实验室生物安全
一、危险生物材料:存在、或产生于工作环境，可能导致群体或个人的健康危害的生物介质或物质
二、危险生物介质
分为8 组:
（1）培养的动物细胞，并可能发生感染
（2）灵长类动物体液和可能传染的医用样品
（3）微生物类包括细菌、病毒、真菌、立克次氏体和Chlamydiae 等
（4）寄生虫
（5）过敏原、
（6）实验动物组织包括动物头屑
（7）植物病毒、细菌和真菌
（8）生物毒素（细菌、动物或植物）
三、实验室生物安全
1、实验室常用危险生物材料的两个主要来源:
（1）微生物实验室试验用病原体
（2）用于化学分析的生物液体样品（如血浆、尿）
2、世界卫生组织对病原体危险性分组
第一组介质：低个体和群落风险
第二组介质：中度个体风险，有限群落风险
第三组介质：k高个体风险，低群落风险
第四组介质：高个体风险，高群落风险
3、第一组介质
非病原体细菌、真菌
无需特殊设备或操作
标准的设计合理的实验动物、实验设备及满足基本安全试验操作
必须提供洗手池
d必须合理使用消毒剂
4、第二组介质
大肠杆菌、沙门氏菌、 ringworm真菌、流行性感冒病毒和单纯疱疹病毒
实验室与其它活动分开，贴有危险生物标志，室内台面防渗，随时可进行清洁
实验设施包括高压灭菌锅、 高效空气过滤器、一级或二级生物安全柜
所有污染材料须经净化
5、第三组介质
炭疽、结核、爱滋和hanta病毒
实验室须专门设计，双道门和淋浴
所有墙体渗漏必须进行密封
通风系统必须保证与周围区域一直呈负压，不可使空气再流通
空气排放须经过专用排气系统或高效空气过滤器系统
实验室窗户须密闭并不可击碎
应有备用发电机
经鉴定的高效空气过滤器二级生物安全柜
在出口处设有专门的可用脚、膝盖或自动控制的洗手池
6、第四组介质
具有传染性的介质全部为病毒
（1）Ebola viruses埃博拉病毒
（2）Herpes B virus (Monkey virus) B 疱疹病毒
（3）Foot and Mouth Virus脚和口病毒
最高级别屏蔽
设立一个设备齐全的隔离单元，完全能够独立操作
设备专门设计，由空气锁控制出入
三级生物安全柜，正压通风
为全面控制污染物，采用单独的通风系统
四、接触途径
主要为：口、 呼吸 、皮肤划伤、皮肤渗透、结膜、带菌者（蚊子、跳蚤、虱子）
传染途径中有65-75% 是呼吸造成的
因此实验操作中接触危险生物材料或潜在传染性材料时，了解其危害，采用适当技术防止不必要的接触十分关键
五、第一道隔离
1、当工作中与传染性生物体接触时，第一道隔离是第一道防卫
（1） 手套箱
（2） 生物安全柜
（3） 动物笼养
2、第一道隔离一般原则：
（1）隔离体积最小化
（2）采用安全的从容器中取放材料的方法，勿毁坏隔离
（3）采用净化隔离栏和污物的方法
3、生物安全柜分为3 种 ：
（1）一级–保护操作者和环境
二级–保护操作者、环境和产品
三级– 用于第4 类危险品的操作，最大限度保护操作者、环境和产品
（2）一级生物安全柜
类似化学实验室的通风橱，排出的气体要通过高效空气过滤器，常常用于放置离心机和天平
二级生物安全柜
提供气流向下的经高效空气过滤器净化的空气，保护产品
进一步基于排气/ 再循环空气比值进行细化为A 、B1 、B2 和B3 型
Type A – 75 fpm face velocity, 30% internal exhaust
Type B1 – 100 fpm, >50% external exhaust
Type B2 – 100 fpm, 100% external exhaust
Type B3 – 100 fpm, 30% external exhaust
第四组介质
密闭单元– “ 手套箱”
排气须经过双层的高效空气过滤器或其它处理方法（如空气焚烧），阻止第四组介质进入环境
六、第二道隔离
第一道隔离失败
工作服及其它个人防护用品成为重要的防线
七、净化
1、Sterilization 杀菌
（1）完全阻止生物介质的可能传染
（2）常用高压灭菌锅
2、消毒
（1）减少微生物病原体的数量和繁殖，使其无法传播疾病
（2）121˚C 蒸15 分钟
（3）干燥加热需160-170˚ 2-4 小时
3、Mode of action
（1）细胞溶解
（2）蛋白凝固或变性
（3）酶变性或失活
（4）酶作用物破坏
八、主要化学消毒剂
(1) 醇类
(2) 甲醛
(3) 酚化合物
(4) 季铵盐
(5) 氯化物
(6) 碘化物
(7) 戊二醛
(8) 过氧化氢
(9) 六氯化合物
1、醇类
乙醇或丙醇
蛋白质变性
对含油脂病毒、膜包被病毒和植物细菌有效
对分支杆菌和真菌作用小
可燃、遇有机物活性差、挥发
2、醛类
蚁醛和戊二醛
对广谱微生物有效
作用时间长（20-30分钟）
对有机体的去活作用小
使用有效期短
对人体健康有害-呼吸刺激、接触性皮炎
3、酚类
常为分化合物清洁剂
（1）对植物细菌、真菌和含脂病毒有效
（2）pH范围宽
（3）皮肤和眼的刺激
（4）对孢子无效
4、季铵盐化合物
阳离子清洁剂 /强表面活性剂
（1）对植物细菌（部分）和不含脂病毒有效
（2）稳定、无刺激
（3）对分支杆菌、含脂病毒和孢子无效
（4）Neutralized by organic material (esp. proteins)与有机物（特别是蛋白）中和
5、氯化物
强氧化剂
（1）普遍采用的纯化剂
（2）用家用漂白剂或自来水稀释制备成1/100 或 1/50 （对孢子和分枝杆菌）溶液
（3）稀释溶液不稳定，常配
（4）用有机物质中和
（5）具腐蚀性
6、碘化物
与氯相似
（1）Effective against vegetative bacteria and viruses 对植物细菌和病毒有效
（2）Less corrosive and toxic than chlorine 比氯的腐蚀性和毒性低
（3）Self-indicating 自显示: brown 棕->yellow 黄->clear 无色
（4）May stain surfaces使表面染色
（5）用有机物中和
7、过氧化氢
强氧化剂
（1）浓度6% 的溶液即对植物细菌、分支杆菌、真菌和病毒有效
（2）杀孢子能力有限
（3）不稳定
（4）对某些金属具有腐蚀作用
8、消毒
（1）消毒效果取决以下因素
（2）化学试剂浓度
（3）有机体的存在
（4）化学试剂的作用时间
（5）化学试剂的温度和pH 值
（6）污染程度
（7）污染类型
（8）污染物/ 表面的物理性质
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