摘要:近些年来玉米组织培养技术发展十分迅速,玉米组织培养技术作为一种新型的科研技术,越来越受到人们的重视。浅谈植物组织培养技术的基本原理、意义及面临的一些问题,综述了玉米子房和幼胚系统的组织培养研究、玉米茎尖和根尖离体培养研究和玉米花粉和花药培养研究。
关键词:组织培养;原理;玉米
1 植物组织培养
1.1 植物组织培养的意义
植物组织培养首先不仅可以生产大量的优良无性系,而且可以获得人类需要的多种代谢物质;其次,细胞融合可打破种属间的界限,克服远缘杂交不亲和性障碍,在植物新品种的培育和种性的改良中发挥着巨大的作用;再次,还可获得单倍体、三倍体及其它多倍体、非整倍体;最后,组织培养的植物细胞也成为在细胞水平上分析研究的理想材料。
1.2 植物组织培养的基本原理
植物组织细胞培养的依据是植物细胞的全能性和再生作用。1902 年,德国著名植物学家G Haberlanclt 根据细胞学理论,大胆地提出了高等植物的器官和组织可以不断分割,直到单个细胞,即植物体细胞,在适当的条件下,具有不断分裂和繁殖,发育成完整植株的潜力的观点。织培养选用的基础培养基有MT 、MS 、SH 、White 、N6等,由于不同种类植物所需要的生长条件有所不同,有的培养基要作一些改良,有的要选择专用培养基,但是一般采用较多的是MS 。组织培养采用固体培养基的比较多,但固体培养基只有在植物的周围的营养物和激素被吸收,而大多数的物质还残留在培养基里,如果这些培养基还能被利用,对工厂化生产的减少成本方面有很大的帮助。杜勤仁等在无外源激素条件下,研究液体和固体培养基对黄瓜子叶培养器官分化的影响,结果用液体培养基直接诱导花芽率更高,分化高峰期出现的时间也更早。这也说明了液体培养基对外植体的生长更有利,只是固体培养基在操作上更方便,被较广泛应用。
胚性愈伤组织比非胚性愈伤组织具有更强的生长能力、胚胎发生能力和相对较高的同工酶活性,而形成胚状体再分化出植株比形成愈伤组织再形成植株要更容易。Kavikishor 在对水稻盐适应细胞的研究中,认为ABA 可促进初次生长在盐胁迫下的愈伤组织对盐的适应能力。陆卫等分析了外源ABA 可使谷子胚性愈伤组织生长减缓,使正常胚性愈伤组织在NaCl 胁迫下与耐盐胚性愈伤组织的生长差异消失。也许这是由于细胞在适应盐胁迫的生理过程中调整蛋白质的合成与降解以适应新的环境。李玲通过百草枯和苯甲酸钠对渗透胁迫下抗旱性不同玉米品种愈伤组织的影响的研究,得出了抗旱性强的品种愈伤组织抗氧化胁迫和渗透胁迫能力强于抗旱性弱品种,并且这是与含高活力抗氧化系统密切相关 的一个结论。同时, 还有人研究了病菌对愈伤组织的影响。汪国平等发现番茄愈伤组织的离体抗性与田问抗性呈相反趋势, 因此在愈伤组织上进行番茄抗青枯病突变体筛选的难度较大。
1.3 植物组织培养面临的一些问题
影响组培外植体褐变的因子, 主要有外植体酚类物质的含量及 P P O活性上的差异、 外植体的大小、 酶促因子对外植体褐变的影响, 以及培养基成分、 激素类型。为解决这个问题 , 可以采取以下几种方法: 将易于褐变的外植体放在黑暗条件下培养一段时间;连续转移; 进行预处理; 在培养基中加入抗氧化剂和其他抑制剂来抑制褐变。陈学森等, 在银杏组织培养中应用了植酸作抗氧化剂, 取得一定成效。植物离体培养及大量快繁过程中,试管苗常会产生玻璃化现象, 吴若菁等在香石竹组培中, 发现影响组培苗玻璃化的原因有以下几种类型: 激素的种类、 浓度; 琼脂的浓度;外植体的取材部位; 不适宜的培养条件。因此采取的克服方法也要因原因的不同而决定。通过愈伤组织培养植株时, 常会出现染色体数目的变异,包括倍性变异和非倍性变异。这种变异普遍认为是有丝分裂异常现象, 可视为染色体数目变异和结构变异最直接的细胞学证据。
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