色谱管中注入5g悬浮在乙醚:正己烷(5:95)混合溶液中的柱色谱用合成硅酸镁,其上面在装入约5g无水硫酸钠,放出乙醚:正己烷(5:95)混合溶液至柱上端留有少量乙醚:正己烷(5:95)混合溶液。柱中注入a 提取方法所得的溶液后,注入70 mL乙醚:正己烷(5:95)混合溶液,弃去流出液。再注入80mL丙酮:正己烷(5:95)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去丙酮和正己烷。残留物加入丙酮溶解,准确至1mL,此为试验溶液。
6.操作方法
a 定性试验
按下列操作条件进行试验。试验结果应与标准品的一致。
操作条件
柱:内径0.25mm、长30m石英毛细管,涂布0.25μm厚气相色谱用的甲基硅烷,老化。
柱温:在60℃保持3分钟,此后每分钟升温20℃,到达260℃后保持10分钟。
进样器温度:260℃
进样方式:不分流
检测器温度:280℃
气体流量:以氦气作载气,调节流量使呋草黄约14分钟流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同试验条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
按照与a 定性试验相同的试验条件,气相色谱-质谱仪测定,试验结果与标准品的一致。此外,必要时用峰高法或峰面积法进行定量。
7.定量限
0.02mg/kg。
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