取脑或唾液腺等材料用缓冲盐水或含10%灭活豚鼠血清的生理盐水研磨成10%乳剂，脑内接种5～7日龄乳鼠，每只注射0.03ml，每份标本接种4～6只乳鼠。唾液或脊髓液则在离心沉淀和以抗生素处理后，直接作接种用。乳鼠在接种后继续由母鼠同窝哺养，3～4天后如发现哺乳力减弱，痉挛，麻痹死亡，即可取脑检查包涵体，并制成抗原，作病毒鉴定。如经7天仍不发病，可杀死其中2只，剖取鼠脑作成悬液，如上传代。如第二代仍不发病，可再传代。连续盲传三代，第一、二、三代总计观察4周而仍不发病者，作阴性结果报告。也可应用3周龄以内的幼鼠，如上作脑内接种，每只0.03ml。这种日龄的小鼠通常在接种后15天内发病，主要症状是肌肉震颤，步样失调,麻痹，最后死亡。如有条件，可同时接种仓鼠肾原代细胞或仓鼠肾继代细胞和BHK21细胞等。新分离的病毒可用电子显微镜直接观察，或者应用抗狂犬病特异免疫血清进行中和试验或血凝抑制试验加以鉴定。中和试验采用仓鼠肾细胞作细胞病变抑制试验或蚀斑减数试验，或者应用小鼠脑内接种法。即将标准免疫血清与新分离病毒进行试验，如新分离病毒被已知狂犬病免疫血清所中和，则即证明新分离病毒为狂犬病病毒。具体方法请参阅本书第十四章有关节段。血凝抑制试验应用以BHK21细胞培养的新分离病毒作为抗原。于0～4℃先测定其对鹅红细胞的凝集滴度，以出现凝集的抗原最高稀释度作为1个血凝单位。用4个血凝单位的被测抗原、标准阳性抗原及阴性抗原分别与不同稀释度的标准血清感作后，再加0.25%鹅红细胞。如果标准血清对待测抗原的抑制与其对标准阳性抗原的抑制价相同或相近，则即可作狂犬病病毒的阳性判定结果。