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耐热芽孢的测定



录入时间:2009-8-13 14:01:33 来源:食品伙伴网

1、仪器和试剂
(1)生化培养箱:36±1℃
(2)高压蒸汽灭菌锅
(3)恒温水浴锅:46±1℃
(4)天平
(5)电炉
(6)吸管:1ml和10ml,标有0.1ml单位的刻度
(7)三角烧瓶:容量为250ml、500ml
(8)平皿:皿底直径为9cm
(9)试管:15×150mm
(10)酒精灯
(11)试管架、试管框
(12)灭菌刀或剪刀、灭菌镊子
(13)酒精棉球
(14)记号笔
(15)白瓷缸(用于煮开水)
(16)温度计:0-100℃
(17)营养琼脂培养基:购买制好的营养琼脂,按说明分装于300ml三角瓶中,高压灭菌121℃、15分钟。
(18)生理盐水:8.5gNaCl溶于1000ml蒸馏水中,高压灭菌121℃、15分钟。
2、方法
(1)用10ml灭菌吸管吸取5ml奶样加入灭菌试管中。
(2)在另一支试管加入与奶样等量的水。
(3)在装水的试管中插一支温度计。
(4)将装有奶样和水的试管同时放入沸水浴中(在电炉上用白瓷缸把水煮沸,并保持沸腾)。
(5)直至“装水试管”的温度达到100℃,计时10分钟(如果水不到100℃就沸腾,则等候时间延长;或在水中加入盐以提供高沸点温度,但要避免奶样沸腾)。
(6)10分钟后,取出试管,用冷水冲,使含奶样的试管冷却。
(7)用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后的奶样于两个灭菌平皿中。
(8)及时将冷却至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml,并转动平皿使之混匀;同时将营养琼脂分别注入加有1ml灭菌生理盐水的平皿和另一个灭菌的空白平皿内,做空白对照。
(9)待营养琼脂凝固后,翻转平板。置于55±1℃的培养箱内培养48-72h,取出计数。
3、计数
同菌落总数测定的计数方法。
 

 

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