这一实验用来粗略估计病毒上清中病毒颗粒的数量(精确测定病毒颗粒数量见5.8节的滴度测定)。MOI测定通常在扩增病毒尤其是在大量扩增的时候使用,以确定感染的最佳条件。这一实验可在含有1×106QBI-293A细胞/孔的6孔板中进行。
1. 移去培养液,每孔加入500μL新鲜的培养液
2. 一孔为对照,其余每孔分别加入2、5、10、25、50μL病毒上清。
3. 不断缓慢晃动培养板,培养约3小时。
4. 加入1.5mL新鲜培养液培养72小时。
观察每孔细胞是否出现CPE,根据预先的估计,感染后3天细胞完全出现CPE的病毒MOI值为10~20。这样,根据感染的细胞数量,你就可以估计出上清中的病毒量。
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