晚香玉组培技术研究一
录入时间:2009-7-10 14:08:40
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摘要：以单瓣、重瓣两个晚香玉品种叶片为材料，选用4 种升汞消毒时间、6 种愈伤组织诱导培养基、6 种分化培养基和9 种生根培养基，研究不同基因型和激素组合对再生体系建立的影响。结果表明：( l ）叶片的消毒时间为0.1 % HgC12 浸泡min ; ( 2 ）诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：Ms + 6-BA2.Omg / L 十NAA1.Omg / L ；诱导重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS + 6-BA1.5mg / L + NAA0.5mg/L( 3 ）单瓣叶片分化最佳配方为：MS + 6-BA1.0mg / L + NAAO.5mg / L ；重瓣叶片分化的较适培养基为：Ms 十6-BAO.5mg / L + NAAO.2mg/L( 4 ）诱导生根的最佳培养基为：1 / 2 MS 十KTO.2mg / L + NAAO.5mg / L + 6-BAO.2mg / L 。
关键词：晚香玉；叶片；组织培养；再生体系晚香玉又名夜来香、月下香、玉答花，为石蒜科晚香玉属多年生宿根草本植物。花具浓香，至夜晚香气更浓，故名夜来香。由于其浓香，花茎细长，线条柔和，栽植和花期调控容易，因而是非常重要的切花之一，是花束、插花等应用中的主要配花。
晚香玉是目前国内外重要的切花品种之一，花香浓郁，可提炼香精，是香水的主要原料之一，具有很高的经济价值。该香精在上等的优质香水中可以找到，特别是清幽类型的香水。但该花的纯香精的产量很低，每1180.4kg 这种花朵只能生产出7 盎司（约28.359 ）的香精，提取率仅为0.0024 % ，所以它比同等重量的黄金价格还昂贵。
目前在生产上仅有单瓣和重瓣两个品种供商业化栽培，且采用鳞茎繁殖，缺乏优选复壮和外界进行品种交流，导致品种单一、花色单一，另外晚香玉虽属自花受粉植物，但由于雌蕊晚于雄蕊成熟，自然结实率低，急需通过组织培养途径产生变异品系或导人基因加工育种，创造新品种，因此，组织培养技术对提高晚香玉质量及降低生产成本等方面都具有重要的意义。但对于这两个品种的叶片再生体系的研究尚未见报道。笔者在对晚香玉叶片的再生体系的研究，主要是探讨诱导两个品种叶片的愈伤组织、丛生芽和生根的较适合的培养基种类以及激素的配合，为建立高效的再生体系及今后的转基因方面的研究打下基础.
1 材料和方法
1.1材料
试验材料由被誉为“晚香玉之乡”的天津中北镇曹庄提供的单瓣和重瓣两个品种。
从表1 可得：在0.1 % HgCl2溶液中，浸泡时间与污染率、出愈率成反比。这可能与HgCl2溶液对叶片的毒害作用有关，时间越长，毒害作用越大，从而影响细胞活性，降低出愈率研究中，0.1 % HgCl2溶液消毒2min 为最佳处理，单瓣叶片的污染率为8.89 % ，出愈率为93.9 % ；重瓣叶片的污染率为11.ll % ，出愈率为96.25 ％。
2.2 2个品种愈伤组织诱导效果的对比性试验将2 个品种的叶片分别接种到1 一9 号培养基上。5d 后，叶片边缘普遍肿胀、皱曲，部分叶片表面隆起，10d 后叶片切口处可见白色、淡黄或淡绿色愈伤组织产生。20d 后，切片边缘密生黄色或绿色愈伤组织。30d后，愈伤组织迅速增殖膨大呈瘤状，试验结果见表2 、图l 。
从表2 和图1 可得：诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：Ms + 6-BA2.0mg/L + NAA1.0mg/L；诱导重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS + 6-BA1.5mg/L＋NAAO.5mg/L.2 个品种的诱导愈伤的效果存在一定差异，但整体趋势又具有一定的相似性，其最佳诱导处理出现两个主要的波峰，即I 一2 、I 一6 这2 个处理上，诱导愈伤组织的效果与6-BA / NAA 比值也呈现一定的相关性，其比值大体在2 : 1 一3 : 1 之间，但过高的NAA 浓度也会抑制愈伤组织的形成，因此在注意激素比例的同时还应避免使用过高浓度的NAA ．另外，在实验中对愈伤组织的观测发现，单瓣叶片的愈伤组织多为淡绿色，而重瓣叶片得愈伤组织多为淡黄色，这可能是由品种间的差异所导致。
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