犬细小病毒(Canineparvovirus)同义名：犬细小DNA病毒〖HT5SS〗 犬细小病毒(CPV)于1978年同时从澳大利亚(Kelly)、加拿大(Thomson等)患肠炎的病犬中分离获得，是继1967年Binn等从犬分离的第二种细小病毒。它与Binn早期从健康犬分离的犬极小病毒(Minulevirusofcanine，MVC)在致病性上显著不同，抗原性上也有明显差异。CPV可引起犬出血性腹泻和心肌炎，并使白细胞大量减少，在幼犬中的发病率和死亡率都很高，症状与猫泛白细胞减少症相似。而MVC的致病性迄今尚未明确，虽然某些犬群的抗体阳性率很高(达70%)。 本病虽发现时间不长，但在欧、美等一些商业性饲犬场，相继有流行和造成幼犬群损失的报道。除上述最早报道的两个国家外，已相继在美国、英国、西德和法国发现，当前已成为犬的一种重要传染病，我国亦有本病的暴发流行，并已分离获得多株病毒。研究报道日趋增多，并发现它在抗原性上与猫泛白细胞减少症病毒有密切关系。 Rhode(1985)Reed(1988)分别克隆了犬细小病毒的衣壳蛋白基因和全基因组，并测定了核苷酸序列，基因组全长5233nt。
1.形态和理化特性 CPV具有本属病毒的典型形态和结构，粪便中负染的病毒颗粒外观呈圆形或六边形，直径约20nm。核酸由单股DNA组成。其对外界因素的抵抗力与本属其它病毒相似。
2.血凝性本病毒血凝特性较强，不仅能凝集猪的红细胞，而且能凝集恒河猴的红细胞(都要求在4℃温度下)。这一特性可作为病毒鉴定的参考指标。
3.培养 CPV能在多种不同类型的细胞内增殖，此点与猫泛白细胞减少症和犬极小病毒不同。能在原代、次代猫胎肾细胞，犬胎的肾、脾、胸腺和肠管细胞，水貂肺细胞系(CCL64)，浣熊的唾液腺细胞以及牛胎脾细胞内增殖和传代。近年常用MDCK和F81等传代细胞分离培养病毒。CPV增殖后可引起F81细胞脱落、崩解和破碎等明显的细胞病变。病毒虽能在MDCK细胞内良好增殖，但无明显细胞病变。有时出现细胞圆缩，并常形成核内包涵体。为查明是否有病毒增殖，最好是取接种后3～5天的细胞单层作免疫荧光抗体染色，当有病毒增殖时，细胞核发出明显的荧光；也可取培养液与猪或恒河猴红细胞作凝集试验，凝集阳性表明有病毒增殖，但不能肯定是CPV。和本属其它病毒对培养细胞的要求相同，必须在种入细胞后不久或同时接种病毒，才能达到增殖的目的。在感染的细胞核内能检出包涵体。
4.致病性 就目前所知，CPV只感染犬，具有高度的接触传染性，各种年龄的犬都能感染，但成年犬一般只出现感染后的免疫反应，常无可见临床症状，有时可能出现一过性的白细胞减少。但近来也常发现成年犬发生严重肠炎并死亡的严重病例。吮乳幼犬由于可能从母体获得抗体，所以也较少发病。断奶后的幼龄犬最为易感(尤其12周龄以下的)。严重流行时，可在幼犬群中迅速传播。临床表现体温升高，精神沉郁，脱水，呕吐，排出粘液状或带血的稀便(出血性肠炎)。1岁以内的幼犬，还常发生心肌炎，8周龄以内幼犬的死亡率高达70%，1岁犬也达30%。犬感染CPV时，经常首先看到心肌炎综合症，3～10周龄的幼犬突然死亡，死前常无临床症状，多数病例在应激兴奋期后死亡。耐过幼犬可能发生心肌损伤和心力衰竭，以不耐运动为特征。组织学病变为弥漫性非化脓性心肌炎。病畜白细胞数可减少90%(由正常犬的每ml12万个减至每ml千余个)，这时可出现很高的死亡率，尤其发生在9～12周龄的幼犬。于发病后5天不死亡的病犬，常可逐渐康复。本病发病率和死亡率的变动范围都很大，前者从50%～100%，后者从0%～50%。病理变化以空肠和回肠的肠炎变化最明显，粘膜发生坏死，肠内空虚或有少量淡黄带血的粘液。肠系膜淋巴结肿大，切面点状出血。作组织学检查时，可于肠腺上皮细胞内发现核内包涵体。 因在疾病过程中发生病毒血症，CPV随粪便、尿、唾液和呕吐物大量排出于外界。健康易感犬直接接触病犬、摄入污染的食物和饮水或接触污染的食具、垫草等而遭受感染。
5.免疫 病犬康复后能获得坚强的免疫力。由母体初乳传给幼犬的被动免疫可持续4～5周。仔犬断奶后即应进行疫苗接种。 在预防上最早使用的是福尔马林灭活的猫泛白细胞减少症疫苗，也曾少量试用过猫泛白细胞减少症弱毒疫苗。随后又相继研究出了CPV灭活疫苗和弱毒疫苗。据1980年Lenghaus等的研究资料，虽然CPV和FPV之间具有共同抗原组分，能发生交叉血清学反应，但两者又各有其特性。两种病毒抗血清的交叉中和试验结果(血清稀释法)是：抗CPV血清对CPV的中和效价为1∶4000，而对FPV则为1∶1000；抗FPV血清对FPV的中和效价为1∶32000，而对CPV则为1∶2000。另据1979年Appel等的动物免疫和攻毒试验结果，也看到了两种病毒抗原间的明显差别：用CPV疫苗免疫的犬，攻毒前血凝抑制抗体价为1∶3200～6400，用CPV强毒攻毒击后，抗体效价基本未动；而用猫泛白细胞减少症疫苗免疫的犬，攻毒前血凝抑制抗体效价为1∶160～320，用CPV强毒攻击后，抗体效价激增到1∶3200～6400。上述两项试验都表明这两种病毒抗原虽有共同组分，但又有自己的特异成分，因此无论疫苗制造和特异性诊断方法都以应用CPV为宜。 Lope等(1992)在昆虫杆状病毒表达系统中表达了CPV的VP2蛋白，表达的VP2蛋白可自我装配成空衣壳。10ug表达蛋白与免疫佐剂一起可使犬产生良好的免疫反应。Langeveld等(1994)合成的位于VP2氨基端21个氨基酸内有部分重叠的两段多肽，分别免疫犬不但都能产生免疫保护反应，还可用针对第二个多肽3～10个氨基酸的单克隆抗体可以区别疫苗接种和自然感染的犬。
6.诊断 在熟悉本病流行特点和主要临床症状后，尤其发生在幼犬的腹泻和出血性肠炎，并伴发白细胞显著减少的传染性疾病，即应联想到本病。在有电镜的条件下，快速的诊断方法是采取患病犬粪便，直接或加等量PBS后，混匀，以3000r/min离心15分钟，取上清液加等量氯仿，振荡10分钟，再经同样上述离心处理，吸取上清液，以2%磷钨酸(pH62)进行负染后镜检。可见大量直径约20nm圆形和六边形病毒粒子。如能进行免疫电镜检查则更佳(见图37-4)。〖KH4〗〖JZ〗〖HT5”SS〗图37-4 犬细小病毒的〖WB〗负染标本(横杠=100nm)〖DW〗——自贾补年〖HT5SS〗 也可取发病早期的病犬粪便直接进行血凝试验。血凝价常可高达2000～4000倍以上。发病后期粪便，由于肠粘膜分抗体，血凝性下降或消失，但却经常出现血凝抑制作用。此时进行电镜负染标本检查，常可发现大块凝集的病毒粒子，犹如免疫电镜所见。 分离病毒时，为了去除粪便中的细菌，除加入高浓度的抗生素外，有条件时可对上述普通离心处理的滤液，再以10000r/min离心30分钟。犬胎肾和猫胎肾原代细胞、F８１细胞糸均可用于CPV的分离。最简便的病毒鉴定方法是接种后3～5天应用免疫荧光抗体检测细胞中的病毒或测定培养液的血凝性。 应用阳性血清，进行血凝抑制试验，也是鉴定病毒的有效方法。血凝抑制试验也可作为回顾性血清学诊断法或抗体调查手段。血清先经56℃30分钟灭活，并以1/10容量的50%猪红细胞作预吸附处理。离心后，将上清液用含01%牛血清白蛋白的PBS作连续倍倍稀释，随后向各稀释度凹孔加入等量血凝抗原(含4个单位血凝素)，混匀，室温下经1小时，加入等量的1%猪红细胞悬液，混匀，在4℃下放置2～4小时或过夜后判定。病程前、后期血清的血凝抑制效价，相差超过4倍以上的为阳性。〖BT4〗(附) 犬极小病毒(Minutovirusofcanine) 犬极小病毒是1967年Binn等从健康犬粪便中分出来的第一种犬细小DNA病毒。其致病性目前尚不清楚。它具有本属病毒所共有的形态和理化学特征。直径约20～21nm。它仅能在5℃下凝集恒河猴和非洲绿猴的红细胞。交叉血凝抑制试验表明，它与细小病毒属的某些成员(H1、MMV、RV、FPV、PPV、RTV、TVX和LuⅢ等)无共同抗原组分。病毒的细胞感染范围很窄，仅能在犬的一种上皮细胞系内增殖，并形成大型核内包涵体。 至于MVC与CPV的关系，有人认为两者是同一种病毒的不同病原性的毒株，但也有人根据两者不同的培养特性和不一致的血清学关系，认为两者是不同种的病毒。
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