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鹅细小病毒



录入时间:2009-8-18 10:40:13 来源:青岛海博

鹅细小病毒(Gooseparvovirus)同义名:小鹅瘟病毒,雏鹅肝炎病毒,雏鹅渗出性肠炎病毒〖HT5SS〗  鹅细小病毒(GPV)主要引起雏鹅急性肠炎以及肝、肾、心等实质脏器炎症,病原性强,死亡率高。在我国江苏地区很早以前就有这种疫病流行,是养鹅业的重大危害。对这一传染病的研究,我国走在前面。1956年,我国学者方定一首先发现了这种传染病并分离出了病原。1961年又用成年鹅制出能预防本病的高免血清,次年用鹅胚培养物作成疫苗并在成年鹅中进行免疫试验,有效地控制了本病的流行。在我国首先发现本病之后,陆续报道存在本病的国家有前苏联、德国、匈牙利、荷兰、法国、英国、意大利、以色列、南斯拉夫和越南。当前,美洲和非洲尚未见报道。
1.形态和理化学特性  病毒外观呈圆形或六角形,直径约20~25nm,具有本属病毒共同的形态特征。核酸由单股DNA组成。据不完全的实验资料,GPV只有一个血清型,从世界各地分离的病毒都相同,或仅有微小差异。与本属其它病毒不呈现交叉血清学反应。  GPV对外界因素具有很强的抵抗力。据方定一的实验资料,从我国分离的病毒,以56℃加热1小时,仍能使鹅胚死亡,不过死亡时间较不处理的延长96~120小时,50℃下经3小时,在37℃下经7天,对感染滴度无影响。病毒同样对乙醚、氯仿、胰酶和pH3的处理有抵抗力。经过上述处理的病毒接种鹅胚后,与未经处理的病毒没有差异。  本病毒不同于本属其它成员的一个显著特点是迄今尚未发现其有凝集红细胞的性能。据方定一的资料,从我国分离的GPV对鸡、鹅、大白鼠、小鼠、兔、猪和绵羊等动物的红细胞均无凝集作用。但据Maldinson和Peleg(均为1974)资料,本病毒能凝集黄牛的精子,并可用抗血清作凝集抑制试验,从而为GPV的鉴定提供了一种有效的方法。
2.培养  对GPV进行初代分离时,只能应用鹅胚和番鸭胚,因为其它禽胚或细胞培养物均不能使病毒增殖。将病料悬液接种入13~14日龄鹅胚的尿囊腔内,经5~7天孵育,约有半数鹅胚死亡(免疫母鹅所产卵胚不发生死亡,禁用)。在鹅胚中连续通过10代以后,致死期缩短至3天左右。死胚出现绒毛尿囊膜水肿,胚体多数鲜红色有充血和出血变化,心肌和肝脏变性。经鹅胚连续传十几代以后,病毒对雏鹅的毒力明显减弱。将这种传代病毒接种鸭胚成纤维细胞培养物,不出现细胞病变,培养物中所含病毒的浓度也很低。GPV能适应于鹅胚成纤维细胞,并能出现折光性增强、圆缩直至溶解脱落等细胞病变。象本属其它病毒一样,GPV的增殖也要求处于有丝分裂过程中的细胞,因此必须在细胞形成单层以前,进行早期接毒。取这种细胞培养物作H.E.染色镜检时,能发现大型核内包涵体。本病毒对体外细胞培养物的专一性甚强,除鹅胚适应毒株可能在鹅胚组织培养细胞内增殖外,在试验过的鸭胚的成纤维细胞和肝细胞、鸡胚成纤维细胞、兔肾上皮细胞、小鼠胎儿成纤维细胞、猪的肾上皮和睾丸细胞以及PK15细胞等,均未见病毒增殖。
 
3.病原性GPV是本属病毒中病原性最强的病毒之一,虽然感染范围只限于鹅和个别品种的鸭,但其发病率很高。各种鹅包括白鹅、灰鹅、狮头鹅和雁鹅,经口饲或注射病毒,均能引起发病。其它动物除番鸭和莫斯科鸭外,均无易感性。自然发病的均限于一月龄以内雏鹅。病鹅的内脏、脑、血液及肠管均含有病毒,据国内实验资料,成鹅感染后的带毒期一般不超过10天。除通过病、健雏鹅接触传染外,被污染的器具、场地、食物和衣服等都能引起传播。污染的炕坊环境为主要传染媒介。病毒最初可能经种蛋传入炕坊,传染给初孵雏鹅发病,以致将整个炕坊环境污染。但由带毒卵引起传播的可能性,也是有的。初孵雏鹅感染病毒后,经4~5天的潜伏期,多发生急性败血症死亡。最早发病的雏鹅一般在3~5日龄开始,数天内波及全群,死亡率可达70%~95%。这种急性病例,以渗出性肠炎和肝、肾、心等各实质脏器的变性为主。在病程较长(2~3天)的病死雏鹅,小肠后段常出现整条的脱落上皮渗出物混合凝固而形成的长条状或香肠状物,死亡率较前者为低,并随雏鹅日龄、母源抗体滴度以及病毒的毒力等而有所差异。
 
4.免疫  康复的雏鹅以及经过隐性感染的成年鹅,均能产生高水平的抗体,并持续较长时间,而且还能将抗体通过卵黄传给后代,使孵出的雏鹅获得抵抗GPV感染的能力。因此,在大流行的次年,大部分新出壳的雏鹅能抵抗人工感染,所以流行有周期性,往往隔一、两年在同一地区流行。对1~3日龄雏鹅进行母源抗体监测是预防此病的良好措施。通过免疫母鹅或用高免血清注射雏鹅都对此病起有预防作用。  方定一等于1961年首次研制了作疫苗用的全毒鹅胚培养物,用尿囊液作100倍稀释,成年鹅接种0.5ml,必要时间隔两周再注射未稀释的原液02ml。母鹅经两次注射后四个月,所产卵孵出的仔鹅,约85%以上能抵抗致死量的人工感染。经一次免疫接种母鹅的后代,也能获得近似的免疫力。  全毒苗经长期鹅胚继代后,逐渐减弱对雏鹅的毒力。1980年曾用扬州系鹅胚弱毒接种雏鹅500余只,出现一些接种反应,又死亡10只,似乎还不够理想。目前常用的弱毒疫苗株是用鹅胚和鸭胚连续传代驯化而成的,对成年鹅和雏鹅均无致病性。通常采用在产卵留种之前,给母鹅免疫注射1~2次。这样,到翌春整个产卵期所孵出的雏鹅,均能抵抗传染,成活率可达95%以上。也可应用感染鹅(鸭)胚组织或细胞培养物制成灭活疫苗。  应用疫苗免疫成年鹅制备的高免血清,可作雏鹅紧急预防接种用,每雏03ml,保护率约95%;对患病雏鹅治疗时,每雏05~1ml,活愈率约50%。国内普遍制备卵黄抗体,用于雏鹅的紧急预防和治疗。
5.诊断  根据本病的流行特点和症状,有经验的兽医能作出初步诊断,尤其在本病流行区。确诊要靠病毒的分离和鉴定。  采取处于急性期雏鹅的肝、脾、肾等实质脏器或心血,制成约1∶10乳剂,尿囊腔接种鹅胚分离病毒。初次死亡时间多在4~7天,鹅胚病变一致且明显:绒毛尿囊膜增厚,常见有灰白色针尖状小点;胚体全身充血,翅尖、趾、胸部毛孔、颈部皮肤、喙旁均有明显出血点;肝脏充血及边缘出血;心肌、后脑出血;头、颈部及两胁皮下有水肿。死亡鹅的尿囊液能连续在鹅胚内传代,并产生相同的病变,且鹅胚的死亡时间逐渐缩短(恒定在3天左右)。  随后可取死亡鹅胚尿囊液(病毒)与由成年鹅制备的标准毒株的免疫血清进行病毒中和试验。试验组按血清4和含毒尿囊液1的比例混合,另外以无菌生理盐水代替血清,作为对照组,均放37℃温箱感作30分钟,各分别接种4~6只12日龄鹅胚(尿囊腔)。试验组鹅胚应全部活存,而对照组鹅胚经3~5天基本全部死亡,且呈现上述典型病理变化。据此可作出明确诊断。  血清保护试验也是鉴定病毒的特异性方法。取3~5只雏鹅作为试验组先皮下注射标准毒株的免疫血清15ml,然后皮下注射含毒尿囊液01ml;对照组以生理盐水代替血清,其余同试验组。结果,试验组雏鹅应全部保护,对照组于2~5天内全部死亡。  可用免疫荧光和ELSA检测病料中的病毒抗原。  如果雏鹅已到6周龄,可用病毒中和试验和琼扩等方法检测其血清抗体,若存在抗体即说明已被细小病毒感染。

 

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