1.     将未开封的测试片贮藏在<= 8 ^oC (46 ^oF)的环境下，并在包装上标示的有效期内使用。在高湿度的地方，最好在使用前将测试片回复到室温。

2.       已开封的测试片，将开口反折，用胶带封好。

3.       为防止暴露于潮湿的环境中，请不要冷藏已开封的测试片。将胶带封好的测试片贮藏在低温干燥的地方，保持时间不超过1个月。请勿将测试片放在温度> 25 ^oC (77 ^oF)和(或)相对湿度> 50%的环境中。

4.       用涂抹棒、海棉或其它采样设备收集环境样本。湿润采样设备的液体应<= 10 mL。湿润剂可以是无菌水、缓冲蛋白胨水(Buffered Peptone Water, BPW)，或中和缓冲液，如Letheen肉汤或Dey/Engley (DE)中和肉汤。

5.       在无菌环境下在收集的样品中添加5 mL，20-30^oC，灭过菌的缓冲蛋白胨水(BPW)溶液。 不要将Petrifilm EL测试片与Vermont 培养基(UVM)、Fraser肉汤、李斯特菌增菌培养基 (LEB)或缓冲李斯特菌增菌培养基(BLEB)共用。

6.       混合，蠕动或旋转样品与BPW的混合液将近一分钟。将样品置于室温(20-30 ^oC) 1h，最久不超过1.5 h，以修复损伤的李斯特菌。

7.       将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。

8.       用3M^TM电子移液枪或其它移液器垂直滴加3 mL样品到下层膜的中央。

9.       将上层膜缓慢盖下，以免产生气泡。

10.   轻轻地将塑料压板放在位于接种区上层膜上。不要压，扭转或滑动压板。提起压板。等至少10分钟，以使胶体凝固。

11.   将测试片透明面朝上，可叠放至10片，在35^oC ± 1^oC或37^oC ± 1^oC下培养28h ± 2 h。

12.   Petrifilm EL测试片能够用标准的菌落计数器或其它光学放大器计数或判读。不要计数圆形轮廓上的菌落，因为它们不受选择性培养基的作用。

13.   1对于定性检测，根据紫红色菌落的存在与否，将结果计为检出和未检出。
如果是/否的结果已经能够满足报告要求，那么你可以选择定性检测。

14.   对于半定量检测，根据出现紫红色菌落的相对量来记录结果。 如果你是根据菌落数的相对含量来采取相应的措施，并且没必要记录实际菌落数，那么你可以选择半定量检测。李斯特菌的含量应记录为对采样区域和企业标准有指导意义的形式(如低，中，高，或可接受和不可接受)

15.   对于定量检测，计数所有紫红色菌落。 如果你根据菌落数来采取相应的措施，你可以采用定量检测。测试片上李斯特菌数：16
请参考判读手册的“定量采样与判读”部分来计算每个环境样本中的李斯特菌数。

16.   可挑区菌落进行进一步鉴定。掀起上层膜，从胶上挑取菌落。