1、仪器和试剂：同内热芽孢数的测定所需的仪器和试剂相同。
2、方法
（1）用10ml灭菌吸管吸取5ml奶样加入灭菌试管中。
（2）在另一支试管加入与奶样等量的水。
（3）在装水的试管中插一支温度计。
（4）将装有奶样和水的试管同时放入热水中（在电炉上用白瓷缸把水煮至有小气泡时）。
（5）直至“装水试管”的温度达到80℃，计时10分钟。
（6）10分钟后，取出试管，用冷水冲，使含奶样的试管冷却。
（7）用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后的奶样于两个灭菌平皿中。
（8）及时将冷却至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时将营养琼脂分别注入加有1ml灭菌生理盐水的平皿和另一个灭菌的空白平皿内，做空白对照。
（9）待营养琼脂凝固后，翻转平板。置于36±1℃的培养箱内培养72±2h，取出计数。
2、计数
同菌落总数测定的计数方法。
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