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晚香玉组培技术研究二



录入时间:2009-7-10 14:09:12 来源:青岛银河澳门官网入口

2.3 不同浓度的6-BA NAA 2 个品种愈伤组织诱导分化的影响

将实验中诱导的愈伤组织转接在9 个处理的培养基上.20d 转接1 次,30d 后结果分析见表3 。

由表3 、图2 、图3 可得:2 个品种的分化效果和最佳分化培养基有差异,在单瓣叶片分化中,最佳配方为:MS + 6-BA1.0mg / L + NAA0.5mg/L , 6-BA / NAA 的比值为2 : l ;重瓣叶片分化的较适培养基为:MS + 6 – BA0.5mg/L + NAA0.2mg/L , 6-BA / NAA 的比值为2.5 : 1 。
2.4
不同培养基对2 个品种试管苗生根的影响及其对比性研究
根据正交设计中的4 因素3 水平L9 ( 34 )设计,将实验中长度约2cm 左右且基部带有小鳞茎的芽取出,插人生根培养基中诱导生根20d 后结果见表4 , 直观分析见表5 、方差分析见表6 。
从上表分析可得:极差x ( 1 ) > x ( 4 ) > x ( 3 ) > x ( 2 ) ,根据极差的大小顺序排出影响试管苗室生根的因素主次顺序为:培养基>NAA > 6-BA > KT 。各因素最优水平分别为x ( l )水平2 , x ( 2 )水平2 , x ( 3 )水平3 , x ( 4 )水平l ,即1 / 2 MS 培养基,KT0.2mg/L, N AAO.5mg/L, 6-BAO.2mg/L。
由方差分析表得出:因子培养基对生根的影响最大,处理1 2 之间差异达显著水平,与处理3 之间差异达到极显著水平,因子NAA 在处理1 2 之间差异达到显著水平,因子KT 在处理1 3 之间差异达到显著水平,因子6-BA 影响最小,未达到显著水平,这与直观分析结果一致。
2.5
炼苗移栽
试管苗出瓶最好选择在生长旺盛的春季,不定根达到1.5 2cm 时可以出瓶移栽。生根苗从培养基中取出后,将根部的培养基冲洗干净,移栽于壤土:腐叶土:河沙为5 : 3 : 1 (体积比)基质中,成活率可达98 %。
3
结论
对晚香玉材料进行诱导培养,取材部位和时间差异关系到快速繁殖的成败。经过初步试验叶片比鳞茎更适合做外植体材料,叶片可大大降低污染率,而鳞茎的污染率极高,这可能与晚香玉病毒病有关。在取材时间上如在生长季节剪取生长旺盛的部分作为外植体,容易形成愈伤组织和不定芽。当母株停止生长或进人休眠期,则不易诱导细胞分裂和分化。而对于外植体大小而言,过大的外植体不仅浪费材料还容易造成污染,但过小会导致存活率较低,试验发现将晚香玉叶片切成约1 cm 左右的小块,最适合培养。由于晚香玉自身组织从表面向培养基释放褐色物质,导致培养基逐渐变成褐色,外植体也随之进一步变褐死亡。为控制褐变,可以在培养基中加活性炭吸附,褐变可大幅度减少,效果十分明显。
激素是植物组织培养器官分化的关键因素。器官的形成受制于培养基中不同激素的相对浓度配比,而不是这些物质的绝对浓度。有人在对杨树叶片的愈伤诱导和愈伤组织分化中也得出类似结论。本试验在对晚香玉叶片的愈伤诱导、分化和生根的研究中也发现激素之间存在一定的相关性,即最佳诱导愈伤形成和愈伤组织分化的过程中6 BA/NAA 的比值在2 : 1 3 : 1 之间,但NAA 浓度如果高于1.5mg/L或低于0.2mg/L诱导效果显著下降。这也进一步证明了Sk00g Miler 提出的关于植物激素可调控器官发生的概念― 通过改变培养基中生长素和细胞分裂素的相对浓度可以控制器官的分化。

 

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