世界各地养地区均有乳头状瘤的发生,并因损害皮革质量和降低动物体质而造成经济损失 。牛乳头状瘤病毒(BPV)至少有6个型, 其中BPV1、BPV2和BPV5属于纤维乳头状瘤病毒。主要结构蛋白具有共同的抗原位点,其基因组也具有较高的同源性。BPV3、BPV4和BPV6为真性上皮乳头状瘤病毒。
1.形态和理化学特性病毒粒子主要存在于病牛皮肤的粒层和角质层细胞的核内。电镜检查牛皮肤乳头状瘤病毒的超薄切片,可在角化的上皮细胞内看到园形的典型病毒粒子。 负染标本中的病毒粒子直径为47~53nm。 衣壳由72个清晰的向右歪斜排列的中空壳粒构 成。每个壳粒约长75nm,宽5~6nm。BPV1、BPV2、BPV5的基因组大小约为7 900bp,而BPV3、BPV4、BPV6的基因组较小,仅为约7200bp。
2.抗原性 BPV1、BPV2和BPV5等纤维乳头状瘤病毒具有共同的抗原位点,与BPV3、 BPV4和BPV6等上皮乳头状瘤病毒的交叉反应性很差。由疣组织提取物制备的疫苗,只能部分保护。病牛以及实验接种的家兔和鸡的血清中具有中和抗体。
3.培养 一般认为,本病毒不能在鸡胚内增殖,且在组织培养细胞内不产生细胞病变。但是此病毒却可在6~8周内使仓鼠、小鼠和牛的胚胎细胞发生转化。病毒DNA也有这种转化作用。病毒整 个基因组或克隆的部分片段均可诱致细胞转化。病毒DNA以游离多拷贝形式存在于转化细胞的胞浆中,且已证明细胞转化作用并非DNA整合所致。
4.病原性BPV是牛乳头状瘤的病原体。可使牛皮肤、乳头、阴茎、阴门、消化道等发生乳头状瘤。这些疣状物大小不一,有些呈硬固的结节状,多在几个月后自行消散。有些则长大如菜花样,直径达几个cm,且易流血,并带恶臭。Rebhum等报道一个乳牛群暴发趾间乳头状瘤。病毒多在病、健牛间直接接触时经破损的皮肤侵入,当然也有可能因污染的挽具、缰绳和注射针头等间接传播。BPV1、BPV2和BPV5首先转化皮下成纤维细胞,然后增生扩散到鳞 状上皮细胞,病毒DNA以游离形式存在于这些细胞中,但无病毒粒子及病毒特异性抗原产生。后期可于颗粒层细胞中检测到病毒粒子及病毒特异性抗原,即形成纤维乳头状瘤。BPV3、BPV4和BPV6主要感染上皮细胞。另外,BPV2和BPV4可使牛消化道发生肿瘤。 有人 认为病毒可能呈隐匿状态存在于没有临床症状的动物体内。给犊牛作皮内或皮肤划痕接种, 常可引起人工感染,但潜伏期较长,有时需几个月之久。将瘤组织提取物接种牛可 使牛发生 相应的乳头状瘤。早在1929年,美国Greech等就已进行了牛乳头状瘤的实验感染试验: 由屠宰牛体剪取肿瘤标本,在生理盐水中研磨制成抽提液,取部分抽提液通过贝 氏N滤烛, 另一部分不滤过,分别接种健康幼牛的一侧颈肩部皮内。其结果,在接种滤过 液的22头牛中,15头在1~2个月内发生典型的疣状肿瘤;在接种未作滤过处理的提取液的 8头牛中,7头发 生疣状肿瘤。给犊牛作脑内接种,则常引起脑膜纤维瘤。给马作皮下接种,导致结缔组织肿 瘤。在马的结缔组织肿瘤中,牛乳头状瘤病毒基因组呈游离状态存在。 皮下接种未离乳仓鼠 和新生的C3H/eB小鼠,可在接种部位引起肿瘤,但潜伏期长达2~3个 月。这种肿瘤比较坚硬 ,直径8~15mm,单个或多个存在,持续4~6个月,但不见转移现象。Jarrett等报道,在英国某一养牛地区,发现6岁以上的老牛多发消化道癌,可由 其 中检测到BPV2基因,但分离不到病毒粒子。将病变组织注入老牛的消化道和皮肤,可引起乳头状瘤。
5.诊断临床诊断不难。确诊时,可采取局部肿瘤材料制备的超 薄切片或负染标本,通常易于找到典型的病毒粒子。病毒粒子及抗原主要见于变性细胞,于正在增生的细胞中一般不能看到病毒粒子,也检测不到病毒抗原。
6.免疫 牛的皮肤乳头状瘤几乎都呈自限性病程,通常在1~12月内自行消散。康复牛在以后1~2年 内具有对再感染的免疫性。不同品种甚至不同个体的牛对乳头状瘤病毒的敏感性不同,有些牛呈现较强的抵抗力,甚至人工感染后也不发病;有些牛则特别敏感,乳头状瘤病毒 可能 遍及全身各部,且持续一年以上。早期的牛乳头状瘤病毒疫苗是粗制的疣组织提取物 ,但由 于至少有6个型,且各型之间的免疫交叉性不同,由疣组织提取物制成的疫苗不能 保护所有 其它型的BPV的再次感染。通过基因工程表达的L1蛋白作为疫苗,接种牛可产生高滴度中和抗体,并能保护牛免受BPV感染。
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