铁皮石斛组织培养研究进展二
录入时间:2009-7-9 10:49:18
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2 原球茎增殖
2.1 基本培养基
铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。张治国等研究了6 种不同培养基对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果表明,l /2 MS 是原球茎增殖的适宜培养基。
2.2 激素
适宜的NAA 、KT 、6 一BA 浓度对原球茎的增殖起促进作用。唐桂香等以1 / 2 MS 为基本培养基,发现BA 1.0mg/L和NAAO.lmg/L有利于原球茎诱导增殖。蒋林等叫研究表明,l / 2Ms + NAA1.0mg/L+ KTO.2mg/L比较适合嗓球茎的增殖。蒋波等以1 / 2MS 为基本培养基.添加BA 2.0mg/L + NAA0.5mg/L或6 一BA3.0mg/L + NAAO.5 mg/L的激素,原球茎的增殖系数较大。陈兆贵等认为原球茎增殖以MS + NAA1.0mg/L + 6 一BA1.0mg/L + KT1.0mg/L为最佳,35d 增殖倍数达到5 倍。
2.3 天然添加物
椰子汁、苹果汁对原球茎的增殖有较好的效果,但香蕉汁对原球茎的增殖有抑制作用。张治国等认为原球茎增殖时最好不添加任何天然提取物。
2.4 炭源
添加活性炭能使原球茎的增殖量显著增加,这可能是活性炭吸附了某种不利于原球茎增殖的物质,蔗糖浓度0.5 %~0.3 %。周根余等比较了不同炭源对铁皮石斛原球茎生长的影响,发现原球茎在蔗糖中生长最快,浓度3 % ,葡萄糖中其次,而乳糖中最慢。
3 原球茎分化
3.1 基本培养基
铁皮石斛原球茎分化可以1 / 2 MS, MS 等作为基本培养基。张治国等比较了VW 、N6、l / 2MS 、B5、KC 等6 种基本培养基对原球茎分化的影响,发现6 种基本培养基附加马铃薯提取液和植物激素后,原球茎均可分化,但以1 /2MS 培养基作为原球茎分化的基本培养基最适宜,叶色浓绿,出苗整齐,这与刘瑞驹等困的报道一致。
3.2 激素
培养基中添加BA 和NAA 后可加快原球茎分化的进程。张治国等报道了BA 和NAA 不同的组合及浓度对原球茎分化的影响,在分化前期(40d ) ,高浓度的BA 和低浓度NAA 组合,加快原球茎分化进程,1 一2 片叶的分化苗占50 %以上,以2mg/L BA 和0.2mg/L NAA 组合最好。培养到60d 后NAA 浓度高的组合,分化苗整齐.尤其是0.2mg/LBA 和2mg/LNAA 组合,小苗生长发育快。蒋波等报道以1 / 2 MS 为基本培养基,添加BA2.O mg/L + NAAO.2 mg/L或BA3.Omg/L十NAAO.2mg/L的激素,有利于原球茎的分化。陈兆贵等以MS + NAA1.Omg/L + 6 一BAmg/L + KT1.0mg/L为培养基,45d 原球茎分化率达84 %。罗吉凤等认为原球茎分化适宜的培养基为1 / 2MS 十BA2mg/L+ NAA 0.2mg/L十IBAO.1mg/L+蔗糖3%。唐桂香等研究发现,BA 对原球茎诱导芽影响大,而NAA 对原球茎诱导芽影响小。
3.3 天然添加物
土豆汁、马铃薯提取液能有效促进原球茎的分化,香蕉汁对原球茎的分化有抑制作用。
3.4 炭源
培养基中加人活性炭能促进原球茎的分化际。张治国等研究了蔗糖浓度对原球茎分化的影响,发现蔗糖为2 %时,分化率为100 % ,此时原球茎的增殖率达最高,当蔗糖为3 %时,原球茎不再分化,且增殖率随蔗糖浓度的增高而下降。这可能是因为培养基的渗透压过高,抑制了原球茎的分化和生长。故在原球茎分化中,蔗糖浓度以3 %为分化的临界值,而蔗糖2 %为原球茎分化的适宜浓度。
4 生根与壮苗
4.1 基本培养基
铁皮石斛试管苗生根壮苗常用的基本培养基有1/2 MS、MS、B5、N6等。赵天榜等研究N6、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚苗生长的影响,以从最好,SH 、MS 次之,1 / 2MS 、1 / 2VW 最差。张玲等比较了MS 、B5、N6 、KC 四种培养基对幼苗生长的影响,发现N6培养基最有利于幼苗的生长,其株高和根数都比其它培养基好,B5次之。刘弊等比较了1 / 2 MS 、B5、VW 、KC 等4 种基本培养基对试管苗生长的影响,发现培养到120d 时,残培养基上的小苗生长最好,其次为l /2MS 培养基,而KC 和VW 培养基上的试管苗生长明显不如B5和1 / 2 MS 。
4.2 激素
在基本培养基中添加NAA、IAA、IBA等激素有助于试管苗生根壮苗。赵天榜等在1 / 2N6培养基内添加2mg/L或lmg/L NAA ,可提高石斛种胚苗分桑率6 . 00 一7.14 倍。唐桂香等研究了不同NAA 含量对铁皮石斛苗成活率和生根的影响,结果表明NAA 有助于试管苗的生根,以0.5mg/L试管苗平均根数最多和平均根长最长。
4.3 天然添加物
在基本培养基中加人香蕉汁、马铃薯汁、孽葬汁、绿豆芽汁、苹果汁仁、椰子乳等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育,香蕉汁的促进作用最为显著。
4.4 炭源
铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长,能使根系长得更加粗壮闭。唐桂香等认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率,但对苗的根数和根长影响小。
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