猪流感病毒(Swineinfluenzavirus)
1918年,美国最先报道发生猪流感,发病猪达数百万头,死亡数千头,并被认为与1918~1919年的人类流感大流行有关。值得注意的是,许多经历过1918~1919年流感大流行的老年人,体内抗猪流感HA的抗体和中和抗体维持相当长的时间。Shope于1930年由猪分离获得第一株流感病毒,即A/猪/衣阿华/30株。,三年后,Smith等才分离获得人的流感病毒。人们原来认为猪流感是流感病毒和猪嗜血杆菌协同感染的结果。但是业已证实,单用猪流感病毒也可使猪发生流感。因此,猪嗜血杆菌虽然是猪流感病毒的主要伴发或继发性细菌,但并不一定是猪流感不可缺少的病原因子。此外,巴氏杆菌、双球菌、链球菌等也常参与猪流感的继发感染。
〖BT4〗1.抵抗力〖HT5SS〗猪流感病毒对干燥和冰冻的抵抗力强。病料中的病毒在50%甘油中活存40天。60℃加热20分钟灭活。一般消毒剂对其均有灭活作用。
〖BT4〗2.培养〖HT5SS〗猪流感病毒能在鸡胚中培养增殖,并能在猴肾细胞、胎猪器官培养内生长。当今最常应用10日龄鸡胚的羊膜腔或羊膜腔—尿囊腔同时接种法分离猪流感病毒。感染鸡胚大多不死亡,但鸡胚液中出现HA。
〖BT4〗3.抗原性〖HT5SS〗致使猪发生流感的甲型流感病毒包括两个病毒亚型,甲1型(H1N1)和甲3型(H3N2)。据国内外少数研究资料报道,在猪血清中有甲2型病毒抗体存在。我国郭元吉等也已从北京地区猪群中分离到甲3型和甲1型病毒。法国学者从猪中分离出流感病毒H1N2亚型,由抗体的检测调查研究和病毒分离研究都表明,猪源的甲1型和甲3型病毒都与禽源分离株和人的相应亚型相关。随着人类新亚型暴发流行,在猪群中也出现了相应亚型的流感病毒和血清抗体,说明猪群中流感的流行与人类流感的流行有着十分密切的关系。关于猪流感病毒的来源问题,有人认为1918年引起人流行时的病毒,以某种方式从人传给了猪,并作为猪的地方性流行病而被存留下来。业已证明,人的流感病毒可以自然感染其它动物,例如人的甲3型病毒可以自然感染猪,从猪中分离的A/猪/台湾/69(H3N2)株,其表面抗原和人流感的A/香港/1/68(H3N2)株病毒完全一样,并且可以在猪体内增殖。
〖BT4〗4.病原性〖HT5SS〗各种不同年龄、性别和品种的猪对猪流感病毒均有易感性。猪流感的传染源是病猪和带毒猪(痊愈后带毒6~8周)。病毒存在于病猪或带毒猪的鼻液或气管、支气管渗出液以及肺和肺淋巴结内。传染途径主要是呼吸道。有人认为,寄生在病猪肺内的猪肺丝虫及其排出的虫卵,也含有猪流感病毒,并可随着虫卵(通过蚯蚓)发育成侵袭性幼虫,再传给健猪。病毒隐伏在肺丝虫体内,只有猪受到某些外因刺激而降低抵抗力时,病毒才能脱离肺丝虫而引起发病。但由于缺乏病毒在肺丝虫体内存活和增殖的直接证据,所以有人不同意上述说法。猪流感的流行有较明显的季节性,大多发生在天气骤变的深秋和早春以及寒冷的冬季,特别是在并发猪嗜血杆菌感染时,疾病传播迅速,往往在2~3天内全群发病,常呈地方性流行或大流行。病程较短,如无并发症,病猪可在7~10天康复。如有继发感染,可使病势加重,致发出血性支气管肺炎或肠炎而死亡。本病发生突然,全群体温突然升高(40~42℃),食欲减退或废绝,精神极度萎顿,常卧地不愿起立。呼吸急促,呈腹式并常夹杂阵发性咳嗽。从眼和鼻流出粘性分泌物,鼻分泌物有时带血。病变主要在呼吸器官。鼻、喉、气管和支气管粘膜充血,表面有大量泡沫状粘液,有时混有血液。肺部病变轻重不一,有的只在边缘部分有轻度炎症;严重时,病变部呈紫红色。病理组织学检查,可见卡他性支气管肺炎变化,细菌学检查,常可发现嗜血杆菌。实验条件下可使小鼠、雪貂感染发病,主要表现肺炎症状。1976年春,美国新泽西州新兵中曾发生猪流感病毒感染的局部暴发。
〖BT4〗5.诊断〖HT5SS〗根据流行病学、临床症状和剖检变化,常可作出初步诊断。为了进一步确诊,可采取发病2~3天急性病猪的鼻分泌物或气管、支气管渗出物作为病料,进行病毒分离。也可扑杀急性病猪,采取脾、肝、肺和肺淋巴结等作为病毒分离材料。分离病毒,常用9~11日龄的鸡胚。将接种材料用灭菌缓冲生理盐水适当稀释后,经3000r/min离心沉淀10分钟,吸取上清液,加入青、链霉素,使每毫升接种液中的青、链霉素最终含量为1000u,4℃感作1小时,按羊膜腔和尿囊腔及尿囊腔各02ml的量,做同时接种。将接种后的鸡胚置33~35℃孵育3天,随后按常规方法采集羊水和尿囊液,并分成三份:一份保存于低温冰箱中备用;一份作红细胞凝集试验,检查有无HA;另一份则用于传代。如果盲传3代仍无HA出现,则为阴性结果。如果出现HA,即可进行病毒鉴定,以新分离病毒作为HA抗原,应用已知的各亚型毒株的免疫血清进行血凝抑制试验。以诊断为目的,也可采取病猪急性期和恢复期(相距2~3周)的双份血清,进行血凝抑制试验。如果恢复期血清的抗体效价比急性期血清升高4倍以上,即可诊断为流感。因猪血清中含有非特异性红细胞凝集物质和非特异性血凝抑制物质,故在进行血凝抑制试验时,必须将其去除。一般用下述方法:取血清1份,加入霍乱滤液〖ZW(*〗关于“霍乱滤液”的制备方法,请见本书第一版665~666页。〖ZW)〗3份,37℃水浴过夜。随后再以56℃水浴处理30分钟,破坏残存滤液的酶活性。取上述处理的血清1份,加入1/90mol/L的过碘酸钾(KIO3)2份,室温作用30分钟后,再加1份2%的甘油盐水。最后加入血清原量1/2的已经洗涤的沉淀鸡红细胞,充分混合,置室温中处理1小时,其间振荡2~3次,再以1500r/min离心10分钟,吸取上清液进行试验。经此法处理的血清,其稀释度已为1∶5。
〖BT4〗6.免疫〖HT5SS〗猪在流感痊愈后,产生比较坚强持久的免疫力,极少发生第二次感染。但康复猪却可能成为较长期的带毒和排毒者。因此,病后康复的种猪,可能成为传播本病的慢性带毒者。有关猪流感疫苗,特别是福尔马林灭活疫苗的研究报告较多,据云可以提高猪的免疫力,但尚未见推广应用。
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