核酸杂交技术并未广泛应用于狂犬病的研究。PCR技术于1990年首次应用于鼠脑内狂犬病病毒的检测，后来Tordo等人用于狂犬病的诊断研究。狂犬病病毒的PCR扩增分为两步：①病毒RNA反转录成cDNA；②cDNA的PCR扩增。PCR引物设计主要选择在N基因内，上游引物大多数包含N基因的转录起始信号及起始密码子，下游引物包含终止密码子,这样可以扩增N基因全部编码区，有的引物延伸至M基因的保守区。也有在NS基因、G基因或L基因内设计引物者。但作为诊断目的时,一般不选择伪基因内的引物。被检样品通常采自于脑干，也可以来自于唾液或唾液腺。RNA模板制备、RNA反转录PCR操作及注意事项参见第十五章有关节段。根据被检样品PCR产物大小与设计引物间序列大小是否一致，即可确诊。如有条件,也可采用测序的方法，读出被检样品PCR扩增产物的部分序列，可更准确地作出诊断。Saramento等对巴斯德研究所1989～1991年收集的100份脑样品进行PCR扩增，与其它诊断方法如快速酶联免疫测定、荧光抗体测定和细胞感染试验相比较，阳性率及符合率均为100%。PCR具有快速、特异、操作简单等特点，在狂犬病诊断中具有很好的应用前景。

 

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