铁皮石斛的组织培养与快速繁殖三
录入时间:2009-7-8 10:06:52
来源：青岛海博
3 讨论
3.1 铁皮石斛快速繁殖受基本培养基、添加物和植物激素的影响
铁皮石斛采用蔗糖浓度3 % , pH 值5.6 固体培养基培养。培养基常用MS , 1/2MS , KC ( Knudson ) , 1/2KC ；激素种类有NAA , 6-BA ；附加物为马铃薯汁、椰乳汁、黄瓜汁、香蕉汁等。在进行铁皮石斛培养时，要根据培养材料与培养目的物的不同，选用不同的培养基、激素和添加物种类。本实验选用的是MS 培养基，所用的添加物为20 ％香蕉汁。
3.2 组培苗生长
幼苗用MS 培养基比用KC 培养基培养生长好。NAA 、香蕉和马铃薯提取液能促进根系生长，从而使试管苗的生长加快。试验中我们常采用MS 为基本培养基，添加香蕉提取液和NAA 培养试管苗。
幼苗必须在试管中充分生长，达到一定大小才能出管移栽，这即为壮苗培养。在这个阶段中，为使幼苗各种代谢机能比较稳定，所应用培养基应该以比较简单为宜，而且培养基离子浓度不能太高，离子浓度太高易引起幼苗生长停滞或畸形，成为僵苗或畸形苗。
3.3 丛生芽的增殖
将带有一个芽的铁皮石斛茎段接种于MS 培养基（每种培养基中均加人20 ％的香蕉汁）上，每个梯度的外殖体数定为20 ，在温度为22 ℃ ，每天光照12h ，光照强度为2 OO0lx 的条件下，培养60d 后观察得6-BAS + NAA 0.3mg/L 组铁皮石斛的丛生芽增殖率高。
3.4 壮苗与生根
将小苗接种到生根培养基中，20d 左右小苗的茎节上开始出现根的分化，接种3Od 后小苗长出浅绿色长度0.8 一1 cm 、直径0.1 一0.2 cm 的小根，60d 后根长度最长可达5 cm 以上。6-BA 主要促进细胞的分裂、诱导芽的分化，而NAA 主要促进生根，但是芽或根的分化主要取决于细胞分裂素／生长素的比值。就根的诱导率而言，6-BA 2.Omg/L + NAA 0.1 mg / L 组最高，达到60 % , NAAO.3mg/L 组诱导率也较高，在40 ％以上，NAA 浓度提高到0.5mg/L，根的诱导率反而下降。就平均根数而言，NAA 浓度在0.3mg/L 时，根数较多。在相同NAA 浓度的条件下，6-BA 浓度越高，根的诱导率越低。因此较佳的6-BA 和NAA 配比是6-BA 2.0mg/L + NAA 0.lmg/L 。
3.5 培养条件
组培苗在光照度为2000lx ，温度以22 ℃ 为宜。石斛种子萌发需要较高温度，在25 ℃ 以上萌发生长较快，当温度低于10 ℃ 时，即使满足营养条件也不能萌发。温度对铁皮石斛的生长也产生影响，在20 一22 ℃ 时丛生芽增殖较好，温度超过25 ℃ 丛生芽就开始分化成苗。
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